細菌保存的方法(細菌,培養(yǎng)物,甘油,瓊脂平板)

1、細菌保存于穿刺培養(yǎng)物中

一般細菌保存于穿刺培養(yǎng)物可以維持兩年奸柬。

具體方法如下:

用滅菌接種針挑取分散良好的單菌落生年,針緩慢穿過瓊脂到達瓶底,連續(xù)幾次廓奕,蓋上瓶蓋擰緊抱婉,做好標記。室溫下存放于暗處桌粉。(最好一點可以將瓶蓋放松蒸绩,在適當溫度下培養(yǎng)過夜,再擰緊瓶蓋并加封Parafilm膜铃肯,室溫或最好在4度避光保存)患亿。

2、細菌保存于含有甘油的培養(yǎng)物中

(1)在液體培養(yǎng)基中生長的細菌培養(yǎng)物:

取0.85ml細菌培養(yǎng)物缘薛,加入0.15ml高壓滅菌甘油窍育,振蕩培養(yǎng)物使甘油分布均勻卡睦,然后轉(zhuǎn)移到標記好的保存管內(nèi),密封漱抓,在乙醇-干冰或液氮中凍結(jié)后再轉(zhuǎn)至-70度長期保存表锻。在復蘇時,用滅菌接種針刮取凍結(jié)的培養(yǎng)物表面乞娄,然后立即把黏附于接種針上的細菌劃于含適當抗生素(antibiotic)的LB瓊脂平板表面瞬逊,于37度過夜。

(2)在瓊脂平板上生長的細菌培養(yǎng)物:

從瓊脂平板表面刮下細菌放入裝有2mlLB的無菌試管內(nèi)仪或,再加入等量的含有30%滅菌甘油的LB培養(yǎng)基确镊,振蕩使甘油完全分布均勻后,分裝于無菌保存管內(nèi)范删,密封蕾域,再按前述方法冰凍保存。這一方法的優(yōu)點在于可用于保存在質(zhì)粒載體上建立的cDNA文庫到旦。

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