Simoa單分子免疫陣列分析技術(shù)是目前市面上最靈敏的蛋白分子檢測技術(shù)遏考，其可以檢測單個蛋白分子慈鸠，靈敏度達(dá)到飛克級別。在腫瘤诈皿、神經(jīng)林束、感染免疫、心血管稽亏、炎癥、生殖缕题、眼科等領(lǐng)域都有著廣泛應(yīng)用截歉。Simoa平臺是一個開放的研究平臺，除現(xiàn)有的商品化試劑盒之外烟零，各領(lǐng)域的研究人員都可自行進行方法開發(fā)及分析瘪松。
來自美國加利福尼亞和比利時比爾塞的科學(xué)家通過自行方法開發(fā)對p217+tau進行了研究咸作，并將該檢測方法應(yīng)用于阿爾茲海默癥（AD）的臨床應(yīng)用評價。
Development and validation of a high-sensitivity assay for measuring p217+tau in plasma
Alzheimers Dement (Amst). 2021 May 27;13(1): e12204（IF=14.48）
淀粉樣蛋白β（A）宵睦、微管相關(guān)蛋白tau蛋白（T）和神經(jīng)退行性病變（N）為AD的臨床診斷標(biāo)志记罚。本文利用Simoa平臺開發(fā)了p217+tau的檢測方法，對227名受試者的血漿p217+tau蛋白進行了定量檢測壳嚎，并對其做出臨床應(yīng)用評價桐智。
結(jié)果顯示：p217+tau血漿檢測方法準(zhǔn)確、精密烟馅、稀釋線性好说庭、靈敏度高。所有檢測的樣本濃度均在線性范圍內(nèi)郑趁，AD組的濃度高于健康對照組刊驴，血漿和腦脊液水平相關(guān)。血漿p217+tau結(jié)果可預(yù)測中樞T和A狀態(tài)寡润。
兩步法與三步法檢測的比較?
對96例腦脊液（CSF）標(biāo)本進行檢測捆憎，兩步法和三步法的檢測結(jié)果緊密相關(guān)（r2??= 0.939）。對10個血清樣本進行檢測時梭纹，在兩步分析法中至少有4個樣本顯示異常高信號躲惰，而三步分析法比較穩(wěn)定。
樣品稀釋液的選擇和優(yōu)化?
使用不同的樣品稀釋液栗柒，用三步法檢測四個樣品（3個AD患者的血清樣品和標(biāo)準(zhǔn)品）的p217+tau濃度礁扮。結(jié)果可知，含HBR9的Tris稀釋液可減少磁珠聚集和假陽性信號瞬沦。
樣本適用性??
本研究檢測了10名健康對照者和16名輕中度癡呆患者的血清和血漿樣本太伊。結(jié)果顯示，輕度至中度癡呆患者的平均濃度明顯高于健康對照組逛钻。然而僚焦，血漿樣本中的p217+tau的濃度約為血清樣本的2倍。
檢測穩(wěn)定性??
本研究開發(fā)的檢測血漿217+tau的方法曙痘，檢測動態(tài)范圍寬芳悲，稀釋線性好。5次不同檢測的標(biāo)準(zhǔn)曲線信號一致边坤。AD患者血清和血漿樣品（n=4）以1:2名扛、1:3、1:4茧痒、1:5和1:6的稀釋度進行檢測肮韧，回收率穩(wěn)定在80%-120%之間，變異系數(shù)小于20%。
檢測靈敏度和準(zhǔn)確性??
本方法開發(fā)檢測血漿p217+tau具有良好的靈敏度和準(zhǔn)確度弄企。5個質(zhì)控樣本（1個AD患者血漿pool樣超燃、1個AD患者血清pool樣和3個標(biāo)準(zhǔn)品緩沖液）分別進行檢測，實驗結(jié)果變異系數(shù)低（5%–15% CV）拘领。對227名受試者（157名輕度至中度癡呆和70名認(rèn)知正常）的血漿樣本進行了檢測意乓，結(jié)果顯示，平均組內(nèi)精確度為7.1%CV（98.2%的樣本的CV<20%）约素。
臨床應(yīng)用??
對16名淀粉樣蛋白陽性癡呆患者的腦脊液和血漿中的p217+tau分別進行檢測届良，顯示中度正相關(guān)（r2?=0.43）。對227名受試者（69%的輕度至中度癡呆业汰，31%的認(rèn)知正常）腦脊液和血漿中的p217+tau進行檢測伙窃，也證實中度正相關(guān)（r2?=0.35）。將樣本分為淀粉樣蛋白（A）陽性（A+样漆，n=160）或陰性（A-为障，n=50）受試者，顯示腦脊液與血漿相關(guān)性僅見于淀粉樣蛋白陽性受試者（A+受試者與A-受試者的r2??= 0.27與0.01）放祟。
此外鳍怨，血漿p217+tau可準(zhǔn)確預(yù)測中樞淀粉樣蛋白陽性和Tau陽性。
?總結(jié)??
血漿p217+tau的檢測是一種高度特異跪妥、精確鞋喇、靈敏度高的方法，可以無創(chuàng)地檢測中樞淀粉樣蛋白和tau狀態(tài)眉撵，有望在不久的將來被納入AD的臨床檢測標(biāo)準(zhǔn)中侦香。
