??COVID-19大流行依舊繼續(xù)著勾效,有些人放棄了茸苇,但有些人還在堅(jiān)持著各吨,以他們自己的方式在對(duì)抗著枝笨。
??目前,針對(duì)COVID-19的診斷還是主要以基于Taqman探針?lè)ǖ腞T-qPCR方法進(jìn)行揭蜒。但如何根據(jù)快速而準(zhǔn)確地進(jìn)行診斷篩選也是研究者們不斷探索的方向横浑。今天分享的這項(xiàng)研究就是基于CRISPR開(kāi)發(fā)的,無(wú)需進(jìn)行樣本擴(kuò)增即可實(shí)現(xiàn)新冠病毒快速檢測(cè)的方法——FIND-IT屉更。
FIND-IT原理:靶向RNA的Cas13a在識(shí)別到目標(biāo)RNA后徙融,除了Cas13a本身可以切割目標(biāo)RNA外,其旁切活性(無(wú)差別降解RNA的能力)也會(huì)被激活瑰谜,從而導(dǎo)致攜帶Csm6的激活因子釋放欺冀,Csm6激活后可以更加快速切割熒光探針,實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)似舵。
PS.
1.其實(shí)本身基于Cas13a的旁切活性就可以進(jìn)行新冠病毒的快速檢測(cè)(Ref 1)脚猾,但是這種方法的檢測(cè)靈敏度偏低,僅能達(dá)到約1600拷貝/μL樣本砚哗;而結(jié)合Csm6后龙助,其檢測(cè)靈敏度可以提高到30拷貝/μL樣本。
Reference
- Fozouni, P. et al. Amplification-free detection of SARS-CoV-2 with CRISPR-Cas13a and mobile phone microscopy. Cell 184 (2021).
- Liu, T. Y. et al. Accelerated RNA detection using tandem CRISPR nucleases. Nat Chem Biol 17, 982-988 (2021).