1. 什么是 MSI/MMR 匙握？

微衛(wèi)星（microsatellite, MS）艾疟，又稱為短串聯(lián)重復(fù)序列（short tandem repeats速那，STR）押框，是指細胞基因組中以少數(shù)幾個核苷酸(多為1~6個)為單位串聯(lián)重復(fù)的DNA序列岔绸。

1.1. MSI ：「微衛(wèi)星不穩(wěn)定性」

? 定義：指與正常組織相比，在腫瘤中某一微衛(wèi)星由于重復(fù)單位的插入或缺失而造成的微衛(wèi)星長度的任何改變橡伞，出現(xiàn)新的微衛(wèi)星等位基因的現(xiàn)象盒揉，最常見的是 GT/CA 重復(fù)。
? 分類：MSI分為高度不穩(wěn)定（MSI-H）兑徘、低度不穩(wěn)定（MSI-L）和穩(wěn)定（MS-S）
? 臨床意義：
1）MSI與結(jié)腸癌刚盈、胃癌、子宮內(nèi)膜癌挂脑、卵巢癌藕漱、肝膽道癌、尿路癌崭闲、腦癌和皮膚癌有關(guān)肋联，其中與結(jié)腸癌的關(guān)聯(lián)最為普遍
2）患有 MSI 的結(jié)直腸腫瘤發(fā)現(xiàn)于右結(jié)腸，與分化差的組織刁俭、高粘蛋白原牺蹄、腫瘤浸潤淋巴細胞以及克羅恩病樣宿主反應(yīng)的存在相關(guān)。導(dǎo)致結(jié)直腸癌的 MSI-H 腫瘤比其他衍生結(jié)直腸癌表現(xiàn)出更少的轉(zhuǎn)移（在 II 期癌癥中比 III 期癌癥更具代表性）薄翅。

1.2. MMR ：「錯配修復(fù)」

? 定義：是一種識別和修復(fù)DNA復(fù)制和重組過程中可能出現(xiàn)的錯誤插入沙兰，缺失和錯配堿基的系統(tǒng)氓奈，也可以修復(fù)某些形式的DNA損傷。錯配修復(fù)的過程需要區(qū)分母鏈和子鏈鼎天，做到只切除子鏈上錯誤的核苷酸舀奶，而不會切除母鏈上本來就正常的核苷酸。
? 組成：MMR系統(tǒng)在參與DNA修復(fù)時可涉及到多個錯配修復(fù)蛋白斋射，包括MutS（MSH2育勺、MSH3和MSH6等）和MutL（MLH1、MLH3罗岖、PMS1和 PMS2）兩大家族涧至。其中，MLH1桑包、MSH2南蓬、MSH6及PMS2是MMR的主導(dǎo)蛋白。
? 分類：
1）錯配修復(fù)功能缺陷（Mismatch Repair Deficiency哑了，dMMR）：MMR缺陷赘方，即DNA錯配修復(fù)功能缺陷，MMR蛋白表達陰性弱左。任一MMR基因功能缺陷均可導(dǎo)致dMMR窄陡。
2）錯配修復(fù)功能完整（Mismatch Repair Proficient，pMMR）：MMR完整拆火，即DNA錯配修復(fù)功能正常跳夭，MMR蛋白表達陽性。

1.3. MSI與MMR的關(guān)系

? MSI多由MMR蛋白表達缺失導(dǎo)致的MMR功能缺陷所致们镜，可以通過檢測MMR蛋白缺失來反映MSI狀態(tài)
? 一般而言币叹，dMMR相當于MSI-H表型，pMMR相當于MSI-L/MSS表型憎账。
? MMR與MSI檢測不一致情況主要有以下兩種類型：
1）dMMR vs MSS套硼，其發(fā)生的原因可能為：
① 某些MMR蛋白的缺失，被功能代償胞皱，常見的補償機制為PMS2和PMS1互補邪意，MSH6和MSH3互補
② MLH1啟動子甲基化導(dǎo)致的腫瘤異質(zhì)性（MLH1蛋白缺失但MSS），從而影響結(jié)果判斷
③ 新輔助治療導(dǎo)致的MSH6表達缺失或PMS2表達較弱

2） pMMR vs MSI-H反砌，其發(fā)生的原因可能為：
① 某些MMR蛋白發(fā)生錯義突變雾鬼，但仍存在相應(yīng)抗原而被IHC檢測所識別為正常表達。但實際上蛋白功能已經(jīng)喪失宴树，導(dǎo)致錯配修復(fù)功能的缺陷策菜，已經(jīng)導(dǎo)致發(fā)生MSI。即pMMR假陽性。
② 由四種基因以外的其他基因引起的MSI又憨，如POLE翠霍、POLD。

MSI:MMR-1

2. MSI/MMR 的檢測方法

目前臨床上主要采用兩種方法檢測 MSI/MMR：免疫組織化學(xué)法 (immunohistochemistry, IHC) 檢測 MMR 異常蛋白蠢莺，或聚合酶鏈式反應(yīng) (polymerase chain reaction, PCR) 檢測 MSI寒匙。二代測序 (next generation sequencing，NGS）是近年來出現(xiàn)的新的檢測方法躏将。

2.1. 免疫組織化學(xué)法（IHC法）

IHC 染色分析 MMR 蛋白表達是最常用的方法锄弱，它主要是檢測 4 個已知 MMR 蛋白（MLH1、MSH2祸憋、MSH6 和 PMS2）会宪，陽性表達定位于胞核：
? 如果 4 個蛋白中 ≥ 1 個不表達，腫瘤可能為 MSI-H蚯窥；
? 所有 4 個蛋白表達均陽性為 pMMR（錯配修復(fù)功能完整）掸鹅。
優(yōu)缺點：IHC 便宜易行，但是有可能漏掉一些其他 MMR 蛋白引起的異常沟沙，而且由于腫瘤的異質(zhì)性河劝，整個腫瘤的評分有可能不一致壁榕。

2.2. PCR毛細管電泳法

PCR 通常對2個單核苷酸位點（BAT-25和BAT-26）和3個雙核苷酸位點（D2S123矛紫、D5S346 和 D17S250）位點進行檢測，也被稱作「2B3D NCI Panel」牌里。
? MSI 超過 30%（5 個位點中 2 個以上）為 MSI-H颊咬；
? 少于 30%（1 個位點）考慮為微衛(wèi)星低度不穩(wěn)定（MSI-L）；
? 沒有不穩(wěn)定則為微衛(wèi)星穩(wěn)定（microsatellite stability, MSS牡辽。
優(yōu)缺點：能夠更客觀地評估功能性 dMMR 活性喳篇，但是對實驗室條件要求高，價格相對昂貴态辛。

★ 總的來說麸澜，IHC 和 PCR 法檢測 MSI/MMR 的敏感性和特異性都很好，dMMR與MSI-H(高度微衛(wèi)星不穩(wěn)定)表型相當奏黑，pMMR與MSI-L/MSS(低度微衛(wèi)星不穩(wěn)定/微衛(wèi)星穩(wěn)定)表型相當炊邦。IHC-MMR和PCR-MSI檢測結(jié)果符合率可達90％以上。

2.3 NGS

? 近年來 熟史，二代測序平臺目標區(qū)域測序（NGS panel）馁害、全外顯子組測序（WES）、全基因組測序（WGS）開始應(yīng)用于 MSI 檢測蹂匹。
? NGS 適用于需要同時檢測腫瘤驅(qū)動基因和（或）治療相關(guān)基因變異的患者碘菜。