pyrE基因編碼乳清酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶 (Orotate phosphoribosyl transferase)。
? 基于pyrE基因可實(shí)現(xiàn)雙向篩選:1)該基因缺失并鸵,會(huì)造成突變株無(wú)法從頭合成尿嘧啶,導(dǎo)致細(xì)菌死亡其监;2)該基因存在传藏,可將培養(yǎng)基中5-FOA轉(zhuǎn)化為5-FU,而5-FU可摻入DNA和RNA分子中導(dǎo)致細(xì)菌死亡屉更。換言之徙融,pyrE基因缺失突變株不能在尿嘧啶限制性培養(yǎng)基中生長(zhǎng),而含有pyrE基因的菌株不能在含有5-氟乳清酸(5-fluoroorotic acid瑰谜,5-FOA欺冀,可轉(zhuǎn)化為5-FU)的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)。因此萨脑,pyrE基因可作為正向(含有pyrE生存)和負(fù)向(含有pyrE基因死亡)篩選標(biāo)記隐轩。
pyrF基因編碼乳清苷-5’-單磷酸脫羧酶(orotidine-5′-monophosphate decarboxylase)。原理同pyrE砚哗。
該雙篩系統(tǒng)在古生菌Sulfolobus龙助,Haloferax, Haloarcula,細(xì)菌Clostridium蛛芥,Pseudomonas putida提鸟,以及一些病原菌Treponema denticola等中都可以使用。