?免疫組織化學(xué)摔握、免疫細(xì)胞化學(xué)和免疫熒光是生物學(xué)中經(jīng)常用到的三種應(yīng)用，他們的英文名分別是Immunohistochemistry (IHC)丁寄，Immunocytochemistry (ICC)?和Immunofluorescence (IF)氨淌。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室新手來(lái)說(shuō)可能是很容易搞混的泊愧，即便是技術(shù)大拿們可能在寫(xiě)英文文獻(xiàn)的時(shí)候也會(huì)不小心用錯(cuò)，因?yàn)檫@三個(gè)應(yīng)用確實(shí)有些相似盛正，那么下面就隨小編一起來(lái)看一下他們到底區(qū)別在哪里吧删咱。

詞根意義：

Immuno-指的是免疫技術(shù)?（例如，抗體和抗原的結(jié)合）

Histo-指的是組織（細(xì)胞以及它周圍的細(xì)胞外基質(zhì)）

Cyto-指的是細(xì)胞（不包含細(xì)胞外的基質(zhì)）

Chemistry-在這里指的是化學(xué)檢測(cè)方法（例如豪筝，顏色的變化）

Fluorescence-對(duì)被激發(fā)的熒光團(tuán)的檢測(cè)

????? 對(duì)于這三個(gè)應(yīng)用痰滋，有一個(gè)部分大家肯定不會(huì)搞混的就是“免疫-”，因?yàn)檫@三個(gè)應(yīng)用都涉及到使用抗體续崖，問(wèn)題出在當(dāng)你使用熒光劑來(lái)標(biāo)記一抗或者使用熒光標(biāo)記二抗的時(shí)候敲街。IHC和ICC應(yīng)用用中文來(lái)看很好區(qū)分，一個(gè)應(yīng)用的樣本類型是組織（IHC）严望，另一個(gè)樣本類型是細(xì)胞（ICC）多艇，可是一旦使用了熒光標(biāo)記，大家似乎就有點(diǎn)不知道該用哪個(gè)了著蟹，因?yàn)槊庖邿晒庵傅木褪鞘褂昧藷晒鈽?biāo)記墩蔓，這時(shí)就很容易只寫(xiě)一個(gè)IF梢莽，而不去寫(xiě)明到底是組織（IHC）還是細(xì)胞（ICC）萧豆。這也是為什么小編個(gè)人不太喜歡用免疫熒光（IF）來(lái)作為一個(gè)應(yīng)用命名的原因，因?yàn)槊庖邿晒獠荒芴峁┙o你足夠的信息昏名，只是告訴讀者你用了熒光劑涮雷，可是這個(gè)一抗到底是用在組織上的還是細(xì)胞上的呢？所以小編認(rèn)為轻局，應(yīng)用了熒光劑的IHC和ICC應(yīng)該更名為IHF和ICF分別意為Immunohistofluorescence（免疫組織熒光）和Immunocytofluorescence（免疫細(xì)胞熒光）洪鸭，雖然這兩個(gè)詞匯在英文文獻(xiàn)中應(yīng)用的還不是很廣泛，但絕對(duì)不是小編自己杜撰的哦仑扑，已經(jīng)有些學(xué)者在使用了览爵，規(guī)范化應(yīng)該也只是時(shí)間的問(wèn)題，現(xiàn)在來(lái)看幾幅圖片更好的區(qū)分他們吧镇饮！

先不看答案蜓竹，你能看出這些分別是什么應(yīng)用嗎？

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A.?IHC (免疫組織化學(xué))?使用小鼠抗HCN1單克隆抗體?(SMC-304)?對(duì)小鼠小腦的免疫組化分析.?固定:?室溫下10%?福爾馬林溶液處理?12-24小時(shí).?一抗:?小鼠抗HCN1單克隆抗體, 1:1000,?室溫下孵育1小時(shí).?二抗: HRP/DAB?檢測(cè)系統(tǒng):生物素偶聯(lián)的山羊抗小鼠,?鏈霉親和素過(guò)氧化物酶, DAB?色原?(棕色),?室溫下孵育30分鐘.?復(fù)染色: Mayer氏蘇木素?(紫色/藍(lán)色)?細(xì)胞核染色, 250-500uL,?室溫下5分鐘.

B.?ICC（免疫細(xì)胞化學(xué)）使用小鼠抗Hsp70單克隆抗體?(SMC-100)?對(duì)小鼠熱休克的黑素瘤細(xì)胞的免疫細(xì)胞化學(xué)分析.?固定:?福爾馬林.?一抗:?小鼠抗Hsp70單克隆抗體, 1:1000,?室溫下隔夜孵育.?二抗: Biotin?山羊抗小鼠.?圖片來(lái)自: Dr. Ewa Malusecka, Maria Sklodowska-Curie Memorial Cancer Ceter and Inst. Of Oncology, Poland.

C.?IHF (免疫組織熒光)?使用小鼠抗Neuroligin 4單克隆抗體?(SMC-469)?對(duì)小鼠齒狀回的免疫組織熒光分析.?固定:?甲醛固定石蠟包埋.?一抗:?小鼠抗Neuroligin 4單克隆抗體, 1:100.?二抗: FITC?山羊抗小鼠?(綠色).?復(fù)染色: DAPI (藍(lán)色)?細(xì)胞核染色, 1:1000.?圖片來(lái)自:?Rachel Reith, NIH/NIMH.

D.?ICF (免疫細(xì)胞熒光)?使用小鼠抗HO-1單克隆抗體?(SMC-131)?對(duì)人HeLa Cells的免疫細(xì)胞熒光分析.?固定:?室溫下2%?甲醛處理20分鐘.?一抗:?小鼠抗HO-1單克隆抗體, 1:100, 4℃下孵育12小時(shí).?二抗: FITC?山羊抗小鼠?(綠色), 1:200,?室溫下孵育2小時(shí).?復(fù)染色: DAPI (藍(lán)色)?細(xì)胞核染色, 1:40000,?室溫下2小時(shí).?染色定位:?微粒體.?內(nèi)質(zhì)網(wǎng).?低氧時(shí)定位至細(xì)胞核.?放大倍數(shù): 100x.

做完這個(gè)小測(cè)試之后是不是對(duì)這幾個(gè)應(yīng)用的區(qū)別有了更直觀的了解了呢储藐？小編再來(lái)給大家總結(jié)一下：

A圖和B圖是免疫化學(xué)（Immunochemistry）俱济，這種應(yīng)用是用抗體檢測(cè)目標(biāo)蛋白然后利用化學(xué)反應(yīng)來(lái)產(chǎn)生顏色變化。根據(jù)樣本類型的不同钙勃，又分為免疫組織化學(xué)（A圖）和免疫細(xì)胞化學(xué)（B圖）蛛碌。

C圖和D圖很明顯的就是免疫熒光（Immunofluorescence），這種應(yīng)用是用抗體檢測(cè)目標(biāo)蛋白然后通過(guò)偶聯(lián)的熒光團(tuán)來(lái)顯色辖源。同樣根據(jù)樣本類型的不同蔚携，又可分為免疫組織熒光（C圖）和免疫細(xì)胞熒光（D圖）希太。