十四习劫、急性出血性結(jié)膜炎(紅眼病、丙類(lèi)嚼隘、EV70/CA24v亞洲多诽里、VP1基因→用于診斷)

傳染性極強(qiáng)、急性病毒性眼病飞蛹、結(jié)膜發(fā)紅谤狡。
腸道病毒70型or柯薩奇病毒A24型及變異株
潛伏期很短灸眼、眼刺激癥狀重、2周自愈豌汇。

(一)病原

微小核糖核酸病毒科（小RNA病毒幢炸？）新型腸道病毒70型<u>EV70</u>or柯薩奇A24型變種<u>CA24v</u>(亞洲多)。
單股正鏈RNA拒贱、耐酸宛徊、乙醚、抵抗一般消毒劑逻澳、脂溶劑闸天。<u>紫外線(xiàn)、氧化劑斜做、高溫干燥</u>敏感苞氮。
兩種病毒臨床表現(xiàn)基本相同、不能區(qū)別瓤逼。同時(shí)流行感染笼吟。

(二)病原分離方法

1. 采取標(biāo)本
   發(fā)病1~3 d →結(jié)膜拭子→結(jié)膜囊、結(jié)膜表面涂擦→冷藏運(yùn)送
2. 分離病原
   患病后第1天分離率最高
   Hela霸旗、Hep-2細(xì)胞贷帮、人胚腎等
3. 病原分離的診斷價(jià)值
   病毒分離陽(yáng)性→確診
   有助分型

(三)特征性基因檢測(cè)

VP1基因→用于診斷、RT-PCR

十五诱告、致腹瀉病毒(病毒性腸胃炎撵枢、丙類(lèi)、腸道腺病毒Ead)

病毒感染腸道精居、主要:嘔吐&腹瀉锄禽、可伴有發(fā)熱、厭食靴姿、腹痛沃但、全身不適等“中毒癥狀”、<u>自限性</u>急性感染性腹瀉(病毒性腸胃炎)空猜。丙類(lèi)
首要病原體是輪狀病毒绽慈、其次<u>腸道腺病毒Ead</u>、杯狀病毒辈毯、星狀病毒、腸道病毒(含八严停可病毒谆沃、柯薩奇病毒)、冠狀病毒仪芒。
侵犯<u>十二指腸</u>&<u>空腸黏膜細(xì)胞</u>唁影。病毒蛋白發(fā)揮腸毒素作用耕陷、誘導(dǎo)細(xì)胞過(guò)度分泌→腹瀉。通常<u>2周內(nèi)</u>恢復(fù)据沈。
病毒性腹瀉-世界范圍內(nèi)流行哟沫，糞口途徑。表現(xiàn)方式①5歲以?xún)?nèi)小兒腹瀉②年齡無(wú)關(guān)的暴發(fā)流行锌介。無(wú)特效藥嗜诀、<u>對(duì)癥補(bǔ)液</u>。

(一)病原

1. 輪狀病毒RV（VP6抗原性不同分組）
   呼腸孤病毒科孔祸、形如車(chē)輪隆敢。
   核心蛋白VP6為組、亞組的特異性抗原崔慧，依據(jù)VP6抗原性的不同→分為A~G組拂蝎。ABC三組致人腹瀉。

• A組 6月齡~2歲嬰幼兒
• B組 青壯年腸胃炎(☆首先由我國(guó)確定)
• C組 散發(fā)的兒童腹瀉

<u>外殼蛋白VP4惶室、VP7</u>具有中和抗原活性温自，刺激產(chǎn)生中和抗體。

• VP7→RV的G型
• VP4→RV的P型

主要流行型:<u>G1P皇钞、G2P悼泌、G3P、G4P</u>鹅士。
輪狀病毒耐乙醚券躁、弱酸、堿掉盅、反復(fù)凍融也拜。pH適應(yīng)廣3.5_{10，糞便中數(shù)天}數(shù)周趾痘。55℃ 30 mins 滅活慢哈。

2. 杯狀病毒
   杯狀病毒科，電鏡下32個(gè)<u>杯狀表面凹陷</u>永票。
   成人&大齡兒童卵贱、流行性<u>非細(xì)菌性胃腸炎爆發(fā)最重要病原體</u>。
   單鏈正RNA侣集、對(duì)熱&酸穩(wěn)定键俱、抵抗乙醚。
3. 腸道腺病毒Ead
   腺病毒科世分，致腹瀉的有:腺病毒<u>F亞屬40编振、41血清型</u>。
   主要<u>2歲以下兒童</u>臭埋，嬰幼兒病毒性腹瀉第2位病原體踪央。
   耐酸堿臀玄、56℃ 2~3 mins 滅活。
4. 星狀病毒
   電鏡下病毒顆粒呈<u>星形畅蹂，表面5~6個(gè)星芒狀突起結(jié)構(gòu)</u>健无。
   單股正鏈RNA，**7種血清型液斜，最常見(jiàn)是Ⅰ型累贤。
   <u>嬰幼兒、老人旗唁、免疫缺陷病人</u>腹瀉重要病原畦浓。

(二)病原分離、特征性抗原和抗體的檢測(cè)

1. 輪狀病毒

2. 病原分離方法
   急性期糞便→密度梯度離心→分離病毒
   恒河猴胚腎細(xì)胞系MA-104→培養(yǎng)A組&C組RV→電鏡or免疫電鏡檢查病毒

3. 抗原與核酸檢測(cè)

   • 測(cè)糞便中病毒抗原:ELISA检疫、免疫酶聯(lián)斑點(diǎn)試驗(yàn)讶请、放免法、免疫熒光屎媳。
   • 糞便中提取病毒RNA:聚丙烯酰氨凝膠電泳&銀染色夺溢，檢查<u>RNA電泳圖譜</u>，A組RV-4232烛谊、B組-4223风响、C組-4322
   • 糞便提取物→巢式RT-PCR檢查RNA→<u>G型&P型</u>的基因分型。

4. 抗體檢測(cè)
   感染5天后丹禀，ELISA檢測(cè)IgM抗體状勤，<u>5歲以下兒童幾乎都感染過(guò)A組輪狀病毒</u>。
   RV感染后機(jī)體IgM双泪、IgG對(duì)同型病毒有保護(hù)作用持搜、腸道SIgA對(duì)異型有部分保護(hù)作用。

5. 杯狀病毒

6. 標(biāo)本采取方法
   潛伏期和排毒時(shí)間均很短焙矛、發(fā)病24h糞便排出病毒高峰葫盼、72h后難以檢出。
   密度梯度離心法→分離病毒→電鏡or免疫電鏡檢查
   無(wú)法培養(yǎng)村斟、無(wú)動(dòng)物模型

7. 特征性基因與抗原
   ELISA贫导、固相放免法測(cè)糞便中的病毒抗原
   RT-PCR、Real Time RT-PCR 檢測(cè)特異性基因片段

8. 抗體檢測(cè)
   酶免疫吸附法（EIAs）蟆盹、放免法測(cè)血清特異性抗體孩灯，雙份抗體效價(jià)↑有診斷意義。
   我國(guó)IgG抗體陽(yáng)性率89%逾滥、嬰兒99%

9. 腸道腺病毒

10. 病原分離方法
    急性期糞便→密度梯度離心→分離病毒
    人胚腎細(xì)胞株HEK-293钱反、Hela、A549→電鏡or免疫電鏡檢查病毒

11. 特征性基因與抗原
    ELISA匣距、免疫熒光法→對(duì)糞便抗原檢測(cè)
    從糞便抽提DNA→SmaI酶切和凝膠電泳分析酶切圖譜檢測(cè)面哥、PCR、探針雜交毅待、序列分析

12. 抗體檢測(cè)
    ELISA→雙份血清IgM抗體檢測(cè)→4倍↑診斷尚卫，50%4歲兒童抗體+

13. 星狀病毒

14. 病原分離方法
    急性期糞便→密度梯度離心→分離病毒
    人胚腎細(xì)胞、大腸癌細(xì)胞→直接或免疫電鏡（IEM）尸红、免疫熒光檢查

15. 特征性基因與抗原
    酶聯(lián)免疫吸附（EIA）→檢測(cè)糞便中病毒抗原
    糞便中抽提RNA→RT-PCR吱涉、探針雜交、序列分析---核酸檢測(cè)

16. 抗體檢測(cè)
    ELISA→雙份血清IgM抗體檢測(cè)→4倍效價(jià)↑診斷
    3~4歲兒童抗體陽(yáng)性率64%

十六外里、森林腦炎病毒

中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀為主要表現(xiàn)怎爵、高熱伴癱瘓。
屬于<u>生物安全4級(jí)</u>的高致病性病原微生物
自然疫源性疾病盅蝗。需要森林環(huán)境鳖链、動(dòng)物宿主、特定蜱種墩莫。主要通過(guò)帶毒蜱叮咬感染芙委、飲用未煮熟的被感染牛羊奶也可感染。

(一)病原

1. 分類(lèi)學(xué)地位
   黃病毒科黃病毒屬狂秦。

蚊傳黃病毒：登革熱灌侣、乙腦、黃熱病毒 血清組
蜱傳(黃)病毒：蜱傳腦炎病毒復(fù)合群（蜱傳腦炎病毒裂问、科薩努爾森林腦炎病毒...）

2. 主要生物學(xué)性狀
   球形顆粒侧啼、單股正鏈RNA
   多種動(dòng)物易感，小白鼠高度易感堪簿、雞胚很好繁殖痊乾。
   多種細(xì)胞敏感，Vero戴甩、BHK-21等常規(guī)細(xì)胞均可培養(yǎng)符喝。
3. 基因組結(jié)構(gòu)
   略
4. 致病過(guò)程
   皮下組織細(xì)胞繁殖→淋巴結(jié)→內(nèi)臟淋巴結(jié)組織→內(nèi)臟繁殖→血液、神經(jīng)系統(tǒng)→中樞神經(jīng)系統(tǒng)癥狀

(二)病原分離方法

1. 采取標(biāo)本
2. 發(fā)病1周內(nèi)甜孤、血液协饲、分離率較低
3. 死亡12小時(shí)內(nèi)、腦干組織缴川、分離率高
4. 分離病原
5. 出生3日內(nèi)乳鼠茉稠、最敏感動(dòng)物，腦內(nèi)把夸、腹腔聯(lián)合接種
6. 7日齡雞胚而线、卵黃囊接種
7. 雞胚纖維母細(xì)胞、豬腎細(xì)胞，微量細(xì)胞培養(yǎng)膀篮，產(chǎn)生病變&空斑嘹狞，比小白鼠更敏感。
8. 病原分離的價(jià)值
   對(duì)臨床診斷意義不大誓竿，臨床依靠血清學(xué)

(三)特征性基因與抗原檢測(cè)

PCR→針對(duì)5`端非編碼區(qū)的引物最常用

(四)抗體檢測(cè)

1. IgM捕獲ELISA法--適用于早期診斷
   IgM特異性抗體磅网、病后1周內(nèi)滴度較高、2周高峰筷屡、5個(gè)月消失
2. 補(bǔ)體結(jié)合抗體測(cè)定
   能維持半年涧偷、檢出“補(bǔ)體結(jié)合抗體”→半年內(nèi)感染過(guò)，雙份血清4倍↑診斷價(jià)值
3. 血凝和血凝抑制試驗(yàn)
   感染病毒的鼠腦→蔗糖-丙酮法→提取血凝素→鴿血細(xì)胞凝集效果＞鵝血細(xì)胞
   血凝抑制抗體→中和抗體 正相關(guān)

十七毙死、水痘-帶狀皰疹病毒

水痘燎潮、帶狀皰疹→VZV 引起兩種不同表現(xiàn)的疾病。
原發(fā)感染：水皰→小兒常見(jiàn)急性傳染病

斑丘疹發(fā)展為水痘疹扼倘，同一部位可見(jiàn)到多種形式确封，即“多形性發(fā)疹”，向心性分布唉锌。

原發(fā)感染后長(zhǎng)期潛伏于<u>脊髓神經(jīng)后根神經(jīng)節(jié)的神經(jīng)元</u>內(nèi)隅肥，再激活后引起帶狀皰疹。多見(jiàn)于成年人袄简。
全球分布腥放、冬春季流行，3~9歲好發(fā)绿语。病人是唯一傳染源秃症。<u>呼吸道或直接接觸</u>傳播。
傳染性：麻疹＞VZV＞風(fēng)疹吕粹、腮腺炎

(一)病原

皰疹病毒科α-亞科种柑，只有一個(gè)血清型。
體外抵抗力較弱匹耕、但在皰液中-65℃長(zhǎng)期存活
不能在雞胚和一般動(dòng)物細(xì)胞中生長(zhǎng)

(二)病原分離方法

<u>皰疹液</u>接種<u>人胚纖維瘤母細(xì)胞</u>聚请，分離病毒顆粒。
產(chǎn)生局灶性CPE稳其、細(xì)胞核內(nèi)有嗜酸性包涵體驶赏、與鄰近細(xì)胞融合呈多核巨細(xì)胞→非典型病例診斷

(三)特征性基因與抗原檢測(cè)

1. 抗原檢測(cè)
   ELISA、DFA法→抗VZV的特異性血清(or特異性單克隆抗體)→測(cè)VZV抗原
2. 基因檢測(cè)
   PCR→特定基因

(四)抗體檢測(cè)-臨床常用

人群普遍易感既鞠、感染后獲得持久免疫煤傍、兒童可產(chǎn)生永久性細(xì)胞免疫和體液免疫
VZV感染后產(chǎn)生IgM、IgG和IgA嘱蛋。

十八蚯姆、手足口病

HFMD五续、柯薩奇A組16型(Cox A16)、腸道病毒71型(EV 71)
5歲以下嬰幼兒龄恋、夏秋季常見(jiàn)

(一)病原

Cox A16疙驾、EV 71→小RNA病毒科腸道病毒屬、二十面體篙挽、立體對(duì)稱(chēng)荆萤。

(二)病原分離方法

1. 采集樣本
2. 糞便標(biāo)本 越早越好，＜7 d铣卡。4~8℃運(yùn)送、-20℃凍存
3. 咽拭子 Hank液中偏竟、加塞
4. 皰疹液 1ml注射器抽取煮落、套上針套、冷藏運(yùn)輸
5. 腦脊液 2~3ml CSF
6. 尸檢標(biāo)本 中樞神經(jīng)踊谋、降結(jié)腸(包括糞便)蝉仇、冷藏
7. 雙份血 1 ml、不抗凝殖蚕、間隔＞14 d
8. 病原分離
   細(xì)胞接種轿衔、乳鼠接種
   人肺系細(xì)胞（MRC-5）分離Cox A16
   其他人源細(xì)胞 wl-38、EK睦疫、橫紋肌瘤細(xì)胞RD

(三)特征性基因與抗原檢測(cè)

病毒培養(yǎng)分離害驹、中和抗體檢測(cè)、免疫組織化學(xué)法
<u>RT-PCR</u> 主要基于<u>Vp1蛤育、5‘UTR</u>設(shè)計(jì)引物
Vp1基因的原核表達(dá)產(chǎn)物作為抗原診斷Cox A16和EV 71感染宛官。

<u>Vp1蛋白</u>作為檢測(cè)抗原→檢測(cè)IgGM、曾感染EV 71的IgG