利用CRISPR精確編輯過(guò)敏原基因

過(guò)敏性疾病是一個(gè)持續(xù)存在的臨床挑戰(zhàn),治療選擇有限天梧。因此召川,找到一種治療過(guò)敏原的方法冰蘑、改善過(guò)敏性疾病的技術(shù)尤為重要。

2022年1月17日评汰,美國(guó)INDOOR生物技術(shù)公司的研究團(tuán)隊(duì)在《Frontiersin Allergy》雜志上發(fā)表了一篇題為New Frontiers: Precise Editing ofAllergen Genes Using CRISPR的文章滥沫,該文章表示,基因組工程键俱,特別是CRISPR編輯兰绣,提供了從源頭有效刪除過(guò)敏原基因的可能性,這可能會(huì)極大地造福過(guò)敏個(gè)體编振。

迄今為止缀辩,CRISPR已經(jīng)在一些治療性應(yīng)用中顯示出前景,這無(wú)疑將指導(dǎo)疾病管理和治療的新方法的發(fā)展踪央。例如臀玄,CRISPR-Cas9被用來(lái)刪除CEP290基因的突變,該基因是導(dǎo)致Leber先天性失明10型(LCA10)的原因畅蹂,這是一種嚴(yán)重的視網(wǎng)膜營(yíng)養(yǎng)不良癥健无,通常源于單點(diǎn)突變引起的異常剪接。

鐮狀細(xì)胞惨盒薄(SCD)和輸血依賴性β-地中海貧血(TBT)是血紅蛋白β亞單位基因(HBB)突變導(dǎo)致的紅細(xì)胞異忱巯停或不足的兩種情況,也是用CRISPR-Cas9的目標(biāo)少漆。

上述應(yīng)用強(qiáng)調(diào)了CRISPR技術(shù)在解決單基因疾病方面的價(jià)值臼膏,特別是那些有相對(duì)簡(jiǎn)單的方法提供治療的疾病(如直接視網(wǎng)膜下注射或體外血細(xì)胞編輯)示损。然而渗磅,許多CRISPR應(yīng)用將需要對(duì)相關(guān)細(xì)胞或組織進(jìn)行原位編輯,這最終將需要更復(fù)雜的遞送方法或載體检访。目前始鱼,體內(nèi)傳遞主要限于使用病毒載體或脂質(zhì)納米顆粒。

最近脆贵,CRISPR技術(shù)被用來(lái)在體外敲除Fel d 1的基因医清。從50只家貓的組織樣本中提取基因組DNA,并對(duì)CH1和CH2進(jìn)行測(cè)序丹禀,以確定基因中適合用CRISPR技術(shù)靶向的保守區(qū)域状勤。評(píng)估了10個(gè)針對(duì)Fel d 1鏈1或2的sgRNA的小組。每個(gè)CRISPR sgRNAs與Cas9核酸酶一起使用脂質(zhì)轉(zhuǎn)染法傳遞到永生的貓科動(dòng)物腎上皮細(xì)胞双泪。通過(guò)對(duì)每個(gè)sgRNA的DNA序列分解或T7E1錯(cuò)配檢測(cè)來(lái)評(píng)估CRISPR誘導(dǎo)的幀移突變導(dǎo)致的Fel d 1基因敲除持搜。

迄今為止,CRISPR技術(shù)除了編輯貓的過(guò)敏原基因焙矛,還可編輯母雞蛋葫盼、大豆、小麥村斟、花生以及牛奶和山羊奶中的過(guò)敏原基因(ATI:α-淀粉酶/胰蛋白酶抑制劑)(如上圖)贫导。這些研究證明了該技術(shù)在提高我們對(duì)過(guò)敏原蛋白的理解方面的價(jià)值,并強(qiáng)調(diào)了CRISPR編輯在為過(guò)敏性疾病提供更好的替代治療方案方面的巨大潛力蟆盹。未來(lái)孩灯,CRISPR技術(shù)也可用于識(shí)別新型過(guò)敏原,或直接修改免疫反應(yīng)逾滥,作為防止識(shí)別過(guò)敏原蛋白的一種方法峰档。今后,對(duì)過(guò)敏原蛋白序列寨昙、結(jié)構(gòu)或抗體結(jié)合位點(diǎn)的全面分析讥巡,對(duì)于識(shí)別基本功能域或保守序列,以CRISPR刪除為目標(biāo)舔哪,將是非常寶貴的欢顷。此外,進(jìn)一步開發(fā)將CRISPR試劑有針對(duì)性地輸送到體內(nèi)特定細(xì)胞或組織的方法捉蚤,將證明對(duì)成功編輯成年動(dòng)物的過(guò)敏原基因至關(guān)重要抬驴。

CRISPR是現(xiàn)在應(yīng)用比較成熟的基因編輯方法,但是操作比較復(fù)雜缆巧。用于基因的減弱/增強(qiáng)/編輯比較先進(jìn)的方法是動(dòng)物體內(nèi)轉(zhuǎn)染方法怎爵,有很多文章報(bào)道,方法簡(jiǎn)單盅蝗,易于操作鳖链,最快3天可以得到結(jié)果

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