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設(shè)計(jì)原則:(如果沒得選甥捺,這些原則也可適當(dāng)放寬) 獲取基因fasta文件 在NCBI-PMC-Gene搜索框Home - Gene - NCBI[...
分步PCR的優(yōu)點(diǎn):對(duì)酶切位點(diǎn)沒有嚴(yán)格的限制 缺點(diǎn):非常容易產(chǎn)生突變,尤其是coincide的部位 以一個(gè)長(zhǎng)達(dá)6800bp的目的基因AFAP1-A...
我們?cè)跇?gòu)建一些大的基因片段時(shí)镀层,由于基因片段過大镰禾,會(huì)導(dǎo)致單純做PCR擴(kuò)增時(shí)沒法擴(kuò)增出全長(zhǎng)來。因此需要對(duì)基因做分段唱逢,PCR處理吴侦,這種情況有兩種常用方...
要進(jìn)行shRNA載體構(gòu)建,首先需要根據(jù)自己的基因坞古,設(shè)計(jì)出對(duì)應(yīng)的靶點(diǎn)备韧、loop序列,酶切位點(diǎn)序列痪枫,詳見LncRNA的shRNA慢病毒載體引物設(shè)計(jì) ...
本文將介紹骨架載體+目的基因序列合成方法 在合成之前织堂,應(yīng)該先確定骨架載體backbone+基因序列。其中奶陈,骨架載體是根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)需要來決定易阳。 ...
構(gòu)建 lncRNA 過表達(dá)質(zhì)粒或者慢病毒吃粒、腺病毒包裝載體潦俺。原則上是將全長(zhǎng)lncRNA 定向克隆到表達(dá)載體上實(shí)現(xiàn) lncRNA 的過表達(dá)。然而有些...
shRNA:小發(fā)卡或短發(fā)卡RNA(a small hairpin RNA or short hairpin RNA,shRNA)是一段具有緊密發(fā)...