RNA干擾（RNA interference讯榕，RNAi）是近年來(lái)生命科學(xué)領(lǐng)域最為重大的發(fā)現(xiàn)之一锐朴。它是指小分子雙鏈RNA可以特異性地降解同源mRNA,從而抑制或關(guān)閉特定基因表達(dá)的現(xiàn)象饱亮。人們只要知道了某種疾病的致病基因壶栋，就可以設(shè)計(jì)出針對(duì)該基因mRNA的小分子干擾RNA（Small interfering RNA必盖，siRNA）沫屡，抑制或封閉該致病基因的表達(dá)饵隙，從而達(dá)到治療疾病的目的。RNAi是目前最為熱門(mén)的生命科學(xué)研究領(lǐng)域沮脖，RNAi轉(zhuǎn)染是目前最為常見(jiàn)的基因功能研究實(shí)驗(yàn)之一金矛。
實(shí)施RNAi，將siRNA導(dǎo)入細(xì)胞有多種方法勺届，包括化學(xué)轉(zhuǎn)染法驶俊、電穿孔法、磷酸鈣共沉淀法免姿、顯微注射法等饼酿。其中，化學(xué)轉(zhuǎn)染法是目前最為常用的方法养泡，由于電轉(zhuǎn)的方法對(duì)細(xì)胞損傷比較大嗜湃，一般不建議選擇電轉(zhuǎn)±窖冢化學(xué)轉(zhuǎn)染能否成功的關(guān)鍵在于選擇RNAi轉(zhuǎn)染試劑购披，市場(chǎng)上現(xiàn)在有多種聲稱(chēng)可以轉(zhuǎn)染siRNA的試劑，但真正轉(zhuǎn)染性能較好肩榕、比較知名的產(chǎn)品就那么幾個(gè)刚陡，包括RNAiMAX惩妇、 RFect小核酸轉(zhuǎn)染試劑、Lipo2000筐乳、Lipo3000等歌殃。在選擇siRNA轉(zhuǎn)染試劑時(shí)，特別需要關(guān)注的是siRNA的劣效轉(zhuǎn)染蝙云。所謂siRNA的劣效轉(zhuǎn)染是指氓皱，轉(zhuǎn)染試劑雖然可以把熒光標(biāo)記的siRNA （FAM-siRNA、CY3-siRNA勃刨、CY5-siRNA等）轉(zhuǎn)染入細(xì)胞波材，但RNAi效果卻很差，甚至幾乎沒(méi)有身隐。劣效轉(zhuǎn)染常見(jiàn)于一些陽(yáng)離子聚合物（主要為PEI）和陽(yáng)性脂質(zhì)體類(lèi)siRNA轉(zhuǎn)染試劑廷区，其出現(xiàn)的根本原因在于，陽(yáng)離子聚合物和陽(yáng)性脂質(zhì)體可以與siRNA緊密結(jié)合贾铝，能夠?qū)⑵滢D(zhuǎn)染入細(xì)胞隙轻，但在進(jìn)入細(xì)胞后，siRNA卻無(wú)法有效釋放垢揩，因而在熒光顯微鏡下雖然可以看見(jiàn)較強(qiáng)的FAM-siRNA熒光玖绿，但RNAi的效果卻很差，RT-qPCR檢測(cè)水孩，目的mRNA并沒(méi)有得到有效的敲降镰矿。在一些聲稱(chēng)可以做siRNA轉(zhuǎn)染的國(guó)內(nèi)試劑中，劣效轉(zhuǎn)染尤為常見(jiàn)俘种。
具體說(shuō)到RNAi轉(zhuǎn)染試劑，筆者的建議是绝淡，對(duì)于一些經(jīng)費(fèi)特別充足的研究者宙刘，可以選擇RNAiMAX，mRNA敲降效果明顯牢酵，品牌也足夠權(quán)威悬包。對(duì)于大多數(shù)經(jīng)費(fèi)不是特別充足的研究者來(lái)說(shuō)，RFect小核酸轉(zhuǎn)染試劑是個(gè)不錯(cuò)的選擇馍乙。mRNA敲降效果與RNAiMAX相當(dāng)布近，同樣量的siRNA，RNAi效果甚至超過(guò)了RNAiMAX丝格，不足之處為品牌不夠強(qiáng)大撑瞧，號(hào)召力有待提升。其它如Lipo2000显蝌、Lipo3000预伺，也很不錯(cuò)，但mRNA敲降效果不如RNAiMAX和RFect。
