MEG-01細(xì)胞源自一位CML患者成巨核細(xì)胞轉(zhuǎn)換期的骨髓細(xì)胞烈和。細(xì)胞質(zhì)因子Ⅷ和表面球蛋白Ⅱb/Ⅲa偶垮、高碘酸-Schiff(PAS)反應(yīng)睛约；α醋酸萘酯酶和酸性磷酸酶陽(yáng)性执解；髓過氧化物酶寞肖、α-丁酸萘酯酶、氯化醋酸AS-D萘苯酚酯酶和堿性磷酸酶陰性衰腌。用單克隆抗體BA-1(抗B細(xì)胞新蟆、粒性白細(xì)胞)，HPL-3(抗球蛋白Ⅱb/Ⅲa)和20.3(抗單核細(xì)胞右蕊、血小板)染色成陽(yáng)性琼稻，其他淋巴和骨髓類抗體成陰性。
細(xì)胞名稱：人成巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱：MEG-01
產(chǎn)品貨號(hào)：TCH-C255
種屬來(lái)源：人
組織來(lái)源：血液
疾病特征：白血病
細(xì)胞形態(tài)：淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性：半貼半懸
培養(yǎng)體系：RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S
配套培養(yǎng)基貨號(hào)：TCH-G255
傳代比例：1:2-1:3饶囚，每2-3天換液一次
傳代周期：24-48 h
培養(yǎng)條件：氣相：95%空氣+5%CO2帕翻，溫度：37℃
凍存條件：60%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+30%FBS+10%DMSO，液氮儲(chǔ)存
質(zhì)量檢測(cè)：細(xì)菌萝风、真菌嘀掸、支原體檢測(cè)均為陰性
MEG-01細(xì)胞培養(yǎng)注意要點(diǎn)
1. 細(xì)胞特性：培養(yǎng)中始終存在?些?點(diǎn)樣碎?，不需要特殊處理规惰。?部分細(xì)胞呈不規(guī)則圓形懸浮狀態(tài)睬塌，有少量細(xì)胞呈梭形貼壁。
2. 培養(yǎng)?法（以T25瓶為例）
(1) 該細(xì)胞為半貼壁半懸浮細(xì)胞，其中貼壁細(xì)胞較少或到50%均為正常揩晴，可以按懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)?式傳代勋陪，貼壁部分吹下即可（如遇吹不下來(lái)，可?0.25%胰酶適當(dāng)消化）硫兰；
(2)維持細(xì)胞密度在3-10×10^5cells/mL培養(yǎng)粥鞋，初始接種密度不低于3×10^5cells/mL，?到10×10^5cells/mL左右進(jìn)?傳代瞄崇。建議前期計(jì)數(shù)后操作呻粹，后?可
以根據(jù)經(jīng)驗(yàn)傳代；
(3)每隔3天計(jì)數(shù)操作?次苏研，如密度低于3×10^5cells/mL可更換?體積容器（如孔板）進(jìn)?培養(yǎng)等浊；
3. 細(xì)胞傳代?法：(細(xì)胞密度選擇其中?種操作?法)
(1) 半換液：如密度不?8×10^5cells/mL則進(jìn)?半換液；緩緩吸出上層?半的培養(yǎng)液摹蘑，于1200 rpm（250g左右）3min離?收集細(xì)胞筹燕，加?等體積新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，輕輕吹打3-5次衅鹿，接回原瓶繼續(xù)培養(yǎng)撒踪；
(2) 1：2稀釋傳代：如密度接近10×10^5cells/mL左右，則將細(xì)胞等體積分裝到兩個(gè)新培養(yǎng)瓶大渤，每瓶分別補(bǔ)加新鮮培養(yǎng)基到總體積5mL制妄；
(3) 全離?換液或傳代：細(xì)胞每持續(xù)培養(yǎng)超?周可進(jìn)??次全離?換液或者傳代，不建議頻繁?離?的?式換液或傳代泵三；離?轉(zhuǎn)速推薦1200rpm 3min耕捞。
MEG-01細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng)
(1) 該細(xì)胞增殖較慢，?較脆弱烫幕，培養(yǎng)中減少觀察挪動(dòng)俺抽，維持穩(wěn)定的培養(yǎng)溫度和環(huán)境；
(2) 盡可能減少吹打次數(shù)较曼，取樣計(jì)數(shù)或者傳代時(shí)輕輕吹打3-5下混勻細(xì)胞即可磷斧；
(3) 傳代后每天觀察細(xì)胞狀態(tài)，如果密度太?捷犹，不及時(shí)處理弛饭，細(xì)胞容易死亡，需嚴(yán)格控制培養(yǎng)密度伏恐；
(4) ?少每3天需要將細(xì)胞半換液或者傳代?次孩哑，?周左右全部離?換液?次；
(5) 推薦凍存密度：3~5×10^6cells/mL翠桦。
