? ? ? ? 目的建立Pristane誘導(dǎo)的小鼠系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)模型；觀察該模型各器官組織的炎癥病理變化特點(diǎn)当纱；觀察該模型各部位免疫細(xì)胞的組成變化呛每；檢測(cè)
該模型淋巴細(xì)胞共刺激分子的表達(dá)及脾臟T細(xì)胞的活化程度；觀察絲裂原(LPS和ConA)刺激對(duì)脾淋巴細(xì)胞免疫功能的影響坡氯。方法(一)狼瘡模型的建立晨横、生
物學(xué)鑒定及其器官組織免疫和病理學(xué)檢查：0.5mlPristane單次腹腔注射雌性BALB/c小鼠構(gòu)建小鼠狼瘡模型(對(duì)照組注射等量的生理鹽水
NS)；注射前及注射后每月ELISA法檢測(cè)血清抗dsDNA抗體和抗Sm/RNP抗體含量箫柳，Albustix試紙法檢測(cè)尿蛋白含量手形；6個(gè)月后處死全部小
鼠，解剖悯恍、肉眼觀察其胸库糠、腹腔臟器組織病變情況，并取肝涮毫、脾瞬欧、肺、腎罢防、小腸及其他病變組織做HE染色觀察其組織炎癥病理變化艘虎；直接熒光染色法觀察腎臟免疫
復(fù)合物(IC)沉積及肝、肺和小腸組織T咒吐、B細(xì)胞浸潤(rùn)程度野建；半定量RT-PCR檢測(cè)肝、肺和小腸組織炎癥性細(xì)胞因子IL-6mRNA和Ⅰ型干擾素刺激基因
(ISGs)Mx1mRNA的表達(dá)水平恬叹。(二)模型組小鼠免疫細(xì)胞組成和功能變化的研究：流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)造模3個(gè)月時(shí)模型組小鼠脾臟T細(xì)胞的活化程度候生，造
模3個(gè)月和6個(gè)月時(shí)脾臟T細(xì)胞表面共刺激分子CD28、CD154妄呕、CD137和B細(xì)胞表面共刺激分子CD40陶舞、CD137L的表達(dá)，以及造模6個(gè)月時(shí)外
周血绪励、脾臟和腹腔灌洗液中各免疫細(xì)胞的組成變化肿孵；RT-PCR檢測(cè)造模6個(gè)月時(shí)脾臟CD137mRNA和CD137LmRNA的表達(dá)水平；流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)
造模6個(gè)月時(shí)模型組小鼠外周血和腹腔灌洗液中淋巴細(xì)胞表面共刺激分子的表達(dá)疏魏；MTT法和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)模型組小鼠脾淋巴細(xì)胞在絲裂原刺激下的增殖停做、活化、
共刺激分子表達(dá)和凋亡大莫。結(jié)果(一)模型組小鼠出現(xiàn)多種SLE樣臨床癥狀和體征蛉腌，并發(fā)生肝、肺等器官組織炎癥反應(yīng)：模型組小鼠造模3個(gè)月～6個(gè)月時(shí)血清抗
Sm/RNP抗體和4個(gè)月～6個(gè)月時(shí)血清抗dsDNA抗體較對(duì)照組明顯增高(P<0.01)只厘；造模6個(gè)月時(shí)其蛋白尿(≥+)陽(yáng)性率和關(guān)節(jié)病變陽(yáng)性率
均顯著高于對(duì)照組(P<0.01)烙丛；器官組織檢查發(fā)現(xiàn)，造模6個(gè)月時(shí)>50%的模型組小鼠出現(xiàn)不同程度的腎小球腎炎病變伴毛細(xì)血管壁大量IC
沉積羔味，且大多數(shù)模型組小鼠出現(xiàn)脾腫大河咽，肝、肺和小腸組織T赋元、B細(xì)胞浸潤(rùn)忘蟹，IL-6mRNA和Mx1mRNA表達(dá)上調(diào)及腹腔產(chǎn)生大量脂肪肉芽腫結(jié)節(jié)等器官組
織炎癥反應(yīng)，而對(duì)照組未見這些病變搁凸。(二)模型組小鼠免疫細(xì)胞組成和功能明顯異常：與對(duì)照組相比媚值，造模3個(gè)月時(shí)模型組小鼠脾臟T細(xì)胞明顯活化
(P<0.05)；造模6個(gè)月時(shí)模型組小鼠脾臟中T护糖、B細(xì)胞明顯減少(P<0.05)褥芒，漿細(xì)胞明顯增多(P<0.05)，外周血樹突狀
細(xì)胞和漿細(xì)胞明顯增多(p<0.05)嫡良，腹腔灌洗液中T細(xì)胞锰扶、漿細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞明顯增多(P<0.05)被冒，B細(xì)胞明顯減少
(P<0.05)挟炬，且各部位成熟樹突狀細(xì)胞均明顯增多(P<0.05)碱妆；造模6個(gè)月時(shí)模型組小鼠脾臟T細(xì)胞上CD28表達(dá)明顯減少
(P<0.05)拓轻，CD137表達(dá)明顯增多(P<0.01)洛心，B細(xì)胞上CD40表達(dá)明顯減少(P<0.01)俊柔，CD137L表達(dá)明顯增
多(P<0.05)埠况，且其脾臟CD137mRNA和CD137LmRNA表達(dá)上調(diào)炕泳；造模6個(gè)月時(shí)模型組小鼠外周血淋巴細(xì)胞上述幾種共刺激分子的表達(dá)
與脾臟基本一致痴怨，而腹腔灌洗液中T細(xì)胞表達(dá)CD28不是減少而是明顯增多(P<0.05)忙干；模型組小鼠脾淋巴細(xì)胞在絲裂原刺激下的增殖、活化和凋亡
均較對(duì)照組明顯增強(qiáng)(P<0.05)浪藻，且絲裂原刺激不能糾正模型組小鼠脾淋巴細(xì)胞表面所有共刺激分子的表達(dá)異常捐迫。結(jié)論P(yáng)ristane能成功誘發(fā)
BALB/c小鼠SLE；Pristane能誘導(dǎo)狼瘡鼠出現(xiàn)明顯的器官組織炎癥性病變爱葵；Pristane誘導(dǎo)的狼瘡鼠免疫細(xì)胞組成及淋巴細(xì)胞增殖施戴、活化反浓、
表面共刺激分子表達(dá)及凋亡明顯異常。
