小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)培養(yǎng)要點(diǎn)

4T1是從410.4瘤株中未經(jīng)誘變篩得的6-硫鳥嘌噙抗性細(xì)胞株享钞。當(dāng)注射到BALB/c小鼠中時(shí),4T1自發(fā)產(chǎn)生高轉(zhuǎn)移腫瘤诀蓉,可轉(zhuǎn)移到肺栗竖,肝,淋巴結(jié)和大腦渠啤,同時(shí)在注射部位形成始發(fā)灶狐肢。誘導(dǎo)轉(zhuǎn)移時(shí)不需要摘除始發(fā)灶。4T1細(xì)胞在BALB/c小鼠中的生長(zhǎng)與轉(zhuǎn)移特性與人體中的乳腺癌十分相近沥曹。這種腫瘤是人VI期乳腺癌的動(dòng)物模型份名。4T1-誘導(dǎo)的腫瘤在手術(shù)后及未手術(shù)情況下轉(zhuǎn)移的動(dòng)力學(xué)相近碟联,可以用作手術(shù)后及未手術(shù)模型。跟其他腫瘤模型相比僵腺,由于4T1的抗6-硫鳥嘌噙特性鲤孵,微小的轉(zhuǎn)移細(xì)胞團(tuán)(少到僅僅1個(gè))也可以在許多遠(yuǎn)端器官中檢測(cè)到。

4T1是一種可移植的小鼠乳腺癌細(xì)胞系辰如。它被廣泛地用作體外腫瘤模型普监,用于研究人類乳腺癌。4T1細(xì)胞有高度的侵襲性和腫瘤形成能力丧没;它們傾向于從乳腺的原發(fā)腫瘤部位轉(zhuǎn)移至其他部位鹰椒,包括肝臟、淋巴結(jié)呕童、肺漆际、骨骼和腦部,因此是研究乳腺癌轉(zhuǎn)移的理想選擇夺饲。

細(xì)胞名稱:小鼠乳腺癌細(xì)胞

細(xì)胞簡(jiǎn)稱:4T1

產(chǎn)品貨號(hào):TCM-C705

種屬來(lái)源:小鼠

組織來(lái)源:乳腺

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng)

培養(yǎng)體系:RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

配套培養(yǎng)基貨號(hào):TCM-G705

傳代比例:1:3-1:6奸汇,每2-3天換液一次

傳代周期:48-72 h

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%CO2,溫度:37℃

凍存條件:60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO往声,液氮儲(chǔ)存

質(zhì)量檢測(cè):細(xì)菌擂找、真菌、支原體檢測(cè)均為陰性

4T1細(xì)胞培養(yǎng)注意要點(diǎn)

1. 小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)細(xì)胞特性

①?小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)為貼壁細(xì)胞浩销,上皮細(xì)胞樣贯涎,細(xì)胞在低密度時(shí)及傳代第二天會(huì)有少量細(xì)胞為圓形或沒有上皮細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞,期間不要換液慢洋,一般傳代48h后會(huì)恢復(fù)正常塘雳。

②?4T1傳代周期較短,在標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)體系RPMI-1640+10%FBS中普筹,倍增時(shí)間在24h左右败明,細(xì)胞傳代比例1:6-1:8,傳代周期2-3天太防。

2. 小鼠乳腺癌細(xì)胞(4T1)注意事項(xiàng)

①?4T1細(xì)胞密度越高消化時(shí)間越長(zhǎng),建議細(xì)胞密度80%進(jìn)行傳代蜒车,消化時(shí)間約5-10min讳嘱。(不同品牌醇王、不同溫度的胰酶可能消化時(shí)間有區(qū)別)

②?4T1細(xì)胞在密度高于80%,或者在同一個(gè)培養(yǎng)器皿中培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng),會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞難消化,推薦使用分步消化的方式進(jìn)行。

4T1細(xì)胞推薦消化步驟:

a. 去除細(xì)胞上清阱穗,使用0.25%胰酶替代PBS清洗一遍;

b. 加入適量胰酶揪阶,放入37℃培養(yǎng)箱消化昌抠,5min左右取出觀察一次;

c. 如觀察到有大部分細(xì)胞變圓鲁僚,可輕拍瓶身炊苫,如細(xì)胞不可脫落則延長(zhǎng)消化時(shí)間。

d. 如觀察到有部分細(xì)胞脫落冰沙,則將已經(jīng)脫落的細(xì)胞懸液收集到離心管中加入完全培養(yǎng)基中止消化侨艾,原瓶中再次加入新鮮胰酶重復(fù)消化一次。

e. 將分次消化的細(xì)胞懸液集中在一起進(jìn)行離心拓挥,去除上清后按照1:6-1:8的比例進(jìn)行分瓶唠梨。

f. 傳代后第二天細(xì)胞不需要換液處理,一般2-3天即可長(zhǎng)滿侥啤。

③?血清質(zhì)量差異可能引起倍增時(shí)間波動(dòng)当叭,建議選用高質(zhì)量的胎牛血清。推薦使用海星4T1細(xì)胞專用培養(yǎng)基(TCM-G705)愿棋。

ATCC參考照片

參考鏈接:4T1-CRL-2539|ATCC? ? 20240124180136_312_3586.pdf(cellbank.org.cn)

4T1細(xì)胞的研究應(yīng)用

癌癥生物學(xué):4T1細(xì)胞系被廣泛用于研究癌癥的發(fā)展和生長(zhǎng)科展。它是研究和探索不同的細(xì)胞和分子機(jī)制參與腫瘤進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的理想體外模型。此外糠雨,它可揭示這些過(guò)程中細(xì)胞信號(hào)通路才睹、微環(huán)境和基因表達(dá)的作用。2019年進(jìn)行的研究使用4T1細(xì)胞發(fā)現(xiàn)了癌細(xì)胞侵襲和遷移的驅(qū)動(dòng)機(jī)制甘邀。結(jié)果表明STAT3琅攘、MMP2和MMP9基因參與其中,這些基因的抑制可以顯著限制癌細(xì)胞的遷移和侵襲[4]松邪。類似的研究也表明在腫瘤發(fā)展和轉(zhuǎn)移中涉及到其他幾條信號(hào)通路坞琴。

癌癥治療研究:4T1細(xì)胞系被廣泛用于癌癥治療研究中的篩選和評(píng)估新療法。一項(xiàng)研究探討了迷迭香提取物(Rosemary-FeNPs)和純迷迭香提取物中綠色合成的鐵納米顆粒對(duì)4T1細(xì)胞系的細(xì)胞毒性潛力逗抑。研究結(jié)果提出Rosemary-FeNPs比純提取物更有希望剧辐。類似地寒亥,2021年的一項(xiàng)研究研究了生姜提取物在4T1乳腺癌細(xì)胞和4T1小鼠模型中的抗腫瘤潛力。

已發(fā)表過(guò)的文章:

IF=18?Wang Z, Sha T, Li J, et al. Turning foes to friends: Advanced “in situ nanovaccine” with dual immunoregulation for enhanced immunotherapy of metastatic triple-negative breast cancer[J]. Bioactive Materials, 2024, 39: 612-629.

IF=5.8?Zhao H Y, Li K H, Wang D D, et al. A mitochondria-targeting dihydroartemisinin derivative as a reactive oxygen species-based immunogenic cell death inducer[J]. Iscience, 2024, 27(1).


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