學習內(nèi)容
怎么區(qū)分一二三代測序
二代測序大體流程
NGS組學都包括哪些分類
1. 一二三代測序
第一代DNA測序技術Sanger-雙脫氧鏈終止法是最為經(jīng)典的一代測序技術器赞。Sanger法是根據(jù)核苷酸某一固定的點開始来破,隨機在某一個特定的堿基處終止夷恍,并且在每個堿基后面進行熒光標記易猫,產(chǎn)生以A族阅、T揭北、C圃庭、G結束的四組不同長度的一系列核苷酸,然后在尿素變性的PAGE膠上電泳進行檢測歼冰,從而獲得可見DNA堿基序列的一種方法靡狞。成本高、通量低的傳統(tǒng)測序技術不能滿足深度測序和重復測序等大規(guī)母舻眨基因組測序的要求甸怕。
第二代DNA測序技術又稱下一代測序技術甘穿,是對第一代測序技術的劃時代變革的核心。
主要平臺有:
(1) 羅氏454公司的GS FLX sequencer
(2) Illumina solexa genome analyzer
(3) ABI公司的SOLiD sequencer
二代測序大幅度提高了測序速度梢杭,降低了測序成本温兼,保持了高準確性。缺點是讀長短武契,拼接困難募判,pcr技術增加了測序的錯誤率。
第三代測序技術是指單分子測序技術咒唆。DNA測序時届垫,不需要經(jīng)過PCR擴增,實現(xiàn)了對每一條DNA分子的單獨測序全释。第三代測序技術也叫從頭測序技術敦腔,即單分子實時DNA測序。
第三代測序技術的應用在基因組測序恨溜、甲基化研究符衔、突變鑒定(SNP檢測)這三個方面上。
2. 二代測序
二代測序.png