建細(xì)菌進(jìn)化樹的策略

前面寫了16S rDNA進(jìn)化樹监徘。關(guān)于細(xì)菌基因組水平诚欠,下面記錄這篇文章用了三種不同的流程reconstruct phylogenetic structure的策略婚度。

標(biāo)題:Extensive Unexplored Human Microbiome Diversity Revealed by Over 150,000 Genomes from Metagenomes Spanning Age, Geography, and Lifestyle
雜志:CELL
時(shí)間:2019

策略一(Figure 1)

PhyloPhlAn軟件
400 universal PhyloPhlAn markers構(gòu)建phylogeny
phylophlan參數(shù):--diversity high --accurate --min_num_markers 80

Internal steps:
diamond:
blastx --quiet --threads 1 --outfmt 6 --more-sensitive --id 50 --max-hsps 35 -k 0
diamond:
blastp --quiet --threads 1 --outfmt 6 --more-sensitive --id 50 --max-hsps 35 -k 0
mafft --anysymbol 對齊
trimal -gappyout 修剪
RAxML -m PROTCATLG -p 1989 建樹

策略二(Figure S3)

PhyloPhlAn軟件
400 PhyloPhlAn markers reconstruct phylogeny
phylophlan參數(shù):--diversity high --fast --min_num_markers 80

Internal steps:
diamond:
blastx --quiet --threads 1 --outfmt 6 --more-sensitive --id 50 --max-hsps 35 -k 0
diamond:
blastp --quiet --threads 1 --outfmt 6 --more-sensitive --id 50 --max-hsps 35 -k 0
mafft --anysymbol 對齊
trimal -gappyout 修剪
RAxML -m PROTCATLG -p 1989 建樹

IQ-TREE -nt AUTO -m LG 建樹

策略三(Figure 3)

Roary identified set of cores genes at 95%

roary -e -n -v -p 4 -i 95 \
-f ./result_roary/ \
./out/*.gff

PhyloPhlAn --diversity low --fast
--min_num_markers <50% of the number of core genes identified>
--min_num_entries <90% of the number of input genomes>

--diversity {low,medium,high}
                        Specify the expected diversity of the phylogeny,
                        automatically adjust some parameters: "low": for
                        genus-/species-/strain-level phylogenies; "medium":
                        for class-/order-level phylogenies; "high": for
                        phylum-/tree-of-life size phylogenies (default: None)
--fast                Perform more a faster phylogeny reconstruction by
                        reducing the phylogenetic positions to use; affected
                        parameters depend on the "--diversity" level (default:
                        False)
--min_num_markers MIN_NUM_MARKERS
                        Input genomes or proteomes that map to less than the
                        specified number of markers will be discarded
                        (default: 1)
--min_num_entries MIN_NUM_ENTRIES
                        The minimum number of entries to be present for each
                        of the markers in the database (default: 4)

blastn -outfmt 6 -max_target_seqs 1000000
mafft --anysymbol --auto 對齊
trimal -gappyout 修剪
FastTree -mlacc 2 -slownni -spr 4 -fastest -mlnni 4 -no2nd -gtr -nt 建樹
RAxML -p 1989 -m GTRCAT
-t <phylogenetic tree computed by FastTree>

NMDS基于 Roary 遺傳距離

The non-metric multidimensional scaling plots were computed on pairwise genetic distances between core gene alignments produced by Roary using the nmds function in the ecodist R package

可視化

The phylogenetic trees were generated using GraPhlAn and the phylogenies were generated using FigTree

還有更多的方法

文章:Insights on the Evolutionary Genomics of the Blautia Genus: Potential New Species and Genetic Content Among Lineages
雜志:Frontiers in Microbiology
時(shí)間:2021

策略四

OrthoFinder獲取conserved gene families (Orthogroups)
perl retrieve protein sequence
MAFFT (L-INS-i mode)對齊Orthogroups
ModelTest-NG:
Akaike information criterion (AIC)
IQ-TREE 2:
1000 replicates of ultrafast bootstrap
UFBOOT trees by NNI (–bnni)
SH-like approximate likelihood ratio test (–alrt)

策略五

panX core genome to construct single nucleotide polymorphism (SNP)-based tree
cophylo比較phylogenomic aminoacid and the SNP-based trees

TypeMat from the Microbial Genomes Atlas (MiGA) 進(jìn)行細(xì)菌分類剔除anomalous classification

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