摘要
小配體-受體相互作用是生物學中許多基本過程的基礎，也是醫(yī)學上對人類疾病進行藥物干預的基礎憎夷。我們在此報道了一種遺傳系統(tǒng)刻盐，稱為酵母三雜交系統(tǒng)椎例，用于檢測體內配體-受體的相互作用。該系統(tǒng)改編自酵母雙雜交系統(tǒng)印颤，其中結合了第三種合成雜交配體您机，以地塞米松和FK506共價連接的異源二聚體作為雜合配體，驗證了該系統(tǒng)的可行性。表達大鼠糖皮質激素受體激素結合域與LexA DNA結合域的融合蛋白和FKBP12與轉錄激活域的融合蛋白际看，當接種在含有地塞米松-FK506異源二聚體的培養(yǎng)基上時咸产，會激活報告基因。過量的FK506以競爭方式完全消除了報告基因激活仲闽。使用這個系統(tǒng)脑溢，我們在酵母中篩選了一個Jurkat cDNA文庫，該文庫與酵母中的轉錄激活域融合蔼囊，在地塞米松-FK506異源二聚體存在下表達大鼠糖皮質激素受體-LexA DNA結合域融合蛋白的激素結合域焚志。此外，我們分離了人類FKBP12的重疊克隆畏鼓。這些結果表明酱酬，三雜交系統(tǒng)可用于發(fā)現(xiàn)小配體的受體并篩選已知受體的新配體。
原文鏈接A three-hybrid system for detecting small ligand–protein receptor interactions
閱讀初衷
這篇文章發(fā)得比較早云矫，于1996年發(fā)表于PNAS雜志上膳沽，只要經(jīng)典，再早的文獻都有參考價值让禀。最近有個蛋白復合物需要做酵母雙雜驗證其作用挑社，但結果是未發(fā)現(xiàn)其兩兩相互作用，所以想弄個檢測三個蛋白相互作用的系統(tǒng)巡揍，然后我老師推薦了解這篇文獻痛阻，并幫忙咨詢拿到了關鍵質粒（pBridge）。本人饒有興致細細品讀腮敌，準備設計實驗阱当，爭取把結果做出來，然而最后發(fā)現(xiàn)該套系統(tǒng)好像不是很適合我的研究目的糜工。
文章大意
細品之后發(fā)現(xiàn)該系統(tǒng)主要是做配體與受體之間相互作用的弊添，對于藥理研究可能非常有用。之所以說是三雜捌木，可以將該系統(tǒng)分為3個部分：HooK油坝、Bait和Fish。這篇文章的驗證實驗設計如下：
HooK為糖皮質激素受體（rGR）刨裆，當然也做了變體對其效率進行分析澈圈。Bait中的A為rGR配體(地塞米松)；B為FK506(免疫抑制劑)帆啃。Fish為FK506受體（FKBP）极舔。通過實驗設計我們可以發(fā)現(xiàn)，該系統(tǒng)甚至可以研究4種蛋白的相互作用链瓦，挺強大的拆魏。該系統(tǒng)推薦做激素和藥物等研究的同學使用盯桦。
文章譯本
為了方便大家以及自己日后學習，在此提供本文的全譯文檔渤刃。
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