? ? ?大家好就乓，我是小燕同學秸脱，本次為大家介紹一篇關于枳實香蜂草苷Didymin治療潰瘍性結腸炎的文章十兢，題目為“Didymin?switches M1-like toward M2-like macrophage to ameliorate ulcerative colitis via fatty acid oxidation”洽腺，該文由南京中醫(yī)藥大學胡立宏武福、張毅楠教授團隊在2021年4月12日發(fā)表于Pharmacological Research冷蚂，JCR分區(qū)：Q1缭保，IF=5.893，原文鏈接：Lv Q, Xing Y, Liu Y, Chen Q, Xu J, Hu L, Zhang Y. Didymin switches M1-like toward M2-like macrophage to ameliorate ulcerative colitis via fatty acid oxidation. Pharmacol Res. 2021 Apr 27;169:105613. doi: 10.1016/j.phrs.2021.105613. Epub ahead of print. PMID: 33915297.
研究背景
潰瘍性結腸炎（UC）作為一種慢性多發(fā)性消化道炎癥性疾病蝙茶，發(fā)作時腸道微生物通過受損的上皮屏障進入腸粘膜艺骂，激活以中性粒細胞、巨噬細胞隆夯、樹突狀細胞等多種免疫細胞主導的炎癥反應彻亲。恢復巨噬細胞極化平衡是緩解UC活動期過度炎癥反應的有效策略吮廉。
香蜂草苷（didymin）作為枳實中提取的天然產(chǎn)物苞尝，可通過抑制NF-kB信號通路的活化從而緩解LPS誘導的炎癥反應，減少前炎因子TNF-α和IL-6等的表達宦芦，被證實具有抗炎宙址、抗腫瘤和抗氧化等多種生物活性。
科學問題
1）Didymin與巨噬細胞極化之間是否有聯(lián)系调卑？
2）Didymin是否通過調(diào)節(jié)巨噬細胞極化來行使抗炎功能抡砂？
3）其發(fā)揮功能的分子機制是怎樣的大咱？
1. 小分子化合物藥效評價：證明Didymin能明顯減輕急性、慢性潰瘍性結腸炎小鼠癥狀注益。
（1）DSS構建UC小鼠模型碴巾，模型關鍵指標測定、評價丑搔，確定成功造模厦瓢。
（2）組別設置、給藥
（3）藥效學評價
（4）藥物安全性評價
2. 小分子化合物調(diào)節(jié)巨噬細胞分化失衡的機制研究：證明Didymin能UC小鼠巨噬細胞M1/M2平衡啤月。
（1）Didymin對UC小鼠M1/M2失衡的逆轉煮仇。
①流式細胞術
②免疫熒光法
③RT-qPCR
（2）Didymin參與M1→M2極化的轉變，非CD8+谎仲、CD4+ T 細胞浙垫，CD19+ B及Th17細胞。
① 流式細胞分析以排除CD8+郑诺、CD4+ T夹姥、CD19+ B細胞的影響；
②RT-qPCR分析Th17-associated transcription factorRorc和Th17-associated factorIl17a表達以排除Th17細胞產(chǎn)生的影響辙诞；
③體外巨噬細胞極化模型（macrophage polarization model in vitro）建立佃声，在原代細胞上探索Didymin對巨噬細胞分化影響。
（3）Didymin靶向Hadhb介導的FAO途徑調(diào)控M1→M2分化倘要，而非PI3K/AKT, MAPK圾亏、NF-κB信號通路和糖酵解（glycolysis）途徑。
① 給予信號通路抑制劑處理
②細胞代謝水平探究：前期文獻調(diào)研封拧，獲得Warburg aerobic glycolysis參與M1極化→glycolysis 指標測定志鹃。
③繼續(xù)文獻調(diào)研，獲得FAO 和 OXPHOS增加泽西，促使M2表型產(chǎn)生→FAO測定→篩選到介導FAO的潛在靶標—Hadhb→AAV-Hadhb shRNA干預曹铃，細胞模型基因干擾、動物模型基因干擾捧杉。
3. 綜上陕见，didymin通過選擇性促進Hadhb表達，激活脂肪酸氧化過程味抖，促進巨噬細胞由M1型轉化為M2型评甜，恢復腸道內(nèi)巨噬細胞M1/M2平衡，調(diào)節(jié)腸道免疫仔涩，為UC的臨床治療提供新思路忍坷。
