瓊脂糖凝膠電泳Agarose gel electrophoresis

一折欠、凝膠電泳

將DNA分子放置到以凝膠為介質(zhì)的電場中時,它會以一定的速率移向適當?shù)碾姌O傀缩。
根據(jù)片段大小對DNA分子進行分離和觀察最簡便的方法赡艰。

二、凝膠電泳的基本原理

  • 凝膠:帶孔的篩網(wǎng)狀多聚物揖闸,惰性好料身,很穩(wěn)定,可以作為支持介質(zhì)承載DNA贮泞。
    -DNA分子糖-磷酸骨架中的磷酸基團呈離子化狀態(tài)啃擦。
  • DNA多核苷酸鏈:多聚陰離子饿悬,帶負電。
  • DNA分子從點樣孔開始珠叔,穿過凝膠的孔隙弟劲,沿著凝膠向正極方向泳動函卒。
  • 形狀或構型不同的分子遷移率不同,而被分離。


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三锚国、瓊脂糖凝膠(agarose gel)

線性的瓊脂糖多聚物可以組成柔韌的纖維血筑,交織形成有孔隙的網(wǎng)狀結(jié)構的凝膠。

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四车伞、瓊脂糖凝膠電泳的過程

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[圖片上傳中...(IMAGE.jpg-1ad4a8-1585232696200-0)]

A. 制膠:1%膠濃度另玖、50×TAE緩沖液谦去、GoldviewⅡ型

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B. 制膠板:膠板大小蹦哼、樣品孔大小纲熏、膠厚度、梳子大小

C.上樣:記錄上樣順序和上樣量

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D. 電泳:恒壓100V、25min

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E. 檢測:凝膠成像系統(tǒng)

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