導(dǎo)言

今天小編分享一篇2021年4月9日發(fā)表于Cell的有關(guān)免疫治療的文章——Glioblastomas acquire myeloid-affiliated transcriptional programs via epigenetic immunoediting to elicit immune evasion.多形性膠質(zhì)母細(xì)胞瘤（GBM）是一種侵襲性腦腫瘤茅主，目前的免疫治療方法尚未成功。在此土榴，研究者探討GBM中免疫逃避的新機(jī)制诀姚。通過將GBM干細(xì)胞（GSCs）連續(xù)移植到具有免疫活性的宿主中，獲得具有逃避免疫清除的能力的GSC玷禽。從機(jī)制上講赫段，這不是通過腫瘤亞克隆的遺傳選擇引起的，而是通過表觀遺傳免疫編輯過程引起矢赁。在免疫攻擊后糯笙，GSCs中的穩(wěn)定轉(zhuǎn)錄和表觀遺傳變化得到加強(qiáng)。這些變化啟動(dòng)了骨髓細(xì)胞相關(guān)的轉(zhuǎn)錄程序坯台，從而導(dǎo)致與腫瘤相關(guān)的巨噬細(xì)胞的募集增加炬丸。此外，在人間充質(zhì)亞型GSCs中發(fā)現(xiàn)相似的表觀遺傳學(xué)和轉(zhuǎn)錄特征蜒蕾。全文結(jié)論：表觀遺傳免疫可能通過重塑腫瘤免疫微環(huán)境（TME）稠炬，在最具侵襲性的間充質(zhì)GBM亞型中驅(qū)動(dòng)獲得性免疫逃逸程序。

結(jié)論

??免疫活性GBM小鼠模型中疾病相關(guān)TME的重現(xiàn)

??免疫攻擊后GSCs中轉(zhuǎn)錄組的穩(wěn)定重組

??免疫逃逸的GSCs部署“髓樣擬態(tài)”以建立富集髓樣的TME

??獲得性轉(zhuǎn)錄變化與表觀遺傳免疫編輯過程一致

結(jié)果展示

工程化GSCs通過免疫活性宿主連續(xù)移植獲得免疫逃逸能力

有研究表明咪啡，GBM由具有神經(jīng)干細(xì)胞（NSC）特征的細(xì)胞驅(qū)動(dòng)首启；基因工程小鼠模型和患者樣品的基因組分析表明，內(nèi)源性NSC可能是GBM的起源細(xì)胞撤摸。因此毅桃，研究者從C57BL/6 J（BL6）小鼠分離的NSC中構(gòu)建了一組等基因GBM干細(xì)胞（GSCs），通過引入5種已確定的GBM驅(qū)動(dòng)基因突變中的1種：EGFRvIII或PDGFRA過表達(dá)准夷，CRISPR/Cas介導(dǎo)的Nf1钥飞、Pten或Trp53的敲除。這些單基因敲除的GSC表達(dá)典型的NSC標(biāo)記物（NESTIN和SOX2）衫嵌，并保持分化為神經(jīng)元和星形膠質(zhì)細(xì)胞的能力读宙。接下來，生成突變的組合以對間充質(zhì)亞型進(jìn)行建模楔绞。首先结闸，通過共同敲除Nf1和Pten（NP細(xì)胞）制備了雙突變型NSC。將GFP[+] NP細(xì)胞原位移植到免疫低下（NOD-scid-gamma [NSG]）小鼠體內(nèi)酒朵，導(dǎo)致形成小的良性生長桦锄。只有進(jìn)一步用EGFRvIII過表達(dá)進(jìn)行改造，形成三重突變細(xì)胞系（NPE）才觀察到體內(nèi)具有GBM預(yù)期特征的極具侵襲性的腫瘤生長和浸潤蔫耽。此外结耀，還構(gòu)建了一種與前神經(jīng)元亞型相對應(yīng)的腫瘤起始細(xì)胞系（PPP），其腫瘤侵襲性遠(yuǎn)不及NPE。

反向相蛋白陣列（RPPA）分析證實(shí)了突變NSCs中RTK和PI3K信號通路的激活饼记，包括ERK香伴、Ras、Raf具则、mTor即纲、Akt和Src表達(dá)的升高。已知GBM的前神經(jīng)亞型具有較低的免疫浸潤和免疫抑制性TME博肋，而NPE細(xì)胞更具攻擊性低斋，以及它們與免疫逃逸性最強(qiáng)的間充質(zhì)GBM亞型的對應(yīng)關(guān)系，研究者更專注于用NPE模型探索免疫逃逸機(jī)制匪凡。

實(shí)驗(yàn)證實(shí)膊畴，NPE細(xì)胞在具有免疫能力的同系BL6宿主中具有致瘤性，這使研究者能夠?qū)BM細(xì)胞與免疫TME之間的相互作用進(jìn)行建模病游。在免疫功能低下的NSG小鼠中形成的腫瘤作為對照相比發(fā)現(xiàn)唇跨，BL6小鼠中NPE腫瘤的出現(xiàn)速度比NSG小鼠中慢（分別為25-50天和15-20天），并且大多數(shù)BL6宿主可以長期存活衬衬。這些與BL6宿主免疫系統(tǒng)對NPE細(xì)胞的反應(yīng)并限制其腫瘤形成是一致的买猖。

研究者推斷，通過從宿主進(jìn)行系列移植后滋尉，從逃避免疫監(jiān)視的BL6小鼠的腫瘤中獲得原代GSCs培養(yǎng)物玉控，可以富集具有獲得性免疫逃逸能力的細(xì)胞。因此狮惜，從BL6小鼠的NPE腫瘤（NPE-BL6-TD）建立了新鮮的培養(yǎng)物高诺。NPE-BL6-TD細(xì)胞被移植到第二級BL6宿主中，形成頻率更高的腫瘤碾篡。然后虱而，將從這些繼發(fā)性腫瘤（NPE-IE）中重新獲得的GSCs培養(yǎng)物移植到第三級BL6宿主中。移植了NPE-IE細(xì)胞的小鼠顯示腫瘤形成增加开泽，存活率明顯低于先前移植的品系牡拇。但是，將NPE和NPE-IE細(xì)胞移植到對照NSG小鼠中時(shí)眼姐，顯示出相似的致瘤性诅迷，并且沒有發(fā)現(xiàn)NPE-IE細(xì)胞在體外具有增殖優(yōu)勢佩番≈谄欤總之，這些結(jié)果表明NPE-IE細(xì)胞具有免疫逃逸能力趟畏。

免疫逃逸型NPE-IE腫瘤具有高度免疫抑制的微環(huán)境

為了確認(rèn)NPE-IE腫瘤是否由于逃逸T細(xì)胞清除能力而更具侵略性贡歧，研究者分別耗竭了NPE，NPE-BL6-TD和NPE-IE腫瘤的BL6小鼠中的CD8 T細(xì)胞群。在所有情況下都觀察到腫瘤生長加快利朵，腫瘤滲透率逐漸增加律想。這證實(shí)了NPE細(xì)胞系及其衍生物產(chǎn)生的腫瘤不會發(fā)生抗原丟失，而CD8 T細(xì)胞介導(dǎo)的清除正是它們主動(dòng)逃逸的原因绍弟。

接下來技即，利用流式細(xì)胞術(shù)，比較了非腫瘤腦組織中與NPE或NPE-IE腫瘤腦組織中存在的免疫細(xì)胞類型樟遣。在荷瘤腦中而叼，我們觀察到總的腦免疫細(xì)胞儲備發(fā)生了重大變化，包括巨噬細(xì)胞和CD8/CD4 T細(xì)胞（M1和M2樣巨噬細(xì)胞的標(biāo)志物）的顯著增加豹悬，以及小膠質(zhì)細(xì)胞的明顯減少葵陵。此外，我們觀察到荷瘤腦中的淋巴群顯示出功能障礙的標(biāo)志物瞻佛，如PD-1和TIM3的表達(dá)脱篙。重要的是，腫瘤和鄰近組織的熒光免疫組織化學(xué)表明主要的巨噬細(xì)胞群（F4/80[+]?Iba1[+]）局限于腫瘤塊伤柄，并且在整個(gè)大腦中通常不增加绊困。

直接分離腫瘤腫塊以進(jìn)一步表征腫瘤免疫微環(huán)境。多參數(shù)流式細(xì)胞儀數(shù)據(jù)顯示NPE-IE腫瘤中的免疫細(xì)胞浸潤較NPE腫瘤增加响迂。重要的是考抄，NPE-IE腫瘤中的單核細(xì)胞骨髓源性抑制細(xì)胞（M-MDSCs）和巨噬細(xì)胞顯著增加，腫瘤浸潤的巨噬細(xì)胞表達(dá)PD-L1的水平明顯高于小膠質(zhì)細(xì)胞蔗彤。與NPE腫瘤相比川梅，沒有觀察到NPE-IE腫瘤中巨噬細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換的證據(jù)；相反然遏，在每種情況下贫途，巨噬細(xì)胞表現(xiàn)出典型的吞噬和抗原呈現(xiàn)表型（即CD86[+]和CD11c[+]），以及免疫抑制標(biāo)記物PD-L1待侵。自然殺傷細(xì)胞（NK）和樹突狀細(xì)胞群沒有明顯變化丢早。

阻斷CSF-1R信號傳導(dǎo)降低NPE-IE細(xì)胞的免疫逃逸能力

以往的研究表明巨噬細(xì)胞集落刺激因子1受體（CSF-1R）是治療膠質(zhì)瘤的一個(gè)潛在靶點(diǎn)。為了確定募集到NPE-IE腫瘤中的巨噬細(xì)胞是否支持免疫逃逸秧倾，在BL6小鼠中使用針對CSF-1R的靶向抗體耗竭這些細(xì)胞怨酝，這導(dǎo)致了腫瘤存活率的提高。在免疫功能不受影響的NSG移植對照中那先，該治療無明顯影響农猬。因此，腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞在維持BL6小鼠NPE-IE腫瘤的生長和免疫逃逸中起著關(guān)鍵作用售淡。

雖然NPE-IE腫瘤中各種T細(xì)胞群的頻率沒有顯著差異斤葱，但是發(fā)現(xiàn)PD-1和LAG3標(biāo)記物陽性的CD8和CD4 T細(xì)胞群增加慷垮。這表明NPE-IE TME表現(xiàn)出T細(xì)胞功能障礙的升高狀態(tài)和增強(qiáng)的免疫抑制功能。如前所述揍堕，兩種腫瘤類型中的巨噬細(xì)胞對PD-1配體PD-L1的表達(dá)呈高度陽性料身，我們發(fā)現(xiàn)小膠質(zhì)細(xì)胞對LAG3配體MHC-II的表達(dá)呈陽性，這表明除了TAM募集外衩茸，還存在其他免疫抑制途徑芹血。結(jié)果發(fā)現(xiàn)NPE來源的腫瘤可以逐漸逃避CD8 T細(xì)胞的清除，并建立一個(gè)越來越多的富含髓細(xì)胞和促腫瘤基因的TME楞慈，并伴隨著T細(xì)胞衰竭祟牲。

免疫逃逸細(xì)胞在免疫攻擊后發(fā)生顯著的轉(zhuǎn)錄重組

為了揭示在NPE-IE細(xì)胞中觀察到的獲得性免疫逃逸機(jī)制，研究者對其基因組抖部、轉(zhuǎn)錄組和表觀基因組進(jìn)行了表征说贝。重要的是，NPE和NPE-IE細(xì)胞的核型分析和全基因組測序（WGS）在比較時(shí)均未發(fā)現(xiàn)明顯的遺傳破壞慎颗。這表明在NPE-IE腫瘤中觀察到的獲得性免疫逃逸特性并不是克隆進(jìn)化或經(jīng)典的遺傳免疫編輯過程所能解釋的乡恕。因此推測NPE-IE細(xì)胞可能已經(jīng)獲得了其他支持免疫逃逸的細(xì)胞內(nèi)在的和穩(wěn)定的基因表達(dá)變化。

研究者對一組細(xì)胞進(jìn)行了mRNA-seq分析俯萎，包括單個(gè)突變系和來源于NSG腫瘤的細(xì)胞（無免疫攻擊的體內(nèi)微環(huán)境暴露的參考對照）傲宜。引人注意的是，在單個(gè)突變系中夫啊，Nf1缺失表現(xiàn)出最接近完全轉(zhuǎn)化的NPE突變體的轉(zhuǎn)錄組函卒。僅Nf1缺失富集與GBM相關(guān)的幾個(gè)基因特征，包括顯著激活血管生成和細(xì)胞遷移途徑撇眯。這與間充質(zhì)亞型中觀察到的血管生成特征增加一致报嵌，表明Nf1的缺失可能是惡性轉(zhuǎn)化的“原發(fā)”細(xì)胞。

然而熊榛，重要的是锚国，免疫逃逸品系（NPE-BL6-TD和NPE-IE）獲得明顯不同的轉(zhuǎn)錄模式，這不能單獨(dú)用Nf1缺失來解釋玄坦，包括許多免疫相關(guān)基因血筑。其中NPE-IE細(xì)胞中幾種趨化因子的上調(diào)，特別是Ccl9煎楣，可解釋NPE-IE腫瘤髓樣細(xì)胞含量的增加豺总。在免疫活性宿主細(xì)胞中上調(diào)的另一個(gè)有趣的候選基因是Irf8（干擾素調(diào)節(jié)因子8）。Irf8是一種髓樣特異性的主轉(zhuǎn)錄因子择懂，通常在造血細(xì)胞中專門表達(dá)喻喳，并且在髓樣譜系和巨噬細(xì)胞分化中具有已知作用。Irf8在NSC中通常是沉默的休蟹，因此沸枯，在免疫攻擊后，NPE細(xì)胞可能會不適當(dāng)?shù)亍敖俪帧惫撬柚髡{(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄因子的表達(dá)赂弓“罅瘢總之，這些發(fā)現(xiàn)表明盈魁，體內(nèi)免疫攻擊顯著觸發(fā)了NPE細(xì)胞中的轉(zhuǎn)錄變化翔怎。

NPE-IE系中的免疫逃逸由表觀遺傳免疫編輯所支持

鑒于體內(nèi)免疫攻擊后誘導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄變化在體外擴(kuò)增后能穩(wěn)定保留，研究者推斷可能發(fā)生了表觀遺傳變化杨耙。利用亞硫酸氫鹽還原代表性測序（RRBS）分析了全基因組DNA甲基化水平赤套。主成分分析（PCA）顯示了三個(gè)不同的組，并且在體內(nèi)移植的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)了顯著的低甲基化水平珊膜。NPE-BL6-TD和NPE-IE細(xì)胞系通過PCA緊密地聚集在一起容握，并且與NPE細(xì)胞相比表現(xiàn)出廣泛的低甲基化水平。與mRNA-seq數(shù)據(jù)一致车柠，免疫逃逸細(xì)胞中的許多差異去甲基化基因與免疫過程有關(guān)剔氏。

最重要的差異甲基化區(qū)域之一出現(xiàn)在Irf8啟動(dòng)子區(qū)和基因體中，甲基化在NPE-BL6-TD和NPE-IE系中逐漸消失竹祷，與轉(zhuǎn)錄激活增加一致谈跛。這些DNA甲基化模式的變化提示了“表觀遺傳學(xué)免疫編輯”過程。在該過程中塑陵，由免疫攻擊引起的轉(zhuǎn)錄變化得以穩(wěn)定感憾，并被選擇用于那些具有較高免疫逃逸能力的細(xì)胞中。這將導(dǎo)致高度免疫逃逸和轉(zhuǎn)錄改變的后代令花。有趣的是阻桅，研究者還發(fā)現(xiàn)其他免疫逃逸調(diào)節(jié)因子包括Nt5e（CD73）和Cd274（PDL1）都存在甲基化丟失，這與這些基因在體內(nèi)被重新激活有關(guān)兼都。?

Irf8對NPE細(xì)胞中IFN-γ和TAMs有重要作用

有研究表明鳍刷，Irf8通過IFN-γ誘導(dǎo)的STAT1信號在巨噬細(xì)胞中被激活。在NPE-IE細(xì)胞系中俯抖，對IFN-γ的反應(yīng)是一個(gè)富集的狀態(tài)温峭，因此研究者假設(shè)來自免疫TME的慢性IFN-γ信號可能刺激NPE細(xì)胞中Irf8表達(dá)的激活参滴。通過將免疫原性NPE細(xì)胞暴露于IFN-γ，直接在體外進(jìn)行測試。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)等龙，IFN-γ處理后，Irf8在NPE-BL6-TD或NPE-IE細(xì)胞中可以更快地達(dá)到更高水平鸟赫。這與Irf8位點(diǎn)DNA甲基化缺失后快速轉(zhuǎn)錄激活的啟動(dòng)一致师郑。在體外，未免疫的NPE細(xì)胞中I型IFN信號傳導(dǎo)（通過IFN-α/β處理誘導(dǎo)）不能誘導(dǎo)與IFN-γ相同程度的Irf8表達(dá)漫蛔。此外嗜愈，JAK/STAT抑制劑托法替尼逆轉(zhuǎn)了NPE細(xì)胞中Irf8的表達(dá)旧蛾，但未能逆轉(zhuǎn)NPE-IE細(xì)胞中Irf8的表達(dá)，這表明在NPE-IE細(xì)胞中存在JAK/STAT獨(dú)立的機(jī)制蠕嫁，以維持Irf8的高表達(dá)锨天。此外，直接分離的GFP[+]?NPE-BL6-TD和NPE-NSG-TD腫瘤細(xì)胞的譜分析證實(shí)了關(guān)鍵基因的激活發(fā)生在體外擴(kuò)增之前（例如Irf8剃毒，H2-Ab1）病袄。因此，將NPE細(xì)胞暴露于具有免疫能力的體內(nèi)環(huán)境足以誘導(dǎo)這些觀察到的轉(zhuǎn)錄變化赘阀。

為了確定NPE-IE腫瘤TME內(nèi)的免疫細(xì)胞類型益缠，從NPE腫瘤中分離免疫細(xì)胞，并在體外與親代NPE細(xì)胞共培養(yǎng)基公。數(shù)據(jù)顯示幅慌，浸潤性巨噬細(xì)胞群（F4/80[+]，CD45[hi]）可以刺激免疫原性NPE細(xì)胞中與NPE-BL6-TD和NPE-IE細(xì)胞中觀察到的類似的轉(zhuǎn)錄變化轰豆。這表明浸潤的巨噬細(xì)胞可能是體內(nèi)信號的來源欠痴，例如IFN-γ可驅(qū)動(dòng)這種反應(yīng)。此外秒咨，盡管前神經(jīng)PPP細(xì)胞在體內(nèi)不能有效地生成腫瘤或顯示免疫逃逸能力喇辽，但是研究者認(rèn)為PPP細(xì)胞仍可能對NPE腫瘤源性免疫細(xì)胞共培養(yǎng)產(chǎn)生反應(yīng)，因?yàn)樵诨颊吣[瘤中雨席，前神經(jīng)亞型可以轉(zhuǎn)變?yōu)殚g充質(zhì)細(xì)胞菩咨。

PPP細(xì)胞與從NPE腫瘤分離的免疫細(xì)胞的體外共培養(yǎng)表明，類似的轉(zhuǎn)錄程序可在神經(jīng)模型中激活陡厘。接下來構(gòu)建了NPE-IE Irf8敲除細(xì)胞系抽米，這些表現(xiàn)出較低的攻擊性表型，并且出現(xiàn)的腫瘤的動(dòng)力學(xué)與未經(jīng)免疫的NPE細(xì)胞移植的小鼠相似糙置。綜上表明云茸，Irf8的激活是NPE-IE細(xì)胞免疫逃逸的重要因素，并且可能通過IFN-γ介導(dǎo)的體內(nèi)激活而發(fā)生谤饭。

人GSCs有兩種主要的轉(zhuǎn)錄亞型并且間充質(zhì)GSCs由IFN信號傳導(dǎo)決定

為了評估這些的發(fā)現(xiàn)是否與人類疾病相關(guān)标捺，研究者對36種低傳代患者來源的GSCs培養(yǎng)物進(jìn)行了RNA-seq和分子亞型分析。通過分析體外擴(kuò)增的GSCs揉抵，發(fā)現(xiàn)了兩種不同的亞型：S1亡容，稱之為非間充質(zhì)免疫標(biāo)記（non-MES[Imm]）；S2冤今，稱之為間充質(zhì)免疫標(biāo)記（MES[Imm]）闺兢。這些元基因模塊的富集與之前發(fā)表的基于全腫瘤轉(zhuǎn)錄本的標(biāo)記性質(zhì)相關(guān)。一個(gè)不同的轉(zhuǎn)錄譜與MES[Imm]亞型相關(guān)戏罢，包括與IFN信號相關(guān)顯性特征屋谭。

值得注意的是脚囊，在富含MES[Imm]的GSCs中觀察到幾個(gè)干擾素調(diào)節(jié)因子家族成員的上調(diào)，包括Irf8和Irf7桐磁。但是悔耘，Irf1的關(guān)聯(lián)更為明顯。人Irf1也是一種IFN-γ反應(yīng)性轉(zhuǎn)錄因子所意，據(jù)報(bào)道在髓樣細(xì)胞的發(fā)育中與hIrf8一起發(fā)揮作用。此外催首，還發(fā)現(xiàn)MES[Imm]中CCL2的表達(dá)增加扶踊，這可能解釋了間充質(zhì)GBM中觀察到的免疫種群增加。最后郎任，證實(shí)了工程化NPE細(xì)胞中這種MES[Imm]的富集秧耗，隨著細(xì)胞系獲得免疫逃逸能力（即NPE-IE細(xì)胞）而增加。因此舶治，在MES[Imm]人類GBM中也觀察到了與小鼠模型中未發(fā)現(xiàn)的相關(guān)特征分井。重要的是，在沒有IFN信號的情況下霉猛，這些轉(zhuǎn)錄特征在長期培養(yǎng)中是穩(wěn)定且可遺傳的尺锚。這與轉(zhuǎn)錄組穩(wěn)定變化的表觀遺傳事件一致。通過將這些發(fā)現(xiàn)與獨(dú)立的惜浅，可公開獲得的單細(xì)胞RNA-seq（scRNA-seq）數(shù)據(jù)的分析進(jìn)行比較瘫辩，進(jìn)一步驗(yàn)證了MES[Imm]和Non-MES[Imm]亞型。

人MES[Imm]-GBMs與NPE-IE細(xì)胞顯示相似的DNA甲基化變化

為了評估富含MES[Imm]的人GBMs是否也能反映小鼠模型的DNA甲基化變化坛悉，在患者來源的GSCs中分析了DNA甲基化水平伐厌，結(jié)果觀察到MES[Imm]亞型中DNA甲基化水平明顯下降。此外裸影，對來自患者GSCs的單樣本基因集富集分析（ssGSEA）表明挣轨，在MES[Imm]亞型中觀察到的低水平的DNA甲基化與先前發(fā)表的間充質(zhì)標(biāo)記相關(guān)，并且可能與相關(guān)免疫途徑（如IFN-γ反應(yīng)）的激活有關(guān)轩猩。值得注意的是卷扮，在MES[Imm]樣品中，發(fā)現(xiàn)了與小鼠模型（包括Irf 1均践，CCL2和Irf 8）中確定的基因和途徑相關(guān)的CpG島上的甲基化缺失画饥。這些人類GBM細(xì)胞的轉(zhuǎn)錄重組和表觀遺傳變化與小鼠模型中觀察到的過程相似。因此浊猾，使用與在NPE-IE小鼠細(xì)胞中鑒定的機(jī)制相似的機(jī)制抖甘，人GBM還可進(jìn)行表觀遺傳學(xué)免疫編輯，以穩(wěn)定這種免疫逃逸狀態(tài)葫慎。

總結(jié)

?

總體而言衔彻，研究者發(fā)現(xiàn)表明薇宠，GBM腫瘤中所觀察到的亞型同一性的梯度或連續(xù)性可以通過腫瘤免疫微環(huán)境侵蝕其表觀遺傳環(huán)境和改變轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控網(wǎng)絡(luò)的程度來解釋。轉(zhuǎn)錄和表觀遺傳重構(gòu)以及髓系譜系特異性轉(zhuǎn)錄因子和轉(zhuǎn)錄模塊的共同選擇是在TME中發(fā)生免疫攻擊后發(fā)生的腫瘤細(xì)胞內(nèi)在反應(yīng)艰额。此外澄港，探索巨噬細(xì)胞募集，保留和極化的相對作用柄沮，以及其他免疫細(xì)胞群的作用回梧，需要進(jìn)行更加深入的研究。盡管研究者對人類特征的分析與結(jié)論是一致的祖搓，但是還需要進(jìn)一步直接測試免疫細(xì)胞或細(xì)胞因子對其轉(zhuǎn)錄狀態(tài)的影響狱意。將需要更深入的特征描述和測試（PPP）模型，以明確在此確定的途徑對間充質(zhì)亞型的特異性拯欧。