? ? ? ? 想想單鏈DNA（single strand DNA）有啥用？猛的一想志衍，可能大腦一片空白。而實際上聊替，在諸如PCR引物楼肪，外顯子測序中中捕獲探針，RNA/DNA FISH中的雜交探針惹悄，Northern/Southern blot中的雜交探針春叫，CRISPR/Cas9中的同源修復(fù)模板等等都需要ssDNA。當(dāng)然泣港，大部分情況下暂殖，直接進(jìn)行化學(xué)合成是獲取ssDNA最為快速高效的方式。但這種化學(xué)合成的策略同時面臨著序列越長成本越高当纱，重復(fù)序列越多越難合成的問題呛每。因此，開發(fā)新的ssDNA坡氯，尤其是針對長ssDNA的合成方法顯得尤為重要晨横。以下我們將分享一些神奇的單鏈DNA合成技術(shù)。
? ? ? ? 今天介紹第一種箫柳，基于不對稱PCR（asymmetric PCR）的單鏈DNA合成技術(shù)手形。
? ? ? ? 不對稱PCR是利用不等量的一對引物來產(chǎn)生大量單鏈DNA (ssDNA)的方法。常規(guī)PCR中我們使用的正向和反向引物是等量的悯恍，因此擴(kuò)增產(chǎn)生的兩條ssDNA是等量的库糠；如果只想獲得其中一條ssDNA，則可以通過調(diào)整正反向引物的量實現(xiàn)坪稽。經(jīng)過不對稱PCR獲得的是ssDNA和dsDNA的混合物曼玩，可以通過瓊脂糖凝膠電泳進(jìn)行分離純化鳞骤。
asymmetric PCR
