關(guān)于細胞培養(yǎng)基你需要知道的那些事

大多數(shù)實驗室購買的培養(yǎng)基是預(yù)先處理好的瓶裝液體培養(yǎng)基拍埠,或者是干粉狀的需要水化和過濾除菌的培養(yǎng)基,后者比較便宜嬉探,用量大時更有價值擦耀。

由于培養(yǎng)基中都有酚紅或其他染料pH 指示劑眷蜓,雖然外觀看上去都差不多胎围,但事實上它們并不一樣,所以千萬不能用錯汽纤。

添加有酚紅pH指示劑的培養(yǎng)基的顏色

pH6.5 以下為擰檬黃

pH6.5 為黃色

pH7.0 為橙色

pH7.4 為紅色

pH7.6 為粉紅

pH7.8 為紫色

大多數(shù)細胞的最適pH 為7.4 左右福荸。

微黃色的培養(yǎng)基為酸性,說明:

(1)細胞過量生長敬锐;? (2)細菌污染;?? (3)培養(yǎng)箱中僅為濃度過高

紫色的培養(yǎng)基為堿性续室,說明:

(1)細胞生長極為緩慢谒养,甚至沒長明郭;?? (2)霉菌污染;?? (3)培養(yǎng)箱中CO2的濃度過低

有些細胞需要在培養(yǎng)基中配制時添加其他成分薯定,L -谷氨酰胺是最常見的補充劑,會很快被用盡亏推。這些添加物可以現(xiàn)配后過濾除菌再加入培養(yǎng)基內(nèi)年堆,也可溶解后使用那些分裝好的儲存溶液。

細胞培養(yǎng)基中有許多熱不穩(wěn)定的成分变丧,必須低溫保存,但是培養(yǎng)基在接觸細胞以前必須要事先預(yù)熱到37℃童擎,千萬不要把冷的培養(yǎng)基加入細胞內(nèi)。由于培養(yǎng)基中的許多成分對熱不穩(wěn)定顾复,比如一些抗生素在37’C

時的半衰期很短,所以千萬不能把培養(yǎng)基一直放在37’C, 最好只在使用培養(yǎng)基的10 分鐘前再預(yù)熱聪姿,用多少培養(yǎng)基乙嘀,就取出多少預(yù)熱。

最好買500 ml 瓶裝的培養(yǎng)基或在500 ml 的瓶內(nèi)配制培養(yǎng)基虎谢。如果你一周使用500 ml

培養(yǎng)基,使用前一次加入血清和其他不穩(wěn)定的試劑擎场。但要注意先吸出適量的培養(yǎng)基几莽,使得在加入其他成分后最終的體積還是500 ml 。(如果要加入10

%的血清和5 ml 抗生素站欺,那么用試劑瓶配好445 ml 的培養(yǎng)基后再加入血清和分裝好的抗生素。)

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