18年發(fā)表在gut上 (IF: 31.793) 的文章
1. Preoperative NLR correlates with survival following PDAC resection
Fig 1a：使用standard ROC analysis分析械筛，確定了optimal NLR cut-off是2.1捎泻。根據(jù)這個(gè)標(biāo)準(zhǔn)將病人區(qū)分為high (>2.1, n=286) 和 low (≤2.1, n=153)隊(duì)列。在PDAC切除術(shù)后埋哟，high NLR的5-year survival是17.3%笆豁，low NLR則是26.5%。
ROC找cutoff值參考：
2. Neutrophils expressing CXCR2 are elevated in the blood and bone marrow of patients with human PDAC
Fig 1b：流式結(jié)果顯示PDAC患者外周血和骨髓的CXCR2中性粒都顯著增加赤赊。
CD15抗原也稱X-半抗原闯狱，存在于包括嗜中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞在內(nèi)的90%以上的粒細(xì)胞中，少部分存在于單核細(xì)胞中抛计。[在幾乎所有的慢性髓性白血埠骞隆（CML）CD15陽性，急性淋巴細(xì)胞白血泊到亍（ALL）極少表達(dá)瘦陈。R-S細(xì)胞和單核霍奇金細(xì)胞中，80%的經(jīng)典型霍奇金淋巴瘤CD15陽性表達(dá)波俄。該抗體主要用于霍奇金淋巴瘤和粒細(xì)胞肉瘤的診斷晨逝。]
Fig 1c, d：存活期>1年的患者比存活期<1年的患者，血和骨髓CXCR2+中性粒都顯著更高懦铺，且血和骨髓CXCR2+中性粒百分比與患者存活時(shí)間呈負(fù)相關(guān)捉貌。
3. Increased expression of ELR+ chemokines correlates with the prevalence of tumour-infiltrating CXCR2+ TAN
Fig 2a：和此前的報(bào)道一致，作者發(fā)現(xiàn)和其他腫瘤相比阀趴，人PDAC腫瘤高表達(dá)GM-CSF 和 G-CSF, 而不是 M-CSF昏翰。
Fig 2b：和正常組織相比，人PDAC腫瘤的ELR+趨化因子CXCL1, CXCL2, CXCL5 和 CXCL8也顯著升高刘急。
ELR+趨化因子參考：生長調(diào)節(jié)致癌基因GRO
Fig 2c：免疫熒光結(jié)果顯示棚菊，CXCL1, CXCL2, CXCL5 和 CXCL8的來源主要是neoplastic ductal cells而不是基質(zhì)細(xì)胞。
Fig 2d, e：c圖顯示在這幾個(gè)ELR+趨化因子中叔汁，CXCL5的fold change是最大的统求。而且這個(gè)基因的表達(dá)強(qiáng)度與CD15+ TAN和NE+ TAN都有很強(qiáng)的正相關(guān)。
Overall, this suggests that PDAC expression of ELR+ chemokines, in particular CXCL5, may be important in facilitating recruitment of CXCR2+ neutrophils.
4. PDAC tumours are infiltrated by CXCR2+ TAN with prognostic implications in human disease
Fig 2f：和正常胰腺相比据块，PDAC胰腺中CXCR2+ TAN顯著增加码邻。
Fig 2g：和外周血具有診斷意義的NLR一致，作者發(fā)現(xiàn)胰腺中低/中/高CD15+ TAN和CD8+淋巴細(xì)胞比值的中位存活期分別是2另假，1.5和1像屋。
Fig 2h, i：高NE/CD8和CXCL5/CD8比值也與不良預(yù)后相關(guān)。
In summary, this suggests that the CXCR2+ TAN are a predominant immune infiltrate and have clinical significance in PDAC.
5. CXCR2 inhibition sequesters neutrophils in the blood and prevents TAN accumulation in orthotopic PDAC tumours
在發(fā)現(xiàn)了CXCR2 中性粒的增加后边篮，作者在荷瘤小鼠上做了治療己莺。
Fig 3a, b：和正常胰腺相比奏甫，orthotopically implanted, syngenic KCKO pancreatic tumours（小鼠模型）存在GM-CSF, G-CSF 和 CXCR2 配體 CXCL1, CXCL2 和 CXCL5的高表達(dá)。（和前面Fig2 f, g中人的PDAC一致）
Fig 3c：荷瘤小鼠外周血和骨髓中CXCR2中性粒都顯著增加凌受。CXCRi治療增加了外周血中性粒的絕對(duì)值阵子，骨髓則沒有顯著變化（另外一個(gè)藥物FOLFIRINOX也是一樣的效果），提示外周粒細(xì)胞向組織局部的遷移下降胜蛉。
Fig 3d：primary tumour的特征是存在大量的Ly6G+細(xì)胞挠进，給了CXCRi治療治療之后顯著改善。
Fig 3e：靶向CXCR2+ TAN之后誊册，皮下KCKO tumour progression顯著下降领突，腫瘤size減小。
Fig 3f：為了證實(shí)這些發(fā)現(xiàn)解虱，作者檢測了來自KPC基因工程模型的另一個(gè)同源PDAC細(xì)胞系的原位腫瘤(p48CRE/LSL-KrasG12D/p53flox/flox)攘须，發(fā)現(xiàn)CXCR2i也阻止了模型中TAN的積累
Collectively, this suggests that CXCR2 blockade prevents neutrophil trafficking from the blood, reducing TAN with similar therapeutic efficacy to systemic depletion.
6. targeting a myeloid subset results in tumour compensatory recruitment of alternative bone marrow-derived cell populations
Fig 4a：此前的研究顯示，在小鼠模型中殴泰，靶向CCR2治療PDAC會(huì)出現(xiàn)Neutrophil substitution于宙。因此作者檢測了給予CCR2i治療患者的胰腺活檢樣本，發(fā)現(xiàn)CXCR2+細(xì)胞增加悍汛。
Fig 4b：小鼠實(shí)驗(yàn)也是一樣的結(jié)果
Fig 4c, d：作者在荷瘤的CCR2-/-鼠和荷瘤的CCR2i處理的野生鼠中捞魁，25天后對(duì)腫瘤組織行流式發(fā)現(xiàn)CXCR2+TAM代償性替代，這一現(xiàn)象也發(fā)生在聯(lián)合FOLFIRINOX化療中（圖B,C）离咐。單獨(dú)靶向CCR治療谱俭，TAM升高；單獨(dú)靶向TAM治療宵蛀，TAN升高昆著；兩者同時(shí)抑制，TAN和TAM均降低术陶，且在聯(lián)合FOLFIRINOX化療中效果一致凑懂。
這一現(xiàn)象的一種可能解釋是觀察到與TAM的產(chǎn)生和招募相關(guān)的因素，即CSF1和CCL2梧宫，在阻斷CXCR2+ TAN后有所增加接谨。同樣，CCR2i導(dǎo)致CXCL1塘匣、CXCL2脓豪、CXLC5和G-CSF表達(dá)增加。
Fig 4e：隨之作者通過流式分析評(píng)估總腫瘤浸潤骨髓情況忌卤，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合CCR2i + CXCR2i抑制治療扫夜，或者單獨(dú)CCR2i或者 CXCR2i 聯(lián)合FOLFIRINOX治療，都能防止這種代償作用并減少腫瘤浸潤骨髓細(xì)胞。
7. combined CCR2 plus CXCR2 blockade enhances chemotherapeutic efficacy and improves survival in tumour- bearing mice
Fig 4f：然后作者在構(gòu)建的荷瘤鼠模型中历谍，分別進(jìn)行抑制實(shí)驗(yàn)现拒。發(fā)現(xiàn)CCR2 + CXCR2聯(lián)合阻滯劑可提高腫瘤小鼠的化療療效并提高生存率，而CCR2i和CXCR2i作為單一藥物有效降低了既定的原位腫瘤重量和體積望侈。即使用CCR2 + CXCR2阻滯劑可顯著降低KCKO腫瘤，聯(lián)合FOLFIRINOX化療方案可以增加腫瘤對(duì)化療的敏感性勋桶。
Fig 4g：最后表明FOLFIRINOX聯(lián)合髓系抑制對(duì)生存期的影響脱衙。當(dāng)髓系抑制與FOLFIRINOX聯(lián)合使用時(shí)，腫瘤負(fù)擔(dān)的減輕會(huì)增強(qiáng)例驹。FOLFIRINOX聯(lián)合CCR2i或CXCR2i進(jìn)一步提高了KPC基因工程模型的原位腫瘤小鼠的存活率捐韩。此外，與任何一種聯(lián)合相比鹃锈，F(xiàn)OLFIRINOX雙重CCR2 + CXCR2阻斷對(duì)提高生存率最多荤胁。
總的來說，這表明屎债，與單獨(dú)使用的兩種策略相比仅政，同時(shí)使用CCR2和CXCR2靶向骨髓細(xì)胞募集可以提高化療反應(yīng)敏感性。
8. reduction of tumour-infiltrating myeloids increases effector T cells in PDAC-bearing mice
Fig 5a ,b：先作者在構(gòu)建的腫瘤小鼠模型中說明靶向治療對(duì)CD8+和CD4+ TIL的影響盆驹。通過靶向抑制CCR2或者CXCR2 25天后圆丹，對(duì)腫瘤組織行流式分析，發(fā)現(xiàn)腫瘤浸潤髓樣的減少卻增加了小鼠的效應(yīng)T細(xì)胞的量躯喇，聯(lián)合抑制與單獨(dú)抑制相比CD8+和CD4+ TIL的流入明顯更大辫封，當(dāng)與FOLFIRINOX聯(lián)合測試時(shí)也發(fā)現(xiàn)了這一點(diǎn)。
Fig 5c：隨后作者檢測了靶向治療后CD4+亞群的變化廉丽。在原位移植腫瘤小鼠中倦微，治療25天后，流式分析顯示CCR2i或CXCR2i單獨(dú)抑制時(shí)CD4+TIL細(xì)胞百分比明顯減低正压，聯(lián)合抑制時(shí)欣福，沒有更進(jìn)一步的變化，在聯(lián)合FOLFIRINOX治療時(shí)出現(xiàn)一致的結(jié)果蔑匣。
Fig 5d ,e：接下來,作者評(píng)估IFNγ+CD8+TIL及激活狀態(tài)的C8+細(xì)胞在靶向治療后變化劣欢。荷瘤小鼠不同靶向處理25天后，腫瘤組織流式分析顯示細(xì)胞內(nèi)IFNγ增加裁良，CD8+TIL細(xì)胞表面表達(dá)的CD44+ 凿将、CD69+、CD62L標(biāo)記物增加 价脾。且聯(lián)合靶向治療后增加更多牧抵，尤其是激活狀態(tài)的CD8+TIL細(xì)胞。
Fig 5f：然后為了證實(shí)這種激活狀態(tài)CD8+TIL的增加反映了T細(xì)胞受體(TCR)對(duì)抗原的識(shí)別，作者接下來檢測了Nur77GFP小鼠從PDAC腫瘤中提取的CD8+淋巴細(xì)胞中綠色熒光蛋白(GFP)的表達(dá)犀变，該表達(dá)在TCR刺激后上調(diào)妹孙。
抑制了介導(dǎo)免疫抑制的髓系細(xì)胞，腫瘤殺傷性的CD8T增加了获枝，很有意義啊
總的來說蠢正，這些結(jié)果表明腫瘤浸潤髓細(xì)胞的減少和效應(yīng)因子的流入，靶向雙趨化因子受體抑制可能是增強(qiáng)PDAC化療反應(yīng)的理想治療策略省店。
9. Dual CCR2 plus CXCR2 blockade restores antitumour immunity in established PDAC tumours
Fig 5g：接下來作者在已建立的原位移植PDAC腫瘤中嚣崭，比較靶向治療對(duì)腫瘤的抑制情況。與對(duì)照組相比懦傍，CCR2i或CXCR2單獨(dú)靶向治療雹舀，腫瘤抑制率高，恢復(fù)了抗腫瘤免疫作用粗俱。然而说榆，同時(shí)靶向CCR2+ TAM和CXCR2+ TAN進(jìn)一步增加腫瘤抑制率，進(jìn)一步增強(qiáng)抗腫瘤免疫寸认，當(dāng)與FOLFIRINOX聯(lián)合使用時(shí)效果更好签财。
Fig 5h：然后作者對(duì)KCKO腫瘤鼠，聯(lián)合趨化因子阻斷與FOLFIRINOX 化療治療后25天废麻，檢測基因表達(dá)情況荠卷。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合治療后免疫抑制基因的表達(dá)減少與抗腫瘤免疫和細(xì)胞溶解性T細(xì)胞反應(yīng)相關(guān)的因素的增加相對(duì)應(yīng)烛愧。
Fig 5i：最后油宜，正如作者的結(jié)果所示，髓系阻滯后的抗腫瘤活性是通過適應(yīng)性免疫機(jī)制介導(dǎo)的怜姿，作者進(jìn)行了CD8耗竭實(shí)驗(yàn) 用IgG 做對(duì)照慎冤，結(jié)果表明，在缺乏CD8+淋巴細(xì)胞的情況下沧卢，髓系阻滯的治療效果消失蚁堤。
綜上所述，這些數(shù)據(jù)強(qiáng)調(diào)了骨髓來源的髓細(xì)胞在介導(dǎo)PDAC免疫逃避中的重要性但狭，并為同時(shí)靶向CCR2+ TAM和CXCR2+ TAN提供了臨床依據(jù)披诗。
