- 數(shù)據(jù)準(zhǔn)備
如果使用在線的Gene sets database,則只需要準(zhǔn)備Expression dataset文件(.txt)罗捎,Expression dataset annotation文件(.cls)讥耗,如果使用本地的Gene sets database枪蘑,則需要提前將database文件(.gmt)下載到本地熙宇。
Expression dataset文件:即基因表達(dá)矩陣围段,主要包括基因名亏栈,樣本名台腥,表達(dá)值
Expression dataset annotation文件:即用于標(biāo)注Expression dataset的樣本數(shù)量,分組信息等注釋信息的文件绒北,主要包含3行黎侈,第一行為三列,第一列表示樣本數(shù)量闷游,第二列為分成多少個組峻汉,第三列為一個固定的數(shù)值1,第二行為分組標(biāo)識脐往,以#開頭休吠,然后是各個分組的組名,第三列為每個樣本所屬的組业簿,順序與Expression dataset文件中的樣本的順序相同
Gene sets database文件:即用于進(jìn)行富集的注釋數(shù)據(jù)庫文件瘤礁,一般是在http://www.gsea-msigdb.org/gsea/downloads.jsp網(wǎng)站下載文件,網(wǎng)站對每個數(shù)據(jù)庫文件都有相應(yīng)的簡單解釋介紹梅尤,用戶可以根據(jù)自己的需求進(jìn)行下載
用戶也可以根據(jù)自己的需求自己準(zhǔn)備database 文件柜思,該文件主要包含兩個信息,第一列為通路的名稱巷燥,第二列為任意字符赡盘,第三列至結(jié)束列為該通路所包含的基因(至少為1列,也就是說至少包含一個基因)
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加載數(shù)據(jù)
打開GSEA –> 點擊Load data –> 選擇需要加載的文件(使用在線的Gene sets database則只需要加載Gene expression文件和注釋的cls文件缰揪,如果使用本地的database文件陨享,則需要加載本地的gmt文件) –> 打開文件沒有錯誤則加載完成
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Run GSEA
在線選擇Gene sets database:
使用本地Gene sets database:
Run:
等待計算完成:
輸出目錄設(shè)置:此處可以自行設(shè)置結(jié)果輸出的工作目錄
設(shè)置輸出多少張圖:
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查看結(jié)果
打開保存結(jié)果的目錄,找到index.html文件,打開文件就可以查看自己的GSEA所有結(jié)果:
點擊Details可以查看每條通路的具體信息霉咨,并選擇合適自己研究目的條目進(jìn)行展示:
GSEA分析
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