原理:CRISPR/Cas系統(tǒng)來(lái)源于微生物體內(nèi)的一種RNA指導(dǎo)的適應(yīng)性免疫系統(tǒng)描函,利用RNA來(lái)引導(dǎo)核酸酶與特定核酸序列相結(jié)合并且將它們切斷。當(dāng)病毒入侵細(xì)菌時(shí)冯凹,細(xì)菌能夠捕捉到外來(lái)遺傳物質(zhì)的片段并且將它們整合到自身基因組中的CRISPR序列中龟劲。CRISPR序列轉(zhuǎn)錄生成的crRNA能夠與Cas核酸酶相結(jié)合,通過(guò)與靶點(diǎn)核酸序列進(jìn)行堿基配對(duì)為Cas核酸酶提供結(jié)合特異性予借。Cas核酸酶和crRNA結(jié)合之后越平,能夠在細(xì)菌體內(nèi)起到監(jiān)控病毒入侵的作用,當(dāng)與crRNA匹配的遺傳片段再度出現(xiàn)時(shí)灵迫,Cas核酸酶能夠切斷這些遺傳片段秦叛,從而提供免疫保護(hù)作用。
應(yīng)用:1)動(dòng)物方向:實(shí)驗(yàn)用突變體編輯瀑粥;疾病診斷工具開(kāi)發(fā)挣跋;癌癥治療等;2)植物方面:植物材料突變體構(gòu)建狞换,縮短時(shí)間避咆;作物編輯等
2023年1月17日舟肉,清華劉俊杰團(tuán)隊(duì)在Cell Research(IF=46)發(fā)表題為“The compact Casπ (Cas12I) ‘bracelet’ provides a unique structural platform for DNA manipulation”的研究論文,該研究表明緊湊的Casπ (Cas12I)“手鐲”為DNA操作提供了一個(gè)獨(dú)特的結(jié)構(gòu)平臺(tái)主要成果:1)通過(guò)環(huán)境宏基因組發(fā)現(xiàn)一個(gè)新的微V型系統(tǒng)Cas12I查库,大小約為860aa度气;2)Cas12I和由tracrRNA和crRNA組成的大引導(dǎo)RNA (~170 nt)配合,在廣泛的生化條件下識(shí)別獨(dú)特的富含5 ' C的PAM用于DNA切割膨报,能在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中產(chǎn)生基因編輯磷籍;3)冷凍電鏡揭示了Cas12I的效應(yīng)子以3.4 ?分辨率環(huán)繞DNA目標(biāo)的“手鐲”結(jié)構(gòu),與Cas12和Cas9核酸酶的典型“雙瓣”結(jié)構(gòu)有很大不同大的引導(dǎo)作為效應(yīng)器組裝作為雙臂支架现柠。
小確幸:1)Cas12這一組的一般都以比較小著稱院领,但是效果一般都難考核;在設(shè)計(jì)gRNA時(shí)充分考察二級(jí)結(jié)構(gòu)可能會(huì)提高效率(一個(gè)師兄的經(jīng)驗(yàn)够吩,僅僅說(shuō)明個(gè)人想法)2)Cas12I一個(gè)可以試試的東西
個(gè)人分享:熬到1月19日終于踏上回家路途比然,喜憂參半,好多實(shí)驗(yàn)有了新想法但是沒(méi)時(shí)間了周循,回家總是開(kāi)心的强法。
1月18日-1月19日時(shí)間過(guò)得太快了,還沒(méi)好好擁抱湾笛,還沒(méi)好好做實(shí)驗(yàn)饮怯,時(shí)間就一溜煙過(guò)去了,還是要每日都加油的嚎研”褪看到很多優(yōu)秀的東西:當(dāng)你學(xué)會(huì)愛(ài)自己,其他人的看法都是狗屁临扮。似乎有一些懈怠了论矾,半年內(nèi)要搞完一些新的東西,別讓拖拉成為絆腳石哈杆勇。
2023年1月還有12天贪壳,要繼續(xù)加油,一月份要和哥哥一起復(fù)盤