最近開始做實驗了熬荆，還是要好好記錄舟山，好記性不如爛筆頭～
以前沒有養(yǎng)過細胞，唯一接觸過的細胞是爪蟾卵母細胞，但它又不能傳代累盗，每次用每次從爪蟾肚子里取寒矿。注射完cRNA后，17度培養(yǎng)3天就用來做實驗了若债。
每兩天傳代一次
C6/36, Aag2, NPC四天一傳
擴毒的C6/36細胞通常培養(yǎng)六天
現(xiàn)在實驗室會用到的細胞：血清10%
NPC?
SHSY? DMEM/F12培養(yǎng)基??
BHK? 用于空斑實驗 DMEM培養(yǎng)基? 37度培養(yǎng) 通常1傳5
C6/36? 1640培養(yǎng)基 30度培養(yǎng)? 不需要CO2
Aag2? ?SDrosophila培養(yǎng)基? ?30度培養(yǎng) 不需要CO2
RD? ? MEM培養(yǎng)基? ?37度培養(yǎng)
Vero? ??MEM培養(yǎng)基?其一用PBS洗細胞三次以后符相，將胰酶加入培養(yǎng)瓶，10秒左右去掉胰酶蠢琳，放入37℃培養(yǎng)箱消化啊终，每隔10秒左右輕輕晃動培養(yǎng)瓶，直到觀察到有流沙狀細胞滑動傲须。其二是用PBS洗細胞三次以后孕索，將胰酶加入培養(yǎng)瓶，一分鐘以后倒置躏碳，將有細胞的面朝上，然后輕輕拍打散怖，使細胞脫落菇绵。這兩個小tips都很適用的，因為相對于拍打和37℃消化而言镇眷，胰酶消化的時間過長咬最，后者引起的細胞傷害更嚴重。當然除此之外欠动，養(yǎng)Vero細胞和普通細胞一樣：要注意無菌操作永乌、不要看細胞太勤、注意輕拿輕放具伍、傳一瓶拿一瓶翅雏、讓細胞盡可能多的享受自己最適的生活環(huán)境。做到這些人芽，你的細胞養(yǎng)不好都難望几。
NPC? 懸浮 接毒前NeurCult-XF培養(yǎng)基（05760）+Matrgel (1:100) 傳到板子上，使其貼壁
? ? ? ? ? ? 配培養(yǎng)基要加 rhEGF(到200ng/ml) rhFGF(到20ng/ml) Hepran (2mg/ml)
293T??生長快萤厅，通常倍增時間不到一天橄抹。每3~4 天1：10至1：20稀釋，5% CO2條件下培養(yǎng)惕味。細胞貼壁疏松楼誓，可只用EDTA消化，不要用胰蛋白酶過度消化名挥。
?常用的培養(yǎng)基有哪些疟羹？
MEM（Minimum Essential Medium）: 也稱最低必須培養(yǎng)基，它僅含有12種必須氨基酸、谷氨酰胺和8種維生素阁猜⊥枰荩可以廣泛應用到各種細胞培養(yǎng)。
DMEM：分為高糖和低糖剃袍，碳酸氫鈉緩沖體系黄刚，所以需要CO2。
高糖的適合于高密度懸浮細胞培養(yǎng)民效，適用于附著性較差憔维，但又不希望它脫離原來生長點的細胞。 低糖的適合于生長速度較快畏邢，附著性較差的腫瘤細胞培養(yǎng)业扒。
DMEM/F12：F12 培養(yǎng)基成分復雜，含有多種微量元素舒萎，和DMEM以1：1結(jié)合程储，稱為DMEM/F12培養(yǎng)基（DME/F12medium），作為開發(fā)無血清配方的基礎(chǔ)臂寝，以利用F12含有較豐富成分和DMEM含有較高濃度的營養(yǎng)成分為優(yōu)點章鲤。該培養(yǎng)基適用于血清含量較條件下哺乳動物細胞培養(yǎng)。
RPMI-1640：主要用于懸浮細胞培養(yǎng)咆贬，廣泛用于哺乳物败徊，特殊造血細胞，正程投校或者惡性增生的白細胞皱蹦，雜交瘤細胞。 另外K-562眷蜈， L-60沪哺、urkat、IM-9 等淋巴細胞酌儒、T細胞淋巴瘤細胞也可以使用凤粗。
McCoy’s 5A: 主要用于肉瘤細胞的培養(yǎng)， 還可以用于骨髓今豆、皮膚嫌拣、肺等原代培養(yǎng)，用于作組織活檢培養(yǎng)呆躲、一些淋巴細胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細胞的生長支持异逐。比如HT29，BHL100等上皮細胞插掂。
IMDM（Iscove’s Modified Dulbecco Medium）：主要用于紅細胞和巨噬細胞前體培養(yǎng)灰瞻。培養(yǎng)液中含有微量元素硒以及額外的氨基酸和維生素腥例、丙酮酸鈉以及HEPES。
M199 Medium是具有確定化學成分的細胞培養(yǎng)液酝润，主要用于雞胚成纖維細胞培養(yǎng)燎竖，培養(yǎng)時必須輔助血清才能長期培養(yǎng)。
L-15(Leibovitz Medium)?適用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細胞株要销，用于快速增值瘤細胞的培養(yǎng)构回。
Ham’s F-10: 適用于小鼠細胞以及人的二倍體細胞的培養(yǎng)
Ham’s F-12: 適用于單細胞培養(yǎng)或者克隆培養(yǎng)， 是無血清培養(yǎng)基中常用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基疏咐。
MCDB131： 適用于培養(yǎng)內(nèi)皮細胞纤掸。
Opti-MEM I Reduced Serum Media: 適用于培養(yǎng)造血細胞。
