前言: 大家都知道CRISPR-Cas9有脫靶效應(yīng)能真,并且每個(gè)sgRNA的效率都不一樣的葵诈,因此在做正式實(shí)驗(yàn)之前,我們要驗(yàn)證sgRNA的效率,之后優(yōu)中選優(yōu)矛双。還是那句話,同樣的目的...

前言: 大家都知道CRISPR-Cas9有脫靶效應(yīng)能真,并且每個(gè)sgRNA的效率都不一樣的葵诈,因此在做正式實(shí)驗(yàn)之前,我們要驗(yàn)證sgRNA的效率,之后優(yōu)中選優(yōu)矛双。還是那句話,同樣的目的...
師姐你好,我在做病毒基因敲除讼渊,設(shè)計(jì)了三對(duì)gRNA,分別做質(zhì)粒的單轉(zhuǎn)染和雙轉(zhuǎn)染尊剔,細(xì)胞是293T爪幻,轉(zhuǎn)染效率ok,提病毒DNA赋兵,設(shè)計(jì)引物鑒定笔咽,沒(méi)敲掉的應(yīng)該全長(zhǎng)500bp,雙質(zhì)粒轉(zhuǎn)染敲掉的應(yīng)該全長(zhǎng)300-400bp霹期。這種情況下我是直接PCR后跑膠叶组,但是全部孔只有500bp處有條帶,沒(méi)有敲掉的历造。我需要做T7E1錯(cuò)配實(shí)驗(yàn)來(lái)驗(yàn)證嗎甩十,條帶大小有差異可以只PCR跑膠嗎?現(xiàn)在是不確定我沒(méi)敲掉還是我的驗(yàn)證方法有問(wèn)題吭产。盼復(fù)侣监!
CRISPR-Cas9基因編輯5--不可或缺的sgRNA活性預(yù)實(shí)驗(yàn)前言: 大家都知道CRISPR-Cas9有脫靶效應(yīng),并且每個(gè)sgRNA的效率都不一樣的臣淤,因此在做正式實(shí)驗(yàn)之前橄霉,我們要驗(yàn)證sgRNA的效率,之后優(yōu)中選優(yōu)邑蒋。還是那句話姓蜂,同樣的目的...