細(xì)胞周期是指細(xì)胞自一次分裂完成至下一次分裂終了的全過程尊蚁，其可分為間期與分裂期兩大階段。在正常的細(xì)胞周期中侣夷，分裂間期持續(xù)的時間遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于分裂期横朋，幾乎占到細(xì)胞整個周期的90%左右。所以細(xì)胞周期分析中百拓，主要是研究細(xì)胞的分裂間期的細(xì)胞生命活動琴锭，而細(xì)胞在周期活動中晰甚，不同時期，其DNA的含量有所不同祠够。利用這一特性压汪，DNA含量成為了一項關(guān)鍵的分析指標(biāo)，尤其是在一些癌變細(xì)胞古瓤，或者藥物干預(yù)后的細(xì)胞出現(xiàn)異常生物活動的時候止剖，被廣泛應(yīng)用于腫瘤，免疫等科學(xué)研究中落君。
1細(xì)胞分裂間期DNA含量
G0/G1期：DNA合成前期穿香，為DNA合成做好物質(zhì)準(zhǔn)備，DNA含量為2N
S期：DNA的合成期绎速，此時期完成DNA的合成皮获、合成與DNA組裝構(gòu)成染色質(zhì)等相關(guān)組蛋白，DNA的含量增加纹冤，在2N-4N范圍間
G2/M期：DNA合成后期,DNA復(fù)制結(jié)束洒宝，開始分裂準(zhǔn)備，DNA含量為4N
根據(jù)細(xì)胞不同周期時的DNA含量的不同萌京，去檢測DNA含量雁歌，選擇一些能與DNA結(jié)合的熒光染料（如PI，DAPI等）,讓其緊密嵌入雙鏈DNA結(jié)構(gòu)中知残，結(jié)合后可以產(chǎn)生熒光信號靠瞎，其熒光信號的強(qiáng)度和雙鏈DNA的含量成正比。染色后求妹，利用流式細(xì)胞儀這一精密儀器乏盐，可以對細(xì)胞的DNA含量進(jìn)行定量測定，進(jìn)而根據(jù)DNA分布模式的差異制恍，深入分析細(xì)胞周期的不同階段及凋亡狀態(tài)父能。
2細(xì)胞周期檢測試劑盒特點(diǎn)
>適用于多種貼壁、懸浮細(xì)胞樣本
>區(qū)分不同時期細(xì)胞占比
>方法簡單净神，操作簡便
>無需額外使用其他昂貴試劑
武漢尚恩生物細(xì)胞周期檢測試劑盒設(shè)計靈活何吝，適用于貼壁培養(yǎng)及懸浮狀態(tài)下的細(xì)胞周期檢測。若需對組織樣本進(jìn)行細(xì)胞周期分析强挫，則需先通過消化處理將組織解離成單細(xì)胞懸液，以便后續(xù)的檢測流程能夠順利進(jìn)行薛躬。
3實(shí)驗流程
4實(shí)驗案例
▲Jurkat細(xì)胞70%乙醇固定過夜后細(xì)胞周期試劑盒（SNK-015）流式檢測結(jié)果
5結(jié)果解讀
假設(shè)G0/G1期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1俯渤，那么含有雙份基因組DNA的G2/M期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度的理論值為2,正在進(jìn)行DNA復(fù)制的S期細(xì)胞的熒光強(qiáng)度為1~2之間。
如果樣品中有凋亡細(xì)胞存在型宝，由于細(xì)胞核發(fā)生濃縮以及DNA片段化(DNA fragmentation)導(dǎo)致部分基因組DNA片段在染色過程中丟失八匠，因此凋亡細(xì)胞在染色后呈現(xiàn)明顯的弱染,即熒光強(qiáng)度小于1,在流式檢測的結(jié)果圖上出現(xiàn)所謂的sub-G1峰絮爷，即凋亡細(xì)胞峰。成為識別凋亡細(xì)胞的重要標(biāo)志梨树。
