一、非洲豬瘟抗原檢測流程
1.樣品的制備：實驗室老師提前準備了陽性質(zhì)控杨幼，取30ul陽性質(zhì)控加入270ul的生理鹽水中灯蝴，做10倍稀釋恢口，稀釋4次。
2.制好的樣品放入傳遞窗中穷躁。
3.配反應體系：
1份反應體系由10ulPCR擴增反應液+5ul實時熒光混合液+5ul模板組成
按16份配制耕肩，取160ulPCR反應液+80ul實時熒光混合液，渦旋混勻问潭，按15ul/管分別裝于PCR反應管中猿诸，蓋上蓋子轉移至傳遞窗待用。
4.核酸提冉泼Α：
（1）取出深孔板梳虽，顛倒混勻使磁珠重懸，輕甩板孔使試劑盒磁珠集中到孔板底部灾茁，使用前按住深孔板小心撕去封口膜窜觉。
（2）在第2列的8個孔中，加入100ul樣品北专，100ul生理鹽水禀挫，20ul蛋白酶K。
（3）將磁棒套插入32道自動核酸提儀磁棒套架卡槽內(nèi)
（4）選擇程序并運行拓颓，自動化程序結束后语婴，將第6列的核酸樣品取出，待用。
（5）在配制好的反應體系配制液里分別加入陰性對照5ul砰左，樣品各5ul匿醒，陽性對照5ul，蓋好蓋子缠导，瞬時離心廉羔，轉至傳遞窗待擴增。
（6）使用PCR儀器擴增出結果酬核。
二蜜另、微生物實驗
1、培養(yǎng)基制備
將培養(yǎng)基（50ml）嫡意，均勻倒入3塊一次性培養(yǎng)皿举瑰，做好標記。
2蔬螟、平板劃線（3區(qū)）
用燒灼后的接種環(huán)挑取營養(yǎng)瓊脂上的單菌落此迅，接種到營養(yǎng)瓊脂、麥康凱平板旧巾，做好標記耸序，37℃孵育18-24小時。
3鲁猩、藥敏實驗
（1）菌懸液的配置
在生物安全柜操作坎怪，準備一只無菌西林瓶，加入1ml左右生理鹽水廓握，用接種環(huán)無菌挑取營養(yǎng)瓊脂上的典型單菌落在瓶壁上研磨充分搅窿，使菌落與生理鹽水充分混合
將制備的菌懸液用標準比濁管校正至0.5麥氏單位
（2）接種平板
用無菌棉拭子蘸取菌液，在管壁內(nèi)旋轉擠壓隙券，去除多余水分男应，用拭子均勻涂抹培養(yǎng)基表面，可多個角度涂抹使其涂抹均勻娱仔，最后在瓊脂平板邊緣涂抹一圈沐飘。
（3）貼藥敏片與培養(yǎng)
用記號筆在培養(yǎng)皿背面做7個區(qū)分布，做好記號1-7
用無菌鑷子夾取藥敏片平放在瓊脂并輕壓使其緊貼于瓊脂平板牲迫，每次夾取藥敏片之前都需要灼燒一次鑷子
將培養(yǎng)基放于溫箱耐朴，37℃培養(yǎng)18-24小時，觀察結果盹憎。
