1.首先要確定免疫組化技術(shù)是否合格,合格的染色結(jié)果應(yīng)該是背景顏色淺淡或無(wú)著色,而陽(yáng)性標(biāo)志物清晰和定位明確郑现。
2.不僅要判斷所檢組織中有或無(wú)陽(yáng)性標(biāo)記物,還要注意陽(yáng)性信號(hào)的分布部位和形態(tài)特征。一般說(shuō)來(lái),陽(yáng)性信號(hào)應(yīng)與被測(cè)抗原所在的部位一致哩罪。此處所說(shuō)的部位包括組織和細(xì)胞的不同區(qū)域狞甚。
3.陰性染色結(jié)果是組織內(nèi)預(yù)期特定區(qū)域中未見(jiàn)抗原表達(dá),但陰性結(jié)果不能立即認(rèn)為是否定意義,
陽(yáng)性標(biāo)記色度特征
免疫組化標(biāo)記時(shí)細(xì)胞陽(yáng)性著色程度取決于抗原含量、分布密度和標(biāo)記方法及其敏感性廓旬。一般而言哼审，抗原含量越多；分布密度越高孕豹，標(biāo)記方法越敏感涩盾。陽(yáng)性結(jié)果顯色則越強(qiáng)。根據(jù)陽(yáng)性標(biāo)記的顯色程度分
為淡黃色励背，提示為弱陽(yáng)性春霍；
在結(jié)果判斷中，后兩者較有意義叶眉，可作為判斷依據(jù)址儒。而前者除考慮標(biāo)本處理和方法學(xué)因素外,可能與細(xì)胞只有輕度異常表達(dá)，或某些細(xì)胞攝取了周圍組織抗原之故衅疙。
棕黑色莲趣，示為強(qiáng)陽(yáng)性。
二饱溢、陽(yáng)性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征免疫組化標(biāo)記中喧伞，陽(yáng)性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征是反映抗原在細(xì)胞中的定位和分布情況。在診斷中陽(yáng)性細(xì)胞以擬標(biāo)記的細(xì)胞為前提绩郎，陽(yáng)性表達(dá)必須在細(xì)胞特定的抗原部位潘鲫，若不在抗原所在部位的陽(yáng)性表達(dá)和非目標(biāo)細(xì)胞即使陽(yáng)性也不應(yīng)作為判斷依據(jù)。根據(jù)抗原在細(xì)胞中分布和陽(yáng)性顆粒沉淀部位可分為以下5種類
二肋杖，陽(yáng)性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征免疫組化標(biāo)記中溉仑，陽(yáng)性標(biāo)記細(xì)胞學(xué)特征是反映抗原在細(xì)胞中的定位和分布情況。在診斷中陽(yáng)性細(xì)胞以擬標(biāo)記的細(xì)胞為前提兽愤，陽(yáng)性表達(dá)必須在細(xì)胞特定的抗原部位彼念，若不在抗原所在部位的陽(yáng)性表達(dá)和非目標(biāo)細(xì)胞即使陽(yáng)性也不應(yīng)作為判斷依據(jù)挪圾。根據(jù)抗原在細(xì)胞中分布和陽(yáng)性顆粒沉淀部位可分為以下5種類
1.胞膜型陽(yáng)性顆粒主要分布于細(xì)胞膜表面,形成一薄層棕黃色顆粒包繞整個(gè)細(xì)胞。此類型常見(jiàn)于某些膜抗原,如上皮膜抗原(EMA)逐沙、白細(xì)胞共同抗原(LCA)及B細(xì)胞哲思、T細(xì)胞、粒細(xì)胞相關(guān)抗原(GAA)和Ki-1等吩案。
2.胞核型陽(yáng)性顆粒定位于細(xì)胞核,呈均勻分布或位于核膜下,有的呈小斑塊狀不規(guī)則分布棚赔。此多見(jiàn)于增殖細(xì)胞核抗原、Ki-67及激素受體中雌激素受體(ER)徘郭、孕激素受體(PR)和基因p53等靠益。
3.胞漿型陽(yáng)性顆粒主要分布于細(xì)胞漿。大部分抗原均屬于此種類型,如細(xì)胞角蛋白残揉、波形蛋白胧后、結(jié)蛋白、神經(jīng)絲蛋白抱环、肌紅蛋白壳快、a1-抗胰糜蛋白酶及前列腺特異性抗原(PSA)等。依據(jù)抗原在胞漿內(nèi)分布形式,通常表現(xiàn)為彌漫性分布或局限性分布镇草。前者陽(yáng)性顆粒彌漫而均勻地分布于整個(gè)細(xì)胞漿眶痰。局限性是指陽(yáng)性顆粒呈小斑點(diǎn)狀或斑塊狀局限于細(xì)胞漿中的某一部位、核周或細(xì)胞漿的一側(cè)梯啤。
4.微絨毛型抗原顆粒主要分布于腺癌細(xì)胞的微絨毛,而胞漿和胞膜可以是陽(yáng)性或陰性表達(dá)竖伯。這種表現(xiàn)形式最常見(jiàn)于各種腺癌,如甲狀腺癌、乳腺癌因宇、胃腸腺癌七婴、膽道腺癌、等羽嫡。其特點(diǎn)是陽(yáng)性顆粒除靠近腔面陽(yáng)性外,其余基底部可呈陰性反應(yīng)
5.復(fù)合型在常規(guī)免疫組化標(biāo)記中,同一種抗原可以同時(shí)表達(dá)于胞膜和胞漿本姥、胞核和胞漿,但很少發(fā)現(xiàn)胞膜和胞核同時(shí)表達(dá)。值得注意的是組織標(biāo)本固定不及時(shí)造成抗原移位使胞核和胞漿同時(shí)陽(yáng)性杭棵。
三婚惫，非特異著色特征以下情況可干擾免疫組化標(biāo)記結(jié)果的觀察和判斷;
1.抗體交叉反應(yīng): 是由于該抗原決定簇同時(shí)存在于多種組織細(xì)胞,如GFAP可同時(shí)存在于星形膠質(zhì)細(xì)胞和唾液腺肌上皮。S-100蛋白則更為嚴(yán)重,可表達(dá)于多種組織細(xì)胞魂爪。因此,應(yīng)全面了解和認(rèn)識(shí)該抗體的功能和標(biāo)記范圍先舷。故抗體交叉反應(yīng)只要應(yīng)用得當(dāng)仍有助于診斷。
2.非特異性染色是指抗原無(wú)明確定位,腫瘤細(xì)胞與間質(zhì)細(xì)胞滓侍、細(xì)胞與間質(zhì)均為黃色,相互累片,色度無(wú)深淺之分蒋川。這種標(biāo)記組織片不能作為免疫組織標(biāo)記結(jié)果判斷依據(jù)。非特異性染色的原因常為組織標(biāo)本固定不佳撩笆、抗體質(zhì)量問(wèn)題或稀釋度不合理及操作方法不規(guī)范等捺球。因此,免疫組化特異性染色定位非常重要,如前所述,陽(yáng)性顆粒應(yīng)位于細(xì)胞胞膜缸浦、胞漿或胞核,陽(yáng)性細(xì)胞與陰性細(xì)胞相互交雜,陽(yáng)性染色強(qiáng)度深淺不一。
