操作步驟
1. 請(qǐng)自行準(zhǔn)備：無(wú)水乙醇举庶、異丙醇执隧、1.5mL 滅菌潔凈離心管、10mL 滅菌潔凈離心管户侥、10mL 無(wú)菌注射器镀琉。
2. 取出洗滌液，按終濃度 70%的比例加入無(wú)水乙醇蕊唐，如 3mL 加入 7mL 無(wú)水乙醇屋摔；15mL 加入 35mL 無(wú)水乙醇，充分混勻替梨。
3. 取 10mL 滅菌潔凈離心管钓试，加入 2mL 尿液樣本、2mL 裂解液副瀑、4μLDNAConc.及 60μL 消化液弓熏，振蕩混勻，65℃水浴 15 分鐘糠睡。
4. 加入 5mL 異丙醇挽鞠，輕輕顛倒混勻，如有半透明懸浮物狈孔，不影響 DNA 的提取與后續(xù)實(shí)驗(yàn)信认。
5. 將富集吸附柱放在抽濾裝置上，再將 10mL 無(wú)菌注射器針筒插入富集吸附柱上端均抽，將上述溶液轉(zhuǎn)入針筒內(nèi)嫁赏，靜置 2 分鐘，真空抽濾至富集吸附柱內(nèi)液體剛剛抽濾完畢（約 2-10 分鐘油挥，注意不要抽濾太干潦蝇，太干不利于后續(xù)步驟開(kāi)展）款熬。
6. 向針筒內(nèi)加 1mL 洗滌液，靜置 2 分鐘护蝶，真空抽濾至富集吸附柱內(nèi)液體剛剛抽濾完畢（約 1-5 分鐘华烟，注意不要抽濾太干，太干不利于后續(xù)步驟開(kāi)展）持灰。
7. 向針筒內(nèi)加 0.5mL 洗滌液，抽濾 2 分鐘负饲。
8. 按每份樣本 30μL 取洗脫液（如 10 份提取樣本堤魁，即取 300μL 洗脫液），放置于滅菌 1.5mL 離心管返十，65℃預(yù)熱妥泉。
9. 將富集吸附柱放入收集管內(nèi)，12,000 rpm 常溫離心 2 分鐘洞坑，離去殘留的洗滌液盲链。
10. 取出富集吸附柱，放入新的 1.5mL 滅菌潔凈離心管內(nèi)迟杂，加入 30 μL 預(yù)熱的洗脫液刽沾，靜置 2 分鐘，12,000 rpm 常溫離心 2 分鐘排拷，收集 DNA溶液侧漓。提取的 DNA 即可用于下一步實(shí)驗(yàn)或-20℃保存。
特別說(shuō)明：?
1.本試劑盒配套 BIOG 真空核酸提取裝置使用监氢，可提取 2mL 之內(nèi)量的尿液 DNA布蔗，研究者可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇適當(dāng)量的樣本進(jìn)行提取，所用試劑需按比例調(diào)整浪腐。
2.洗滌液最好現(xiàn)用現(xiàn)配纵揍，按需計(jì)算用量后配制。加入乙醇后的洗滌液如使用不完议街，2-8℃密封保存不超過(guò) 1 周泽谨。
3.在裂解液剛剛抽濾完畢后，應(yīng)立即加入洗滌液傍睹，以防濾膜干燥隔盛。
4.裂解液、洗滌液含有刺激性化學(xué)物質(zhì)拾稳，操作過(guò)程請(qǐng)做好防護(hù)措施吮炕，避免直接接觸皮膚，防止吸入口鼻访得。如不慎沾染皮膚或眼睛龙亲，請(qǐng)立即用清水或生理鹽水沖洗陕凹。5.裂解液、洗滌液如有白色絮狀物析出屬正出現(xiàn)象杜耙，置于 37℃水浴中溶解即可。
