一.填空題(每題2分,共40分)
組蛋白: H3H4具有較高的保守性廊遍,H2A和H2B的保守性比較低踪旷。11nm核小體(每個(gè)核小體由八聚體(兩個(gè)H4H3,H2AH2B)和200bpDNA組成衙解,由H1和11bpDNA連接)阳柔,30nm纖絲(每圈6個(gè)核小體)。
人類(lèi)基因組大小為300Mb蚓峦,擬南芥為10Mb舌剂,酵母12MB,新冠30kb暑椰。人線(xiàn)粒體基因組長(zhǎng)度為17kb霍转。人類(lèi)基因組計(jì)劃中國(guó)占1%,水稻基因組計(jì)劃中國(guó)占比為20%一汽。
20世紀(jì)50年代以來(lái)避消,腫瘤醫(yī)學(xué)研究的三個(gè)進(jìn)展為:癌基因,染色體畸變召夹,抑癌基因岩喷。
DNA的物理圖譜是DNA分子的限制性?xún)?nèi)切酶片段的排列順序。
分子標(biāo)記包括:限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)性(RFLP)戳鹅,隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性(RAPD)均驶,擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性(AFLP),單核苷酸多態(tài)性(SNP)枫虏。
DNA修復(fù)包括:錯(cuò)配修復(fù)(母鏈甲基化妇穴,修正子鏈的錯(cuò)配),切除修復(fù)(堿基&核苷酸)隶债,重組修復(fù)(以同源母鏈上位模板腾它,修補(bǔ)母鏈空缺),直接修復(fù)死讹。
SOS修復(fù)系統(tǒng)瞒滴,RecA蛋白引起LexA阻遏蛋白的降解,解除對(duì)DNA損傷修復(fù)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄抑制赞警。
核苷酸之間的連接方式是3-5磷酸二酯鍵妓忍。套鎖狀結(jié)構(gòu)通過(guò)2-5磷酸二酯鍵。
A-DNA和B-DNA右螺旋愧旦,Z-DNA左螺旋世剖。
變性DNA,紫外吸收增加笤虫,比旋值下降旁瘫,黏度下降祖凫,浮力密度升高。苯丙氨酸酬凳,色氨酸惠况,酪氨酸帶有芳香側(cè)鏈策治,紫外吸收峰在280nm最大贯城。OD260/280在1.6~1.8之間為正常DNA,低于此范圍表明蛋白質(zhì)含量超標(biāo)悄雅,高于此范圍表明樣品中含有RNA台诗。
堿性磷酸酶防止線(xiàn)性質(zhì)粒自鏈接完箩。
先導(dǎo)鏈和后隨鏈的引物都是RNA赐俗。
甲基化的位點(diǎn)是CpG島上的C的5位拉队。起作用的酶為甲基轉(zhuǎn)移酶,甲基供位為SAM阻逮。甲基化是一種表觀遺傳修飾粱快。能抑制基因表達(dá),維持染色體結(jié)構(gòu)叔扼,X染色體失活事哭,基因印跡,腫瘤發(fā)生有關(guān)瓜富。CpG島是啟動(dòng)子及附近存在一些富含CG區(qū)域鳍咱,且絕大多數(shù)都被甲基化,位于結(jié)構(gòu)基因啟動(dòng)子的核心序列和轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)与柑,參與基因表達(dá)調(diào)控影響并染色質(zhì)結(jié)構(gòu)谤辜。
按照DNA的復(fù)性動(dòng)力學(xué)中和生物DNA序列,可分為三類(lèi):不重復(fù)序列价捧,中度重復(fù)序列(有種屬特異性丑念,分為L(zhǎng)INES和SINES),高度重復(fù)序列(衛(wèi)星DNA)结蟋。
質(zhì)粒的復(fù)制類(lèi)型有兩種:嚴(yán)謹(jǐn)型復(fù)制(受宿主蛋白合成的嚴(yán)格控制)和松弛型復(fù)制(不受宿主蛋白合成的嚴(yán)格控制)脯倚。
線(xiàn)粒體DNA的復(fù)制方式是D型單向復(fù)制。ΦX174環(huán)狀DNA的復(fù)制方式為滾環(huán)型單向復(fù)制嵌屎。大腸桿菌質(zhì)粒DNA的復(fù)制方式為θ型雙向復(fù)制推正。
轉(zhuǎn)座作用可能引起的突變類(lèi)型包括:重復(fù),缺失宝惰,倒位植榕。轉(zhuǎn)座途徑有兩種:復(fù)制轉(zhuǎn)座(先復(fù)制后拷貝)和非復(fù)制轉(zhuǎn)座(插入到新的位置)。轉(zhuǎn)座元件分為兩類(lèi):原核轉(zhuǎn)座子(插入序列掌测,類(lèi)轉(zhuǎn)座子内贮,復(fù)合轉(zhuǎn)座子产园,TnA轉(zhuǎn)座子家族)&真核轉(zhuǎn)座子(轉(zhuǎn)座子,反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子)
DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶是催化同一DNA分子不同超螺旋狀態(tài)之間轉(zhuǎn)變的酶夜郁。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅰ(松弛化)催化瞬時(shí)的單鏈的斷裂和連接什燕,不需要能量。拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ(負(fù)超螺旋化)能同時(shí)斷裂并連接雙股DNA鏈竞端,需要能量屎即。
真核生物核心啟動(dòng)子(TATA),包括基本啟動(dòng)子事富,起始位點(diǎn)技俐,應(yīng)答元件。 CAAT和GC組成上游啟動(dòng)元件统台。
啟動(dòng)子突變(細(xì)菌中-10區(qū))雕擂,分為上升突變和下降突變。原核生物啟動(dòng)子結(jié)構(gòu)是不對(duì)稱(chēng)的贱勃,決定了轉(zhuǎn)錄方向井赌。主要由4個(gè)區(qū)域組成:-35區(qū)(識(shí)別),-10區(qū)(結(jié)合)贵扰,轉(zhuǎn)錄起點(diǎn)仇穗,-10區(qū)和-35區(qū)間的距離。
轉(zhuǎn)錄輔助因子:TFⅡD(TATA盒)戚绕,CTF家族和核因子NF-1(CAAT框)纹坐,SP1(GC框),Oct1/2(八聚體)舞丛。
真核生物基因mRNA前體剪接機(jī)制耘子,遵循GU-AG法則。5種snRNA(U1瓷马,U2拴还,U4,U5欧聘,U6)和一些剪接因子(SF)片林,在RNA剪接位點(diǎn)上逐步裝配形成剪接體。 RNA的選擇性剪接可分為幾類(lèi):外顯子遺漏性剪接怀骤,5選擇性剪接费封,3選擇性剪接,相互排斥剪接蒋伦,內(nèi)含子保留剪接弓摘。剪接分為:組成型剪接(初級(jí)轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物經(jīng)過(guò)精確拼接只產(chǎn)生一種成熟mRNA),選擇性剪接(不同的簡(jiǎn)潔方式產(chǎn)生不同的mRNA)痕届。
剪接分為分子內(nèi)拼接和分子間拼接韧献。分子內(nèi)的拼接可分為:類(lèi)型1的自我拼接末患,類(lèi)型2的自我拼接,hnRNA拼接體的拼接锤窑,核內(nèi)tRNA前體的酶促拼接璧针。分子間的拼接有:反式拼接和選擇拼接。拼接有利于生物進(jìn)化渊啰,基因表達(dá)調(diào)控探橱,模塊裝配,有益重組绘证,有些內(nèi)含子可編碼隧膏。
DNA序列中的突變:無(wú)義突變(轉(zhuǎn)變?yōu)榻K止密碼子UAA赭石,UAG琥珀嚷那,UGA蛋白石)胞枕,中性突變(不影響蛋白功能),移碼突變(插入或刪除一個(gè)核苷酸的點(diǎn)突變)车酣,錯(cuò)義突變(轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N氨基酸)曲稼。
tRNA識(shí)別由反密碼子的第1位堿基決定。第1位為AC時(shí)識(shí)別一種密碼子湖员,為GU時(shí)可識(shí)別兩種密碼子,為I(配對(duì)AUC)時(shí)可識(shí)別三種密碼子瑞驱。副密碼子決定tRNA上所帶氨基酸種類(lèi)娘摔。其二級(jí)結(jié)構(gòu)包含:氨基酸臂(攜帶),反密碼子環(huán)(識(shí)別)唤反, TΨC臂凳寺,D環(huán)。tRNA包括:起始彤侍,延伸肠缨,同功,校正(無(wú)義&錯(cuò)義)盏阶。
蛋白合成抑制劑:抗菌素(氯霉素阻止mRNA與核糖體結(jié)合晒奕,四環(huán)素阻止AA-tRNA與核糖體結(jié)合),鏈霉素(干擾 原核起始tRNA與核糖體結(jié)合)名斟,嘌呤酶素(AA-tRNA的結(jié)構(gòu)類(lèi)似物)脑慧。卡那霉素青霉素四環(huán)素紅霉素只與原核作用砰盐。放線(xiàn)菌酮只與真核作用闷袒。氯霉素鏈霉素蓖麻霉素嘌呤霉素可以和兩種結(jié)合。
分泌蛋白質(zhì)大都以翻譯-轉(zhuǎn)運(yùn)同步機(jī)制進(jìn)行岩梳。
蛋白質(zhì)翻譯后的修飾包括:氨基酸側(cè)鏈的共價(jià)修飾(乙跄抑瑁化晃择,磷酸化,糖基化)也物,蛋白質(zhì)前體的切割和成熟藕各。
核糖體至少包括5個(gè)活性中心:氨酰-tRNA結(jié)合部位(A位),肽酰-tRNA結(jié)合部位焦除,mRNA結(jié)合部位激况,轉(zhuǎn)肽酶活性中心,肽基轉(zhuǎn)移部位(P位)膘魄。
蛋白質(zhì)的折疊機(jī)制:成核乌逐,結(jié)構(gòu)充實(shí),最后重排创葡。蛋白質(zhì)翻譯后的加工:非功能片段的切除(信號(hào)肽浙踢,Met),二硫鍵形成灿渴,蛋白質(zhì)的折疊洛波,特定氨基酸的修飾(磷酸化,甲基化骚露,糖基化蹬挤,羧基化,乙跫遥化)焰扳。
操縱子和啟動(dòng)子是反是隱性和順式顯性的,而編碼阻遏蛋白的基因既是反式顯性和順式顯性的误续。
原核基因表達(dá)機(jī)制有:負(fù)控誘導(dǎo)(阻遏蛋白不與效應(yīng)物結(jié)合吨悍,不轉(zhuǎn)錄),負(fù)控阻遏(阻遏蛋白與效應(yīng)物結(jié)合蹋嵌,不轉(zhuǎn)錄)育瓜,正控誘導(dǎo)(有效應(yīng)物,激活蛋白有活性栽烂,轉(zhuǎn)錄)躏仇,正控阻遏(有效應(yīng)物,激活蛋白無(wú)活性愕鼓,不轉(zhuǎn)錄)钙态。
聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)PCR,一種體外擴(kuò)增DNA的方法:高溫變性菇晃,低溫退火册倒,中溫延伸。
核酸的凝膠電泳遷移速率與電場(chǎng)強(qiáng)度和凈電荷數(shù)成正比磺送,由負(fù)極向正極移動(dòng)驻子。 SDS凝膠電泳中SDS蛋白質(zhì)復(fù)合體(陰離子)向正極移動(dòng)灿意。
重組DNA的主要步驟為:目的基因的獲得,載體構(gòu)建崇呵,體外連接形成重組體缤剧,導(dǎo)入寄主細(xì)胞,克隆的篩選鑒別域慷。
載體是攜帶外源DNA進(jìn)入宿主細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)增和表達(dá)的DNA荒辕,一般是通過(guò)改造質(zhì)粒(自我復(fù)制,穩(wěn)定性犹褒,抗性基因抵窒,多克隆位點(diǎn),啟動(dòng)子叠骑,前導(dǎo)序列李皇,加尾信號(hào)),噬菌體或病毒構(gòu)建的宙枷。
基因定點(diǎn)突變的方法有:重疊延伸技術(shù)掉房,大引物誘變法,酶切誘變慰丛,PCR卓囚,寡核苷酸誘變。
限制性核酸內(nèi)切酶的切割方式有:對(duì)稱(chēng)軸5側(cè)切割璧帝,對(duì)稱(chēng)軸3側(cè)切割捍岳,對(duì)稱(chēng)軸處切割。第1個(gè)被發(fā)現(xiàn)的限制性核酸內(nèi)切酶是HindⅡ睬隶。
常用的DNA測(cè)序法是:Sanger雙脫氧鏈終止法(ddNTP沒(méi)有3-OH,導(dǎo)致復(fù)制終止)页徐,化學(xué)修飾法苏潜,雜交測(cè)序法。
總RNA提缺溆隆:LiCl法恤左,CTAB法,TriZol法(異硫氰酸胍分離蛋白質(zhì)搀绣,氯仿抽提苯酚飞袋,酸性苯酚使RNA溶于無(wú)色水相)。
PCR熒光染料有:TaqMan(報(bào)告熒光基團(tuán)链患,淬滅熒光基團(tuán)巧鸭,完整時(shí)后者吸收熒光),SYBR(一種熒光麻捻,滲入DNA才發(fā)射熒光)
蛋白質(zhì)質(zhì)譜法:基質(zhì)輔助的激光解析電離-飛行時(shí)間質(zhì)譜纲仍,電噴霧質(zhì)譜呀袱。
檢測(cè)相對(duì)分子質(zhì)量的方法:凝膠電泳,雙向電泳郑叠,質(zhì)譜分析夜赵。
二.名詞解釋?zhuān)款}5分,共40分)
基因組:生物有機(jī)體單倍體細(xì)胞中的所有DNA乡革,包括染色體DNA寇僧,線(xiàn)粒體葉綠體等亞細(xì)胞器中的DNA。
復(fù)制子:?jiǎn)为?dú)復(fù)制一個(gè)DNA單元被稱(chēng)為一個(gè)復(fù)制子沸版,它是一個(gè)可移動(dòng)的單位嘁傀。
岡崎片段:在DNA半不連續(xù)復(fù)制中,后隨鏈產(chǎn)生長(zhǎng)度為1kb~2kb的短的DNA片段推穷,能被連接酶形成一條完整的DNA心包。
半保留復(fù)制:DNA復(fù)制中,每條鏈分別作為模板合成星鏈產(chǎn)生互補(bǔ)的兩鏈馒铃,這樣新形成的兩條DNA與原來(lái)DNA堿基序列完全一致蟹腾。
半不連續(xù)復(fù)制:DNA復(fù)制中,前導(dǎo)鏈(與復(fù)制叉運(yùn)動(dòng)方向相同)的復(fù)制是連續(xù)的区宇,而后隨鏈(與復(fù)制叉運(yùn)動(dòng)方向相反)的復(fù)制是中斷的不連續(xù)的娃殖。(引物酶作用先合成RNA引物,DNA聚合酶Ⅲ在引物3端合成一段1kb~2kb的岡崎片段议谷,由聚合酶Ⅰ切除引物炉爆,相鄰岡崎片段之間由連接酶封閉)
非組蛋白:染色體中除了組蛋白之外的結(jié)構(gòu)蛋白,與DNA或組蛋白結(jié)合卧晓。
重疊基因:具有部分共用核苷酸序列的基因芬首,即同一片段DNA攜帶了兩種或兩種以上不同蛋白質(zhì)的編碼信息,常見(jiàn)于病毒和噬菌體基因中逼裆。
斷裂基因:真核基因由于大量含有非蛋白編碼序列郁稍,將外顯子隔開(kāi),因而呈現(xiàn)一種斷裂結(jié)構(gòu)胜宇。
單核苷酸多態(tài)性SNP:不同個(gè)體的DNA序列上單個(gè)堿基的差異耀怜。
基因轉(zhuǎn)座:遺傳信息從一個(gè)基因轉(zhuǎn)移到另一個(gè)基因的現(xiàn)象。是可移位因子介導(dǎo)的遺傳物質(zhì)重排桐愉。參與轉(zhuǎn)座子( DNA上可自主復(fù)制和位移的基本單位)易位及DNA鏈整合的酶稱(chēng)為轉(zhuǎn)座酶财破。可引起插入突變與生物進(jìn)化从诲,產(chǎn)生新基因和染色體畸變左痢。
端粒:真核細(xì)胞線(xiàn)性染色體末端的一組串聯(lián)重復(fù)DNA序列,能防止染色體重組和末端降解酶的作用,維持染色體的穩(wěn)定抖锥。端粒隨細(xì)胞分裂次數(shù)的增加而逐漸縮短亿眠,其維持程度依賴(lài)于端粒酶(一種蛋白質(zhì)-RNA復(fù)合物,類(lèi)似逆轉(zhuǎn)錄酶)磅废。
啟動(dòng)子:與經(jīng)表達(dá)啟動(dòng)相關(guān)的順序作用元件纳像。以段位于轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)5端上游100~200bp以?xún)?nèi)的具有獨(dú)立功能的DNA序列≌悖可以活化RNA聚合酶竟趾,使之與模板DNA準(zhǔn)確結(jié)合并起始轉(zhuǎn)錄。
增強(qiáng)子:能提高轉(zhuǎn)錄器是效率的元件宫峦。增強(qiáng)效益明顯岔帽,與位置取向無(wú)關(guān),大多為重復(fù)序列导绷,具有組織或細(xì)胞特異性犀勒,沒(méi)有基因特異性,還受外部信號(hào)調(diào)控妥曲。
終止子:在一個(gè)基因末端往往有一段特定的序列贾费,它具有轉(zhuǎn)錄終止的功能。在轉(zhuǎn)錄終止點(diǎn)之前有一段長(zhǎng)約7~20bp的回文序列(旋轉(zhuǎn)對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu))檐盟。
順式作用元件:存在于基因旁側(cè)序列中能夠影響基因表達(dá)的序列褂萧。包括啟動(dòng)子,增強(qiáng)子葵萎,調(diào)控序列和可誘導(dǎo)元件等导犹。本身不編碼蛋白僅僅是一個(gè)作用位點(diǎn),與反式作用因子(能直接或間接地識(shí)別或結(jié)合各類(lèi)順式元件的核心序列上羡忘,參與調(diào)控靶基因轉(zhuǎn)錄效率的蛋白質(zhì))相互作用參與基因表達(dá)調(diào)控谎痢。
mRNA帽子:真核細(xì)胞中mRNA5端的特殊結(jié)構(gòu)。由甲基化G經(jīng)焦磷酸與mRNA的5端核苷酸相連卷雕。有三種類(lèi)型(末端核苷酸核糖甲基化數(shù)量):O型舶得,Ⅰ型,Ⅱ型爽蝴。帽子結(jié)構(gòu)有抗5核苷酸外切酶的降解作用,有助于核糖體對(duì)mRNA的識(shí)別和結(jié)合纫骑。
polyA尾巴:真核生物mRNA的3端通常有20~200個(gè)A殘基蝎亚。是聚合酶Ⅱ的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物hnRNA3端切斷,然后多聚腺苷酸化先馆。除組蛋白基因外发框,真核mRNA都有polyA尾巴。
RNA編輯:某些RNA特別是mRNA的一種加工方式煤墙。如插入梅惯,刪除或取代一些核苷酸殘基宪拥,導(dǎo)致DNA所編碼的遺傳信息發(fā)生改變。包括特異性位點(diǎn)脫氨基和U插入與刪除铣减。有校正作用她君,調(diào)控翻譯,擴(kuò)充遺傳信息的作用葫哗。RNA再編碼是指RNA編碼和讀碼方式的改變缔刹。
RNA加工:將一個(gè)RNA原初轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物,加工成成熟的RNA分子的過(guò)程劣针。包括前體剪接(內(nèi)含子產(chǎn)生套索RNA校镐,形成剪接體),5端加帽(使之穩(wěn)定捺典,增加翻譯效率鸟廓,對(duì)于剪接是必須的),3端加尾(有利于通過(guò)核孔襟己,增加穩(wěn)定性引谜,增強(qiáng)翻譯效率),RNA編輯(插入稀蟋,缺失煌张,替換),共價(jià)修飾(甲基化等)退客。使轉(zhuǎn)入后的初產(chǎn)物變成成熟的有功能的RNA骏融,甚至可以改變RNA遺傳信息,有利于生物進(jìn)化萌狂,是對(duì)中心法則的校正和補(bǔ)充档玻。
SD序列:存在于原核生物起始密碼子AUG上游7~12bp的一種4~7bp的保守片段。與16SrRNA3端反向互補(bǔ)茫藏,可以促進(jìn)起始翻譯作用误趴。
分子伴侶:一類(lèi)能夠識(shí)別并結(jié)合到不完全折疊或裝配的蛋白質(zhì)上,以幫助這些多肽正確折疊轉(zhuǎn)運(yùn)务傲,防止它們聚集的蛋白質(zhì)凉当,其本身不參與終產(chǎn)物形成。分為熱休克蛋白和伴侶素售葡。
信號(hào)肽:一種定位信息看杭,在起始密碼后有一段編碼疏水性氨基酸序列的RNA區(qū)域(常位于蛋白質(zhì)的氨基末端),與膜上的信號(hào)識(shí)別蛋白SRP相互作用挟伙,負(fù)責(zé)把蛋白質(zhì)引導(dǎo)到細(xì)胞內(nèi)不同膜結(jié)構(gòu)的亞細(xì)胞器內(nèi)楼雹。
操縱子:原核中由一個(gè)或多個(gè)相關(guān)基因以及轉(zhuǎn)錄翻譯調(diào)控元件組成的基因表達(dá)單元。
弱化子(attenuator):原核生物操縱子中能顯著減弱甚至終止轉(zhuǎn)錄作用的一段核苷酸序列,該區(qū)域能形成不同的二級(jí)結(jié)構(gòu)贮缅,利用轉(zhuǎn)錄翻譯的偶聯(lián)機(jī)制(核糖體沿mRNA移動(dòng)速度)對(duì)轉(zhuǎn)錄進(jìn)行調(diào)節(jié)榨咐。
前導(dǎo)肽(leader):色氨酸操縱子的前導(dǎo)序列中還有一個(gè)有效的核糖體結(jié)合位點(diǎn),并能形成由前導(dǎo)RNA所編碼的14個(gè)氨基酸的多肽谴供。
嚴(yán)緊反應(yīng):細(xì)菌處于貧瘠生態(tài)環(huán)境時(shí)块茁,關(guān)閉大部分代謝活性,產(chǎn)生嚴(yán)緊反應(yīng)因子pppGpp等(魔斑)憔鬼,影響一大批操縱子龟劲。
基因家族:真核生物基因組中有許多來(lái)源相同,結(jié)構(gòu)相似轴或,功能相關(guān)的基因昌跌,這樣的一組基因由一個(gè)祖先基因多次重復(fù)或變異所產(chǎn)生。
基因簇:同一基因家族中照雁,一些結(jié)構(gòu)功能更為相似基因蚕愤,彼此靠近成串的排列在一起。
癌基因:存在于正常的細(xì)胞基因組中饺蚊,與細(xì)胞癌基因有同源序列萍诱,具有促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖分化發(fā)育的生理功能。在正常細(xì)胞內(nèi)未激活時(shí)污呼,叫原癌基因裕坊,當(dāng)激活時(shí),能使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化燕酷。病毒癌基因是存在于病毒基因組中籍凝,能使靶細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化的基因。
假基因:一類(lèi)不能轉(zhuǎn)入或者轉(zhuǎn)入后生成無(wú)功能蛋白質(zhì)的基因苗缩。與功能基因序列相似饵蒂。可能是進(jìn)化過(guò)程中缺失倒位點(diǎn)突變?cè)斐傻摹?/p>
DNA文庫(kù):某種生物的基因組DNA切割成一定大小的片段酱讶,并與合適的載體重組后導(dǎo)入宿主細(xì)胞退盯,進(jìn)行克隆。這些存在于所有重組體內(nèi)的基因組DNA片段的集合泻肯。
α-互補(bǔ):lacZ編碼α-肽和C端肽鏈渊迁,同時(shí)表達(dá)才有活性(藍(lán)色)。
RACE:cDNA末端快速擴(kuò)增灶挟。從mRNA開(kāi)始宫纬。5端,cDNA3端加oligo dC尾巴→nestPCR膏萧。3端,mRNA配對(duì)oligo dT引物→nestPCR。
比較基因組學(xué):對(duì)不同物種的同源基因榛泛,在基因組水平上進(jìn)行比較分析蝌蹂,揭示其功能與進(jìn)化規(guī)律。
蛋白質(zhì)組學(xué):在蛋白質(zhì)組水平上研究蛋白質(zhì)的特征曹锨。包括蛋白質(zhì)的表達(dá)水平孤个,翻譯與修飾,蛋白質(zhì)間相互作用等沛简。
菌落原位雜交:將細(xì)菌從培養(yǎng)平板轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素濾膜上齐鲤,裂解細(xì)菌放出DNA。探針雜交烘干固定后的DNA椒楣,放置了自顯影檢測(cè)给郊。
GWAS:全金主我相關(guān)分析,檢測(cè)不同個(gè)體的相同遺傳變體與某一性狀之間的相關(guān)性捧灰。
RNA干擾:利用雙鏈小RNA高效特異性降解細(xì)胞內(nèi)同源mRNA淆九,阻斷把基因表達(dá)。當(dāng)dsRNA導(dǎo)入細(xì)胞后毛俏,Dicer核酸內(nèi)切酶識(shí)別切割成21~25bp的小片段siRNA炭庙,有效定位目標(biāo)mRNA,并替換dsRNA的編碼鏈煌寇。Dicer對(duì)同樣位置的mRNA進(jìn)行切割焕蹄,又產(chǎn)生了siRNA,繼續(xù)沉默mRNA阀溶。RNAi可以研究基因功能腻脏,信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo),尋找新的藥物靶標(biāo)淌哟,基因治療迹卢,基因敲除,表達(dá)調(diào)控徒仓。包括miRNA腐碱,siRNA,反義RNA掉弛。
反義RNA:與mRNA互補(bǔ)的RNA分子症见,與模板DNA序列相同。通過(guò)序列互補(bǔ)與特定mRNA結(jié)合抑制翻譯殃饿∧弊鳎可與pre-mRNA結(jié)合,與相應(yīng)的靶RNA結(jié)合乎芳,直接與起始密碼子結(jié)合遵蚜,與SD序列互補(bǔ)帖池。
miRNA:內(nèi)源性pri-miRNA(幾kb莖環(huán)結(jié)構(gòu))通過(guò)核酸酶(Droshe)和輔助因子(Pasha)形成pre-miRNA運(yùn)出核外(70 bp),再經(jīng)Dicer酶吭净,形成miRNA(22bp)睡汹。miRNA有種子區(qū),包括5顯性位點(diǎn)和3償位點(diǎn)寂殉∏舭停可以降解mRNA,抑制翻譯友扰。
siRNA:外源導(dǎo)入的雙鏈RNA彤叉,在胞質(zhì)Dicer將dsDNA切割成siRNA〈骞郑可以沉默mRNA秽浇,影響穩(wěn)定性,可在任意位點(diǎn)結(jié)合实愚,特異性較高兼呵。
基因編輯:包括TALEN,ZNF腊敲,CRISPR/Cas9击喂。用與已知DNA片段的組合及相關(guān)蛋白,與靶DNA結(jié)合碰辅,同源重組使之不表達(dá)懂昂。
熒光能量共振轉(zhuǎn)移FRET:距離很近的兩個(gè)熒光分子間產(chǎn)生一種能量轉(zhuǎn)移的現(xiàn)象。當(dāng)供體熒光分子發(fā)射的光譜與受體熒光分子的吸收光譜重疊没宾,并且兩分子距離在10nm以?xún)?nèi)凌彬,就會(huì)發(fā)生一種非放射性的能量轉(zhuǎn)移,使得供體的熒光強(qiáng)度比他單獨(dú)存在時(shí)要低得多(熒光淬滅)循衰,受體發(fā)射的熒光卻大大增強(qiáng)(敏化熒光)铲敛。
免疫共沉淀:在非變性條件下裂解細(xì)胞,許多蛋白質(zhì)間的相互作用被保留下來(lái)会钝。用蛋白質(zhì)X的抗體免疫沉淀X伐蒋,那么在體內(nèi)與X結(jié)合的蛋白質(zhì)Y也能被沉淀下來(lái)∏ㄋ幔可以用來(lái)確定兩種目標(biāo)蛋白在自然狀態(tài)下是否在體內(nèi)結(jié)合先鱼。但有可能檢測(cè)不到低親合力和瞬間作用的蛋白,也檢測(cè)不到間接作用的蛋白(需第三者橋梁作用)奸鬓,有一定的冒險(xiǎn)性焙畔。
噬菌體展示技術(shù):編碼誘餌蛋白的DNA片段,插入噬菌體基因組的外殼蛋白編碼基因內(nèi)串远,利用重組噬菌體侵染宿主細(xì)胞宏多,復(fù)制形成帶有大量雜合外殼蛋白的噬菌體顆粒儿惫,捕獲cDNA表達(dá)文庫(kù)中與誘餌蛋白相互作用的蛋白質(zhì)。
三.簡(jiǎn)答題(每題6分绷落,共30分)
1.組蛋白種類(lèi)姥闪,修飾和意義。
組蛋白是真核生物染色體的結(jié)構(gòu)蛋白砌烁,它與DNA組成核小體。分為H1(富含賴(lài)氨酸)催式,H2A函喉,H2B,H3H4(富含精氨酸)荣月。修飾作用包括甲基化(基因激活沉默)管呵,乙酰化(增強(qiáng)表達(dá))哺窄,磷酸化(基因轉(zhuǎn)錄修復(fù)捐下,細(xì)胞凋亡,染色體濃縮)萌业,糖基化坷襟,泛素化(X染色體失活)。
2.DNA Pol的作用特點(diǎn)生年。
(1)原核DNA Pol
Ⅰ(切除引物)Ⅱ(修復(fù)校正DNA)Ⅲ(合成先導(dǎo)鏈及岡崎片段)
(2)真核DNA Pol
α(引物合成)β(修復(fù)DNA)δ(DNA復(fù)制)γ(線(xiàn)粒體復(fù)制)ε(后隨鏈合成)
3.原核生物和真核生物DNA復(fù)制的比較婴程。
(1)相同
半保留復(fù)制。多種酶和蛋白質(zhì)協(xié)同參與(DNA Pol抱婉,解鏈酶拓?fù)洚悩?gòu)酶單鏈結(jié)合蛋白档叔,引發(fā)酶,連接酶)蒸绩。雙向等速?gòu)?fù)制衙四。半不連續(xù)復(fù)制。
(2)不同
真核:多個(gè)復(fù)制起點(diǎn)患亿。兩次復(fù)制不同時(shí)進(jìn)行传蹈。只能在分裂期復(fù)制。復(fù)制起點(diǎn)為自主復(fù)制序列(ARS)窍育。復(fù)制叉移動(dòng)慢卡睦。聚合酶有15種以上。
原核:只有一個(gè)復(fù)制起點(diǎn)漱抓”矶停可連續(xù)開(kāi)始新的復(fù)制。整個(gè)細(xì)胞周期都能復(fù)制乞娄。復(fù)制起點(diǎn)OriC瞬逊。復(fù)制叉移動(dòng)快显歧。聚合酶目前發(fā)現(xiàn)5種。
4.原核真核基因組結(jié)構(gòu)特點(diǎn)确镊。
(1)真核
基因組龐大士骤,大量重復(fù)序列,非編碼序列(冗余)蕾域,單順?lè)醋涌郊。瑪嗔鸦颍▋?nèi)含子),順勢(shì)作用原件旨巷,大量DNA多態(tài)性巨缘,斷裂結(jié)構(gòu)。
(2)原核
結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)練采呐,多順?lè)醋尤羲丿B基因。
5.RNA Pol的作用特點(diǎn)斧吐。
無(wú)需引物又固,也無(wú)校對(duì)功能。
(1)原核RNA Pol
全酶(六聚體+2Zn)=核心酶(2αββ'ω煤率,負(fù)責(zé)轉(zhuǎn)錄延伸)+σ(幫助聚合酶專(zhuān)一性識(shí)別結(jié)合模板鏈上的啟動(dòng)子仰冠,起始基因轉(zhuǎn)錄)
(2)真核RNA Pol
Ⅰ(rRNA),Ⅱ(hnRNA涕侈,SnRNA)沪停,Ⅲ(tRNA,5SrRNA裳涛,scRNA木张,識(shí)別基因內(nèi)啟動(dòng)子)
6.tRNA前體加工過(guò)程。
核酸內(nèi)切酶切斷兩端端三。核酸外切酶5端切除舷礼。核苷酸轉(zhuǎn)移酶催化3端加CCA-OH。核酸內(nèi)切酶剪掉內(nèi)含子郊闯,連接酶連接外顯子妻献,部分堿基共價(jià)修飾。
7.真核反式作用因子(轉(zhuǎn)錄因子)的特點(diǎn)团赁。
可分為基本轉(zhuǎn)錄因子和特異性轉(zhuǎn)錄因子育拨。三種聚合酶分別有相應(yīng)的轉(zhuǎn)錄因子。
(1)DNA結(jié)合域欢摄。鋅指結(jié)構(gòu)域熬丧,堿性α螺旋,堿性亮氨酸拉鏈怀挠,堿性螺旋-環(huán)-螺旋析蝴,同源域害捕。
(2)轉(zhuǎn)錄激活域。酸性激活域闷畸,谷氨酰胺富含區(qū)尝盼,脯氨酸富含區(qū)。
(3)介導(dǎo)二聚化的結(jié)構(gòu)域佑菩。與亮氨酸拉鏈盾沫,螺旋-環(huán)-螺旋結(jié)構(gòu)有關(guān)。
8.真核原核基因表達(dá)mRNA的差異殿漠。
(1)真核:有5端帽子疮跑,有3端尾巴,單順?lè)醋油苟妫胨テ陂L(zhǎng)。轉(zhuǎn)錄翻譯不偶聯(lián)失尖。以AUG為起始密碼啊奄。聚合酶有三種以上(都需要轉(zhuǎn)錄起始因子參與)。需要加工(存在大量?jī)?nèi)含子)掀潮。
(2)原核:沒(méi)有5端帽子菇夸,沒(méi)有3端尾巴,多順?lè)醋右前桑胨テ诙套隆^D(zhuǎn)錄翻譯偶聯(lián)(胞質(zhì))。以AUG薯鼠,GUG等作為起始密碼择诈。聚合酶有一種。不需要加工(大多為編碼序列)出皇。
9.RNA轉(zhuǎn)錄的基本過(guò)程羞芍。
模板識(shí)別。σ因子識(shí)別轉(zhuǎn)錄起始點(diǎn)(-35區(qū))郊艘,促使核心酶結(jié)合(-10區(qū))成全酶復(fù)合物荷科。形成封閉復(fù)合物(DNA仍為雙鏈)。形成轉(zhuǎn)錄前起始復(fù)合物(PIC纱注,TFⅡD畏浆,ABEFH)。
轉(zhuǎn)錄起始狞贱。全酶促使局部雙鏈解開(kāi)刻获,催化ATP或GTP與另一個(gè)三磷酸核苷酸聚合形成第一個(gè)二指鍵。形成開(kāi)放復(fù)合物(一小段雙鏈被解開(kāi)斥滤,形成轉(zhuǎn)錄泡)将鸵。
轉(zhuǎn)錄延伸勉盅。σ因子從全酶上脫離,核心酶繼續(xù)沿DNA移動(dòng)顶掉。
轉(zhuǎn)錄終止草娜。依賴(lài)ρ因子參與的終止:ρ因子催化NTP水解,促進(jìn)RNA鏈從三元復(fù)合物(包括聚合酶痒筒,DNA和新生RNA)中解離出來(lái)終止轉(zhuǎn)錄宰闰。不依賴(lài)ρ因子參與的終止:DNA上存在終止轉(zhuǎn)錄信號(hào)終止子,終止位點(diǎn)上游一般都存在一個(gè)富含GC的二重對(duì)稱(chēng)區(qū)簿透,其RNA易形成發(fā)卡式結(jié)構(gòu)移袍,而導(dǎo)致聚合酶暫停。終止位點(diǎn)前有一段由4~8個(gè)A組成的序列老充,其RNA3端為寡聚U葡盗,而使之出現(xiàn)不穩(wěn)定的rU-dA區(qū)域。
10.RNA的種類(lèi)和功能啡浊。
核不均一RNA(hn)是成熟mRNA的前體觅够。小核RNA(sn)參與hnRNA的剪接。小胞漿RNA(sc)內(nèi)置網(wǎng)定位識(shí)別體的組成巷嚣。反義RNA(micro)調(diào)節(jié)基因表達(dá)喘先。circRNA存在IRES序列啟動(dòng)翻譯。長(zhǎng)鏈非編碼RNA(lnc)參與過(guò)程調(diào)控廷粒。
11.遺傳密碼的特點(diǎn)窘拯。
無(wú)逗號(hào)(連續(xù)閱讀)。三聯(lián)密碼子坝茎。通用性與特殊性涤姊。密碼子與反密碼子的相互作用(反向配對(duì))。簡(jiǎn)并性(除AUGMet和UGGTry以外)景东。方向性砂轻。擺動(dòng)現(xiàn)象。
12.翻譯的基本過(guò)程斤吐。
(1)氨基酸的活化(胞質(zhì))與搬運(yùn)搔涝。
AA-tRNA合成酶催化活化,起始因子IF2-GTP(延伸因子EFTu-GTP)與活化氨基酸結(jié)合,密碼子配對(duì),tRNA進(jìn)入P位(A位)
(2)活化氨基酸的縮合谜慌。(ATP供能脑题,核蛋白體循環(huán))
①起始。
原核。30S+IF1/3(起始因子)鸟悴,通過(guò)SD序列結(jié)合模板mRNA幅虑。IF2和GTP使fMet-tRNA進(jìn)入P位文兑,密碼子配對(duì)盒刚。復(fù)合物與50S結(jié)合, GDP水解并釋放IF绿贞。
②延伸因块。(后續(xù)AA-tRNA與核糖體結(jié)合,肽鍵的生成籍铁,移位)
原核涡上。需要三個(gè)延伸因子(均具有GTP酶活性)。EF-Tu與起始tRNA以外的tRNA及GTP作用拒名,生成AA-tRNA·EF-Tu·GTP復(fù)合物(A位)吩愧。EF-Ts參與GDP再生。EF-G是移位所需的蛋白質(zhì)因子增显,在GTP下使tRNA從A位移動(dòng)到P位雁佳。
真核, EF1(EF-Tu同云,EF-Ts甘穿,促進(jìn)AA-tRNA進(jìn)入A位),EF2(EF-G梢杭,促進(jìn)移位和卸載tRNA)
③終止。終止密碼子出現(xiàn)在A位時(shí)秸滴,沒(méi)有相應(yīng)的tRNA結(jié)合武契。釋放因子(RF,具有GTP酶活性荡含,原核中有三種RF1用于UAA和UAG咒唆,RF2用于UAA和UGA,RF3释液,真核中只有一種)識(shí)別這些密碼子并與之結(jié)合全释,水解P位多肽鏈與tRNA之間的二酯鍵。
抗終止蛋白和nut位點(diǎn)(終止子上游)結(jié)合误债,修飾聚合酶浸船,拮抗ρ因子。
13.原核和真核蛋白翻譯過(guò)程的比較寝蹈。
起始密碼子和tRNA不同(是否甲趵蠲化)。起始機(jī)制不同(原核SD序列箫老,真核5端帽子掃描到RBS)封字。起始復(fù)合物形成(原核30S+mRNA再+tRNA,真核40S+tRNA再+mRNA)。起始阔籽,延伸流妻,釋放因子。起始是否消耗ATP(原核不消耗笆制,真核消耗)绅这。
14.Northern,Southern项贺,Western的區(qū)別君躺。
Northern,RNA印跡雜交开缎,甲醛變性棕叫。
Southern,DNA印跡雜交奕删。內(nèi)切DNA俺泣,電泳分離,堿變性為單鏈后轉(zhuǎn)移到纖維素膜上完残,標(biāo)記探針雜交(預(yù)雜交→加入探針→雜交→洗膜)伏钠,放射自顯影,找到目標(biāo)DNA片段谨设。
Western熟掂,蛋白質(zhì)檢測(cè)技術(shù)。用于目的基因表達(dá)產(chǎn)物的鑒別和定量扎拣,也可檢測(cè)細(xì)胞中某個(gè)蛋白的表達(dá)水平赴肚。
15.酵母雜交體系的應(yīng)用。
(1)雙:真核生物轉(zhuǎn)錄因子大都有兩個(gè)結(jié)構(gòu)上分開(kāi)功能上獨(dú)立的結(jié)構(gòu)組成二蓝。GAL4的N端是DNA結(jié)合域(BD誉券,鋅指結(jié)構(gòu)),C端是轉(zhuǎn)錄激活域(AD)刊愚。BD能與效應(yīng)基因啟動(dòng)子上有特定DNA區(qū)段結(jié)合踊跟,AD則推動(dòng)了轉(zhuǎn)錄的起始。利用基因工程的方法鸥诽,將AD和BD分別克隆到不同的載體上商玫,導(dǎo)入同一細(xì)胞中表達(dá),可以把來(lái)自不同質(zhì)粒的AD和BD連成一個(gè)功能轉(zhuǎn)錄因子牡借,而報(bào)告基因表達(dá)决帖。可以用于蛋白之間性功能的發(fā)現(xiàn)蓖捶,抗原抗體的相互作用地回,藥物的作用位點(diǎn),構(gòu)建基因組蛋白連鎖圖。在活細(xì)胞內(nèi)省去蛋白純化步驟刻像,但分析蛋白相互作用定位于核內(nèi)(未經(jīng)修飾)畅买,容易出現(xiàn)假陽(yáng)性。
(2)單:將已知順式作用元件(DNA)構(gòu)建到基本啟動(dòng)子的上游细睡,把報(bào)告基因連接到其下游谷羞。將編碼待測(cè)轉(zhuǎn)錄因子(蛋白質(zhì))的cDNA與已知酵母AD融合表達(dá)載體導(dǎo)入酵母細(xì)胞,該經(jīng)產(chǎn)物溜徙,如果能夠與順式作用元件結(jié)合就能激活基本啟動(dòng)子湃缎,使報(bào)告基因表達(dá)。主要用于確定已知DNA-蛋白質(zhì)之間是否存在相互作用蠢壹。
16.DNA與蛋白質(zhì)作用方法嗓违。
(1)凝膠滯緩實(shí)驗(yàn)。電泳時(shí)图贸,與蛋白質(zhì)結(jié)合的探針蹂季,比沒(méi)有蛋白質(zhì)結(jié)合的探針,在凝膠中的涌動(dòng)速度慢疏日。
(2)DNA足跡實(shí)驗(yàn)偿洁。結(jié)合蛋白質(zhì)的DNA不被酶水解破壞。
(3)染色質(zhì)免疫共沉淀ChIP沟优。在活細(xì)胞狀態(tài)下固定蛋白質(zhì)-DNA復(fù)合物涕滋,并將其隨機(jī)切斷為一定長(zhǎng)度的染色質(zhì)小片段,然后通過(guò)免疫學(xué)方法沉淀此復(fù)合體挠阁,特異性的富集目的蛋白結(jié)合的DNA片段何吝,通過(guò)對(duì)目的基因片段的轉(zhuǎn)化與檢測(cè)獲得真實(shí)完整的反應(yīng),蛋白質(zhì)與DNA相互作用的信息鹃唯。
(4)CUT&Tag。在抗體引導(dǎo)下瓣喊,ChiTag酶只在目的蛋白結(jié)合處的DNA局部片段化坡慌,同時(shí)添加測(cè)序接頭,釋放到細(xì)胞外藻三。步驟簡(jiǎn)單洪橘,不需要繁瑣補(bǔ)平加接頭,耗時(shí)短棵帽,有更好的信噪比熄求,所用細(xì)胞少。
17.乳糖操縱子(負(fù)控誘導(dǎo))逗概。
包括一個(gè)調(diào)節(jié)基因(I)弟晚,一個(gè)啟動(dòng)基因(P),一個(gè)操縱序列(O),三個(gè)結(jié)構(gòu)基因(Z酶卿城,Y透過(guò)酶枚钓,A乙酰轉(zhuǎn)移酶)。
負(fù)調(diào)控:I編碼阻遏蛋白瑟押,占據(jù)O后搀捷,聚合酶不能結(jié)合到P。乳糖可與阻遏蛋白結(jié)合引起失活多望,引起轉(zhuǎn)錄嫩舟。
正調(diào)控(降解物阻抑):葡萄糖存在時(shí),cAMP含量降低怀偷,正控蛋白CAP不能活化(cAMP-CAP減少家厌,結(jié)合聚合酶),結(jié)構(gòu)基因轉(zhuǎn)錄下降枢纠。
18.色氨酸操縱子(負(fù)控阻遏)像街。
阻遏機(jī)制:無(wú)色氨酸時(shí),輔佐蛋白不能結(jié)合O晋渺,操縱子開(kāi)放轉(zhuǎn)錄镰绎。存在色氨酸時(shí),輔阻遏蛋白與色氨酸結(jié)合后木西,可結(jié)合O畴栖,阻遏基因轉(zhuǎn)錄。
弱化機(jī)制:色氨酸操縱子第1個(gè)結(jié)構(gòu)基因與啟動(dòng)基因之間存在弱化區(qū)域八千,該區(qū)域有4個(gè)調(diào)節(jié)區(qū)吗讶,3-4配對(duì)形成莖環(huán)終止結(jié)構(gòu)前導(dǎo)肽與1區(qū)部分重疊,含有兩個(gè)連續(xù)的Trp密碼子恋捆。色氨酸濃度高時(shí)照皆,核糖體移動(dòng)快,2-3不配對(duì)沸停,3-4配對(duì)終止結(jié)構(gòu)膜毁,轉(zhuǎn)錄終止。4氨酸濃度低時(shí)核糖體移動(dòng)慢愤钾,2-3配對(duì)瘟滨,3-4不配對(duì),轉(zhuǎn)錄進(jìn)行能颁。
19.原核轉(zhuǎn)錄后調(diào)控(經(jīng)濟(jì)杂瘸,微調(diào))。
(1)mRNA自身元件伙菊。SD與AUG之間的距離败玉。
(2)mRNA穩(wěn)定性敌土。3-5外切酶降解。RNA二級(jí)結(jié)構(gòu)和反向重復(fù)序列IR可防止降解绒怨。
(3)蛋白質(zhì)調(diào)控纯赎。mRNA編碼的蛋白質(zhì)本身對(duì)mRNA翻譯產(chǎn)生調(diào)節(jié)。
(4)反義RNA南蹂。與模板DNA序列相同犬金。
(5)稀有密碼子。稀有密碼的tRNA六剥。
(6)重疊基因晚顷。偶聯(lián)翻譯可保證兩個(gè)基因產(chǎn)物數(shù)量上相等。
(7)翻譯阻遏疗疟。復(fù)制酶可阻遏翻譯该默。
(8)魔斑核苷酸。缺乏氨基酸時(shí)產(chǎn)生魔斑核苷酸策彤,進(jìn)行應(yīng)急反應(yīng)栓袖。
20.真核基因表達(dá)調(diào)控水平。
(1)轉(zhuǎn)錄前水平店诗。染色質(zhì)丟失裹刮,基因擴(kuò)增,基因重排庞瘸,異染色質(zhì)化(在間期捧弃,高度卷曲緊縮為塊狀結(jié)構(gòu),不具有轉(zhuǎn)錄活性擦囊,緊密結(jié)合高度螺旋纏繞折疊违霞,功能處于靜止?fàn)顟B(tài))。
(2)轉(zhuǎn)錄水平瞬场。①染色質(zhì)的活化(具有轉(zhuǎn)錄活性买鸽,松散聚集,功能活躍)贯被。②啟動(dòng)子增強(qiáng)子順式元件眼五。③反式作用因子活性調(diào)節(jié)(表達(dá)調(diào)節(jié),共價(jià)修飾調(diào)節(jié)刃榨,配體激活,蛋白作用)
(3)轉(zhuǎn)錄后水平双仍。剪接枢希,戴帽,加尾朱沃。
(4)翻譯水平苞轿∶┯眨控制mRNA穩(wěn)定性。
(5)翻譯后水平(最終決定蛋白壽命)搬卒。去除起始Met和信號(hào)序列瑟俭,形成二硫鍵,氨基酸修飾契邀。
21.原核真核表達(dá)調(diào)控的異同摆寄。
(1)原核
①σ因子決定聚合酶識(shí)別特異性。②操縱子模型具有普遍性坯门。③阻遏蛋白與阻遏機(jī)制(負(fù)調(diào)控)的普遍性微饥。
(2)真核
①聚合酶分別負(fù)責(zé)三種RNA轉(zhuǎn)錄。
②活性染色質(zhì)結(jié)構(gòu)變化(核酸酶敏感古戴,DNA拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)變化欠橘,堿基修飾變化,組蛋白變化)现恼。
③正性調(diào)節(jié)占主導(dǎo)肃续。④轉(zhuǎn)錄與翻譯分隔進(jìn)行。⑤轉(zhuǎn)錄后修飾加工叉袍。
四.問(wèn)答題(三題始锚,共40分)
原核70=50(5,23)+30(16)
真核80=60(5畦韭,28疼蛾,5.8)+40(18)