人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)細(xì)胞培養(yǎng)要點(diǎn)

MCF細(xì)胞是從一名69歲白人女性乳腺癌患者的胸腔積液中分離建立,常用于研究乳腺癌發(fā)病機(jī)理的研究喂很,MCF-7屬于貼壁細(xì)胞惜颇,顯微鏡下呈現(xiàn)上皮細(xì)胞形態(tài),且保留了分化乳腺上皮的許多特性少辣。包括:能通過胞質(zhì)雌 激素受體加工雌二醇并能形成圓形復(fù)合物(domes)凌摄。該細(xì)胞含有 WNT7B 癌基因。腫瘤壞死因子α(TNF alpha)可以抑制 MCF-7 細(xì)胞生長漓帅。細(xì)胞經(jīng)抗雌激素處理后能調(diào)節(jié) 胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白 IGFBPS 分泌锨亏。

MCF-7常用DMEM培養(yǎng)基,含10%胎牛血清忙干,在37℃器予、5%二氧化碳培養(yǎng)箱培養(yǎng),MCF-7是一種生長緩慢的細(xì)胞系捐迫,它會(huì)以松散的三維團(tuán)簇的形式出現(xiàn)乾翔,并伴有一些漂浮的活細(xì)胞。懸浮的活細(xì)胞可以通過離心后重新加入到培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)施戴。在復(fù)蘇后前二代 該細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)貼壁緩慢的情況反浓,是正常現(xiàn)象赞哗。松散的三維團(tuán)簇細(xì)胞慢慢會(huì)擴(kuò)散形成一個(gè) 扁平的單層細(xì)胞雷则。

細(xì)胞名稱:人乳腺癌細(xì)胞(STR鑒定正確)

細(xì)胞簡稱:MCF-7

產(chǎn)品貨號(hào):TCH-C247

種屬來源:

組織來源:乳腺

疾病特征:乳腺癌

細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

生長特性:貼壁生長

培養(yǎng)體系:MEM+10%FBS+1%Glutamax+1%NEAA+1% Sodium Pyruvate+10 μg/mL Human recombinant insulin+1%P/S

配套培養(yǎng)基貨號(hào):TCH-G247

傳代比例:1:3-1:6,每2-3天換液一次

傳代周期:48-72 h

培養(yǎng)條件:氣相:95%空氣+5%CO2肪笋,溫度:37℃

凍存條件:60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO月劈,液氮儲(chǔ)存

質(zhì)量檢測:細(xì)菌、真菌藤乙、支原體檢測均為陰性

MCF-7細(xì)胞的傳代

1. 盡量吸干凈培養(yǎng)瓶瓶或培養(yǎng)皿原培養(yǎng)基猜揪;

2. 加2-3ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞,吸走潤洗的PBS坛梁;

3. 培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中加適量胰酶使其正好鋪勻瓶底湿右;例如:10cm培養(yǎng)皿一般加入2ml 胰酶,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層罚勾;

4. 將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化棒拂;

5. 消化到細(xì)胞間隙變大诗舰,但未完全脫落時(shí)加入為胰酶2倍體積完全培養(yǎng)基終止胰酶消化;

6. 混勻細(xì)胞,貼壁細(xì)胞1100rpm離心4min缰冤,棄上清;

7. 加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞怒详,均勻分到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿里疗绣;

8. 補(bǔ)足完全培養(yǎng)基,將細(xì)胞放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng).

?著作權(quán)歸作者所有,轉(zhuǎn)載或內(nèi)容合作請聯(lián)系作者
  • 序言:七十年代末器躏,一起剝皮案震驚了整個(gè)濱河市俐载,隨后出現(xiàn)的幾起案子,更是在濱河造成了極大的恐慌登失,老刑警劉巖遏佣,帶你破解...
    沈念sama閱讀 206,013評論 6 481
  • 序言:濱河連續(xù)發(fā)生了三起死亡事件,死亡現(xiàn)場離奇詭異揽浙,居然都是意外死亡状婶,警方通過查閱死者的電腦和手機(jī),發(fā)現(xiàn)死者居然都...
    沈念sama閱讀 88,205評論 2 382
  • 文/潘曉璐 我一進(jìn)店門馅巷,熙熙樓的掌柜王于貴愁眉苦臉地迎上來膛虫,“玉大人,你說我怎么就攤上這事钓猬∩缘叮” “怎么了?”我有些...
    開封第一講書人閱讀 152,370評論 0 342
  • 文/不壞的土叔 我叫張陵敞曹,是天一觀的道長账月。 經(jīng)常有香客問我,道長异雁,這世上最難降的妖魔是什么捶障? 我笑而不...
    開封第一講書人閱讀 55,168評論 1 278
  • 正文 為了忘掉前任,我火速辦了婚禮纲刀,結(jié)果婚禮上项炼,老公的妹妹穿的比我還像新娘。我一直安慰自己示绊,他們只是感情好锭部,可當(dāng)我...
    茶點(diǎn)故事閱讀 64,153評論 5 371
  • 文/花漫 我一把揭開白布。 她就那樣靜靜地躺著面褐,像睡著了一般拌禾。 火紅的嫁衣襯著肌膚如雪。 梳的紋絲不亂的頭發(fā)上展哭,一...
    開封第一講書人閱讀 48,954評論 1 283
  • 那天湃窍,我揣著相機(jī)與錄音闻蛀,去河邊找鬼。 笑死您市,一個(gè)胖子當(dāng)著我的面吹牛觉痛,可吹牛的內(nèi)容都是我干的。 我是一名探鬼主播茵休,決...
    沈念sama閱讀 38,271評論 3 399
  • 文/蒼蘭香墨 我猛地睜開眼薪棒,長吁一口氣:“原來是場噩夢啊……” “哼!你這毒婦竟也來了榕莺?” 一聲冷哼從身側(cè)響起俐芯,我...
    開封第一講書人閱讀 36,916評論 0 259
  • 序言:老撾萬榮一對情侶失蹤,失蹤者是張志新(化名)和其女友劉穎钉鸯,沒想到半個(gè)月后吧史,有當(dāng)?shù)厝嗽跇淞掷锇l(fā)現(xiàn)了一具尸體,經(jīng)...
    沈念sama閱讀 43,382評論 1 300
  • 正文 獨(dú)居荒郊野嶺守林人離奇死亡亏拉,尸身上長有42處帶血的膿包…… 初始之章·張勛 以下內(nèi)容為張勛視角 年9月15日...
    茶點(diǎn)故事閱讀 35,877評論 2 323
  • 正文 我和宋清朗相戀三年扣蜻,在試婚紗的時(shí)候發(fā)現(xiàn)自己被綠了。 大學(xué)時(shí)的朋友給我發(fā)了我未婚夫和他白月光在一起吃飯的照片及塘。...
    茶點(diǎn)故事閱讀 37,989評論 1 333
  • 序言:一個(gè)原本活蹦亂跳的男人離奇死亡莽使,死狀恐怖,靈堂內(nèi)的尸體忽然破棺而出笙僚,到底是詐尸還是另有隱情芳肌,我是刑警寧澤,帶...
    沈念sama閱讀 33,624評論 4 322
  • 正文 年R本政府宣布肋层,位于F島的核電站亿笤,受9級(jí)特大地震影響,放射性物質(zhì)發(fā)生泄漏栋猖。R本人自食惡果不足惜净薛,卻給世界環(huán)境...
    茶點(diǎn)故事閱讀 39,209評論 3 307
  • 文/蒙蒙 一、第九天 我趴在偏房一處隱蔽的房頂上張望蒲拉。 院中可真熱鬧肃拜,春花似錦、人聲如沸雌团。這莊子的主人今日做“春日...
    開封第一講書人閱讀 30,199評論 0 19
  • 文/蒼蘭香墨 我抬頭看了看天上的太陽锦援。三九已至猛蔽,卻和暖如春,著一層夾襖步出監(jiān)牢的瞬間,已是汗流浹背曼库。 一陣腳步聲響...
    開封第一講書人閱讀 31,418評論 1 260
  • 我被黑心中介騙來泰國打工区岗, 沒想到剛下飛機(jī)就差點(diǎn)兒被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留,地道東北人凉泄。 一個(gè)月前我還...
    沈念sama閱讀 45,401評論 2 352
  • 正文 我出身青樓躏尉,卻偏偏與公主長得像,于是被迫代替她去往敵國和親后众。 傳聞我的和親對象是個(gè)殘疾皇子,可洞房花燭夜當(dāng)晚...
    茶點(diǎn)故事閱讀 42,700評論 2 345

推薦閱讀更多精彩內(nèi)容