免疫熒光技術(shù)(Immunofluorescence technique峡继,IF )又稱(chēng)熒光抗體技術(shù)叨叙,是標(biāo)記免疫技術(shù)中發(fā)展最早的一種重付。它是在免疫學(xué)玄组、生物化學(xué)和顯微鏡技術(shù)的基礎(chǔ)上建立起來(lái)的一項(xiàng)技術(shù)整以。很早以來(lái)就有一些學(xué)者試圖將抗體分子與一些示蹤物質(zhì)結(jié)合胧辽,利用抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行組織或細(xì)胞內(nèi)抗原物質(zhì)的定位。
多重免疫組化(mIHC):主要的技術(shù)原理來(lái)自TSA技術(shù)公黑,TSA即酪酰胺信號(hào)放大(Tyramide signal amplification)是一類(lèi)利用辣根過(guò)氧化酶(HRP)對(duì)靶蛋白或核酸進(jìn)行高密度原位標(biāo)記的酶學(xué)檢測(cè)方法邑商。該技術(shù)可與高性能染料Alexa Fluor?、傳統(tǒng)熒光染料和比色檢測(cè)系統(tǒng)相兼容凡蚜。 TSA主要原理是利用酪胺Tyramide的過(guò)氧化物酶反應(yīng)(酪胺鹽在HRP催化H202下形成共價(jià)鍵結(jié)合位點(diǎn))人断,產(chǎn)生大量的酶促產(chǎn)物,該產(chǎn)物能與周?chē)牡鞍讱埢?包括色氨酸朝蜘、組氨酸和酪氨酸殘基)結(jié)合恶迈,這樣在抗原-抗體結(jié)合部位就有大量的生物素沉積,與隨后加入的Streptavidin—HRP/熒光基團(tuán)結(jié)合谱醇,經(jīng)幾次這樣的循環(huán)放大暇仲,可以結(jié)合大量的酶分子or熒光基團(tuán),結(jié)果使其檢測(cè)信號(hào)得到幾何級(jí)放大副渴。
mIHC和IP的區(qū)別: