盡管在癌癥生物學(xué)和治療方面取得了重大進(jìn)展粉私，但膀胱癌（BC）患者的臨床療效仍不盡如人意眶俩。 腫瘤微環(huán)境（TME）是一個(gè)潛在的靶點(diǎn)苞尝。 在這里，通過(guò)對(duì) 8 個(gè) BC 腫瘤樣本和 3 個(gè)副腫瘤樣本進(jìn)行單細(xì)胞 RNA 測(cè)序搔弄，我們?cè)?BC 微環(huán)境中發(fā)現(xiàn)了 19 種不同的細(xì)胞類(lèi)型先较，這表明腫瘤內(nèi)部存在高度異質(zhì)性棍厌。 我們發(fā)現(xiàn)，腫瘤細(xì)胞下調(diào)了 MHC-II 分子掀淘，這表明癌細(xì)胞免疫原性的下調(diào)可能導(dǎo)致免疫抑制微環(huán)境的形成旬蟋。 我們還發(fā)現(xiàn)，單核細(xì)胞在腫瘤區(qū)域發(fā)生 M2 極化并分化革娄。 此外倾贰，LAMP3 + DC 亞群可能能夠招募調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞，從而參與免疫抑制 TME 的形成拦惋。 通過(guò)使用包含 3000 多個(gè) BC 樣本的公開(kāi)數(shù)據(jù)集進(jìn)行相關(guān)性分析匆浙，我們確定了炎癥性癌相關(guān)成纖維細(xì)胞（iCAFs）在腫瘤進(jìn)展中的作用，這與不良預(yù)后密切相關(guān)厕妖。 此外首尼，我們還描述了一個(gè)依賴于 iCAFs 的調(diào)控網(wǎng)絡(luò)。 這些結(jié)果有助于闡明 iCAFs 的原癌機(jī)制言秸。 我們的研究結(jié)果為癌癥免疫學(xué)提供了深刻的見(jiàn)解软能，并為未來(lái)的藥物發(fā)現(xiàn)提供了重要的資源。
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單細(xì)胞測(cè)序和細(xì)胞類(lèi)型鑒定
經(jīng)過(guò)質(zhì)量控制和去除批次間的批次效應(yīng)（補(bǔ)充圖 1举畸，見(jiàn) "方法"）查排，52721 個(gè)單細(xì)胞被聚類(lèi)為八大細(xì)胞群。 簇的特異性基因被用于用先前研究中描述的經(jīng)典標(biāo)記注釋細(xì)胞類(lèi)型5：上皮細(xì)胞（EPCAM+）抄沮；內(nèi)皮細(xì)胞（CD31+）跋核；兩種成纖維細(xì)胞（COL1A1+）-iCAFs（PDGFRA+）和 myo-CAFs（mCAFs）（RGS5+）；B 細(xì)胞（CD79A+）合是；骨髓細(xì)胞（LYZ+）了罪；T 細(xì)胞（CD3D+）；肥大細(xì)胞（TPSAB1+）（圖 1a聪全、b 和補(bǔ)充圖 2A-D）泊藕。 1a，b，補(bǔ)充圖 2A-D）娃圆。
圖1： a, b 鑒別 BC 和非惡性組織中的浸潤(rùn)細(xì)胞類(lèi)型玫锋。 a 樣品制備、測(cè)序和生物信息學(xué)分析的工作流程讼呢。 b 本研究中繪制的單個(gè)細(xì)胞的 tSNE 圖撩鹿，按主要細(xì)胞類(lèi)型、腫瘤等級(jí)和患者著色悦屏。 c UMAP 圖 EPCAM+ 細(xì)胞（上皮標(biāo)記物）按群組节沦、患者、分級(jí)和 CNV 級(jí)別著色础爬。 d 每個(gè) CNV 組的差異表達(dá)基因（DEG）熱圖甫贯。 e 惡性細(xì)胞中下調(diào)基因的豐富 GO 功能。 f MHC-II 分子和 CD74 的表達(dá)水平看蚜。 h 熱圖顯示了不同 CNV 組間每個(gè)細(xì)胞的 GSVA 評(píng)分的通路活性差異叫搁。 所示為線性模型的 t 值。 癌細(xì)胞表現(xiàn)出高度異質(zhì)性（CNV）
EPCAM+上皮細(xì)胞（EPCs）被重新聚類(lèi)供炎，產(chǎn)生了 17 個(gè)簇（圖 1c渴逻，d）。 有趣的是音诫，雖然之前已經(jīng)消除了批次效應(yīng)惨奕，但癌細(xì)胞仍顯示出患者特異性表達(dá)模式，這表明異質(zhì)性極高纽竣，可能是由拷貝數(shù)變異（CNV）引起的6墓贿；InferCNV 證實(shí)了這一假設(shè)（圖 1c，補(bǔ)充圖 3A）蜓氨。 如補(bǔ)充圖 3A 所示聋袋，CNVs 在大多數(shù)高級(jí)別腫瘤來(lái)源的 EPCs 中積累，并且在集群間表現(xiàn)出高度異質(zhì)性穴吹。 盡管存在異質(zhì)性幽勒，但幾乎所有高級(jí)別癌細(xì)胞都存在 9 號(hào)和 11 號(hào)染色體缺失以及 19 號(hào)和 20 號(hào)染色體擴(kuò)增。 此外港令，腫瘤組織中的一些細(xì)胞幾乎沒(méi)有 CNV啥容，并顯示出與正常 EPC 相似的表達(dá)模式（圖 1d），這表明這些細(xì)胞可能是非惡性 EPC顷霹。 因此咪惠，本研究根據(jù) CNV 將 EPC 分成 4 組：低、高淋淀、對(duì)照組和未檢測(cè)到組遥昧。
在比較轉(zhuǎn)錄組時(shí)，我們注意到一系列基因在對(duì)照組和未檢測(cè)到 CNV 的組別中表達(dá)量特別高，但在腫瘤細(xì)胞中幾乎沒(méi)有表達(dá)（圖 1d炭臭，紅色空白）永脓。 基因本體富集分析表明，這些基因富集于免疫相關(guān)通路鞋仍，尤其是 B 細(xì)胞相關(guān)通路（圖 1e）常摧。與正常上皮細(xì)胞相比，癌細(xì)胞幾乎喪失了產(chǎn)生免疫球蛋白的能力威创，它們表達(dá)的 MHC-II 分子水平也較低落午，這一點(diǎn)通過(guò)免疫熒光得到了驗(yàn)證（圖 1f，g）肚豺。 這些結(jié)果表明板甘，膀胱癌細(xì)胞可能會(huì)降低免疫原性以逃避免疫檢測(cè)。 此外详炬，我們注意到，擁有更多 CNV 的癌細(xì)胞似乎表達(dá)更高水平的 IGF2（補(bǔ)充圖 3B寞奸、C）呛谜。 在 TCGA BLCA 隊(duì)列中，高水平的 IGF2 與預(yù)后不良顯著相關(guān)（補(bǔ)充圖 3C）枪萄。 利用基因組變異分析（GSVA）進(jìn)行的通路分析顯示隐岛，CNV高發(fā)組富集了E2F靶點(diǎn)、MYC靶點(diǎn)和G2M檢查點(diǎn)通路瓷翻，而炎癥和其他免疫相關(guān)通路則下調(diào)（圖1h）聚凹。 這些結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，BC晚期癌細(xì)胞降低了免疫原性齐帚，并顯示出較高的增殖能力妒牙。-
腫瘤區(qū)域: 單核細(xì)胞 M2 極化
髓系細(xì)胞的重新聚集確定了 7 種細(xì)胞類(lèi)型： 腫瘤相關(guān)巨噬細(xì)胞 （TAM，MRC1+C1high）;CD1C+ 樹(shù)突狀細(xì)胞（CD1C+ DC对妄、CD1C+CLEC10A+）;單核細(xì)胞 （S100A8+S100A9+）;增殖髓系細(xì)胞 （TOP2A+）;交叉呈遞 DC （CLEC9A+）;濾泡 B 細(xì)胞 （CD79A+MS4A1+）;和 LAMP3+ DC （LAMP3+CCR7+）湘今。這些細(xì)胞亞群通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)證實(shí)（補(bǔ)充圖 1）。兩個(gè)細(xì)胞簇同時(shí)表達(dá)髓系標(biāo)志物和上皮或內(nèi)皮標(biāo)志物剪菱，它們被認(rèn)為是雙聯(lián)體（圖 D）摩瞎。2a，補(bǔ)充圖5A-C）孝常。細(xì)胞類(lèi)型之間的差異也可以通過(guò) TF 基序的活性來(lái)識(shí)別（補(bǔ)充圖 1）旗们。值得注意的是，單核細(xì)胞主要起源于正常粘膜組織构灸，而 TAMs 在 BC 組織中富集上渴。此外，這兩種細(xì)胞類(lèi)型的轉(zhuǎn)錄組似乎表現(xiàn)出持續(xù)的變化（圖 D）。2b驰贷，補(bǔ)充圖5B盛嘿，紅色空白），表明募集到腫瘤區(qū)域的單核細(xì)胞被重編程為 TAM括袒，這之前已在小鼠乳腺癌模型7 中報(bào)道次兆。為了進(jìn)一步研究這一正在進(jìn)行的過(guò)程，我們對(duì)單核細(xì)胞和 TAM 進(jìn)行了軌跡分析和 RNA 速度分析8,9锹锰。在兩個(gè)計(jì)算管道中都觀察到了類(lèi)似的現(xiàn)象（圖 D）芥炭。2c 和補(bǔ)充圖結(jié)合 SCENIC 鑒定的關(guān)鍵基序，我們認(rèn)識(shí)到 BACH1恃慧、MAFG 和 NFE2 三個(gè)基序的活性下調(diào)园蝠，而 MAF、STAT1 和 STAT2 基序的激活導(dǎo)致了這種 M2 極化過(guò)程（圖 D）痢士。2c彪薛， d， 補(bǔ)充圖這些結(jié)果為抑制或逆轉(zhuǎn)免疫抑制微環(huán)境的形成提供了潛在的靶標(biāo)怠蹂。此外善延，我們注意到共抑制劑 CD274、LGALS9城侧、CD276易遣、TIGIT 和 PDCD1LG2 在這個(gè)分化過(guò)程中都上調(diào)，而共激活因子下調(diào)（圖 D）嫌佑。2e）豆茫。
圖2: LYZ + 單細(xì)胞亞群的 tSNE 圖。單核細(xì)胞和 TAM 之間的 b DEGs屋摇。紅色空白的單個(gè)單元格顯示兩個(gè)組的特征揩魂。c 單片細(xì)胞 2 預(yù)測(cè)的從單核細(xì)胞分化為 TAM 的軌跡。d 在分化過(guò)程中由細(xì)胞簇著色時(shí)顯著抑制或激活 TF 基序炮温。e 熱圖顯示分化過(guò)程中免疫檢查點(diǎn)上調(diào)或下調(diào)肤京。f 三個(gè)不同 DC 子組之間 DEG 的熱圖。g Violin 圖顯示細(xì)胞因子和 CD274 在 LAMP3+ DC 中高度表達(dá)的表達(dá)水平茅特。h LAMP3+ DC 與 TCGA BLCA 隊(duì)列中不同 T 細(xì)胞亞群之間的相關(guān)性忘分。系數(shù)采用 spearman 相關(guān)分析計(jì)算。 LAMP3+ DC 通過(guò)細(xì)胞因子將 Treg 募集到腫瘤區(qū)域
在 3 個(gè) DC 亞組中白修，LAMP3+ DC 表達(dá)編碼細(xì)胞因子的各種基因妒峦，包括 CCL17、CCL19 和 CCL22（圖 D）兵睛。引人注目的是肯骇，這些細(xì)胞因子幾乎完全起源于 BC 中的 LAMP3+ DC （圖 D）窥浪。如之前的研究中所討論的，CCL17 和 CCL22 通過(guò)與 Tregs 膜上表達(dá)的 CCR4 結(jié)合而對(duì) Tregs 具有很強(qiáng)的趨化性10,11笛丙。在 TCGA BLCA 隊(duì)列中漾脂，LAMP3+ DC 特征與 Treg 特征和 Th2 特征高度正相關(guān)，兩者都是 CCR4+胚鸯，但與 CTL 特征沒(méi)有高度相關(guān)性（圖 D）骨稿。LAMP3 + DC 在腫瘤組織中顯著富集（補(bǔ)充圖 1）。此外姜钳，LAMP3+ DC 顯示最高水平的 CD274 （圖 D）坦冠。2f），這甚至高于在 BC 組織的 Tregs 中觀察到的水平哥桥，表明該 DC 亞組可以直接或通過(guò)將 Treg 募集到腫瘤區(qū)域來(lái)抑制 CD8+ T 細(xì)胞辙浑。SCENIC 分析顯示，RELB 和 KDM2B 基序在 LAMP3+ DC 中高度激活（補(bǔ)充圖 D）拟糕。5E-G）判呕。-
在 BC 中鑒定出兩種不同的成纖維細(xì)胞亞型
成纖維細(xì)胞 （COL1A1+） 分為兩種不同的類(lèi)型：PDGFRA+ 成纖維細(xì)胞表現(xiàn)出各種細(xì)胞因子和趨化因子的強(qiáng)烈表達(dá)，包括 CXCL12送滞、IL6佛玄、CXCL14、CXCL1 和 CXCL2累澡，這與 ?hlund D 等人在胰腺癌模型中描述的 iCAF 相似12;RGS5 + 成纖維細(xì)胞具有類(lèi)似于肌癌相關(guān)成纖維細(xì)胞 （mCAF） 的特征（圖 D）。3a般贼、b）愧哟。通過(guò)免疫熒光評(píng)估腫瘤和非惡性膀胱基質(zhì)組織中現(xiàn)有的 iCAFs 和 mCAFs（圖 D）。結(jié)果表明哼蛆，CAFs 在癌癥類(lèi)型中具有相似的亞組12,13蕊梧。
由簇 （上） 和亞組標(biāo)記 （下） 著色的成纖維細(xì)胞的 tSNE 圖。b 不同成纖維細(xì)胞亞組之間 DEG 的熱圖腮介。c IF 證實(shí)存在 iCAF 和 mCAF （n = 30）肥矢。比例尺代表 50 μm。d iCAFs 和 mCAFs 中上調(diào)基因的 GO 功能豐富叠洗。e甘改、f GSEA 顯示了 iCAFs （3E） 和 mCAFs （3F） 中最富集的通路。NES 表示標(biāo)準(zhǔn)化富集分?jǐn)?shù)灭抑。g Violin 圖顯示 CXCL12 在主要細(xì)胞類(lèi)型的表達(dá)水平十艾。h TCGA BLCA 隊(duì)列中 CXCL12 水平與腫瘤浸潤(rùn)巨噬細(xì)胞的相關(guān)性。系數(shù)采用 spearman 相關(guān)分析計(jì)算腾节。i 高水平的 CXCL12 預(yù)示著 TCGA BLCA 隊(duì)列的預(yù)后不良忘嫉。< 0.05 的 Log-rank p 值被認(rèn)為具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義荤牍。j IF 識(shí)別 BC 組織中的 CXCL12 + iCAFs。iCAFs 是腫瘤組織中 CXCL12 的主要衍生物庆冕。比例尺代表 50 μm康吵。
為了研究每個(gè)亞組的功能，我們對(duì) iCAFs 和 mCAFs 的 DEGs 進(jìn)行了 GO 富集分析访递。如圖 1 所示晦嵌。3d，iCAFs 與細(xì)胞外基質(zhì)組織力九、細(xì)胞遷移調(diào)節(jié)和血管生成有關(guān)耍铜，而肌肉系統(tǒng)過(guò)程、黏著斑和細(xì)胞外基質(zhì)相關(guān)通路在 mCAFs 中顯著富集跌前。GSEA 同樣揭示了 iCAFs 與細(xì)胞外基質(zhì)降解相關(guān)棕兼，表明在腫瘤轉(zhuǎn)移中具有潛在作用。細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用通路也在 iCAF 中富集抵乓。相比之下伴挚，肌肉收縮和 PGC1A 通路在 mCAF 中富集，對(duì)應(yīng)于之前的體外 12 研究（圖12）灾炭。3e茎芋， f） 的
由于細(xì)胞因子-細(xì)胞因子受體相互作用在 iCAFs 中富集，因此我們研究了 BC TME 中細(xì)胞因子的表達(dá)水平蜈出。值得注意的是田弥，iCAF 是 CXCL12 的主要來(lái)源，這與通過(guò) CXCL12/CXCR4 相互作用積累 TAM 有關(guān)14铡原。值得注意的是偷厦，CXCL12 與 TCGA BLCA 隊(duì)列中的 TAM 特征呈正相關(guān)。較高水平的 CXCL12 與不良預(yù)后顯著相關(guān)燕刻。免疫熒光染色證實(shí) CXCL12 在 BC 組織中由 iCAFs 表達(dá)（圖 D）只泼。3G-J）。
通過(guò) SCENIC 分析卵洗，我們?cè)趦蓚€(gè) CAF 亞組中確定了基本基序请唱。MEF2D 和 MEF2C 是 mCAF 特異性基序，在肌肉譜系的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中具有深遠(yuǎn)的作用15过蹂。TCF21 和 TWIST2 基序在 iCAF 中高度激活（圖 D）十绑。4a、b）酷勺。在之前的一項(xiàng)研究中孽惰，發(fā)現(xiàn) TCF21 與冠心病有關(guān)，增強(qiáng)了平滑肌細(xì)胞的“纖維肌細(xì)胞”表型16鸥印。TWIST2 是上皮機(jī)制轉(zhuǎn)換 （EMT） 的驅(qū)動(dòng)因子勋功。然而坦报，他們?cè)?CAF 中的角色仍然未知。
iCAFs 在 BC 中具有促增殖作用
通過(guò) GO 富集預(yù)測(cè) iCAFs 具有生長(zhǎng)因子活性狂鞋。為了證實(shí)這一假設(shè)片择，我們分析了 BC TME 中 VEGF、FGF 和 IGF 家族的表達(dá)水平（圖 D）骚揍。值得注意的是字管，iCAFs 是各種生長(zhǎng)因子的主要來(lái)源。在這些生長(zhǎng)因子中信不，IGF1（一種 iCAF 特異性組因子）與較差的總生存率有關(guān)（圖 D）嘲叔。4d， e）抽活。
為了驗(yàn)證其促增殖作用硫戈，我們通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)對(duì) iCAFs 進(jìn)行分選，并在體外將它們與膀胱尿路上皮癌細(xì)胞系共培養(yǎng)下硕。值得注意的是丁逝，共培養(yǎng)組顯示出更高的增殖能力，這證實(shí)了iCAFs 在 BC 中的促腫瘤作用（圖 D）梭姓。4f霜幼， g） 的 4 個(gè)。-
將 scRNA-seq 與公共數(shù)據(jù)集相關(guān)聯(lián)
為了研究本研究中鑒定的細(xì)胞類(lèi)型的臨床作用誉尖，我們使用CIBERSORTx17 評(píng)估了 TCGA BLCA 隊(duì)列樣本中每種細(xì)胞類(lèi)型的比例（補(bǔ)充圖17）罪既。7A–C，參見(jiàn)“方法”）铡恕。引人注目的是琢感，只有 iCAFs 和 mCAFs 的積累與較差的總生存期 （OS） 相關(guān)（圖 D）。5a没咙、b）。當(dāng)將細(xì)胞組分?jǐn)?shù)據(jù)與臨床信息相關(guān)聯(lián)時(shí)千劈，我們注意到先前研究中描述的分子亞型的細(xì)胞類(lèi)型豐度發(fā)生了很大變化4（圖 4）祭刚。5c、d）墙牌。腫瘤純度最高的管腔狀預(yù)后最好涡驮，而其他 4 組的 OS 無(wú)顯著差異∠脖酰基底鱗狀細(xì)胞的腫瘤純度最低捉捅，因?yàn)槲覀児ぷ髦需b定的幾乎所有細(xì)胞類(lèi)型都發(fā)生在該組中。值得注意的是虽风，該組 T 細(xì)胞也富集棒口，表明抗免疫檢查點(diǎn)療法可能適用于這些患者寄月。與其他細(xì)胞類(lèi)型相比，mCAFs 和 iCAFs 富集在四組中无牵，但管腔組除外漾肮。由于管腔-狀組主要包含早期樣本，這些結(jié)果表明 CAFs 與 BC 的腫瘤進(jìn)展密切相關(guān)茎毁。此外克懊，我們注意到成纖維細(xì)胞標(biāo)志物在腫瘤組織中顯著下調(diào)，而上皮標(biāo)志物上調(diào)七蜘。這可以解釋為什么下調(diào)的 DEGs 在細(xì)胞外區(qū)域富集18谭溉。由于正常膀胱粘膜主要含有內(nèi)皮祖細(xì)胞，而成纖維細(xì)胞主要位于基質(zhì)組織中橡卤，這種現(xiàn)象可能是采樣深度的結(jié)果扮念。這可能會(huì)掩蓋正常上皮細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞之間真實(shí) DEG 的識(shí)別（補(bǔ)充圖 D）。7D蒜魄， E）扔亥。
圖 5：BC 的分子亞型是由 TME 的異質(zhì)性引起的。
隨后谈为，我們擴(kuò)大了臨床隊(duì)列旅挤，從 GEO 和 ArrayExpress 數(shù)據(jù)庫(kù)中收集了 3000 多個(gè)微陣列分析的 BC 和非惡性粘膜樣本（參見(jiàn)“方法”）。用 Combat 函數(shù)消除可能的批量效應(yīng)伞鲫，然后通過(guò) ConsensusClusterPlus19 將 2959 個(gè)腫瘤樣本分為五大組（補(bǔ)充圖 D）粘茄。8A-C）。四個(gè)主要簇顯示出與管腔-狀秕脓、腔柒瓣、管腔浸潤(rùn)和基底-鱗狀簇相似的特征。另一個(gè)簇與 TCGA BLCA 中的神經(jīng)組不同吠架，同時(shí)表現(xiàn)出管腔鱗狀和管腔特征芙贫，因此被命名為管腔轉(zhuǎn)換。如圖 1 所示傍药。5e-h磺平，該 meta 隊(duì)列中的 OS 與 TCGA 高度對(duì)應(yīng)，證明了 CAFs 在 BC 進(jìn)展中的重要作用拐辽。iCAF 和 mCAF 具有許多相似的特征拣挪，這可能會(huì)使 CIBERSORTx 的結(jié)果不足。在 TCGA 的隊(duì)列中俱诸，iCAF 特異性標(biāo)志物 PDGFRA 與 BC 患者的不良 OS 顯著相關(guān)菠劝，而 mCAF 標(biāo)志物 RGS5 則不然，表明 iCAF 可能比 mCAF 具有更重要的作用（補(bǔ)充圖 1）睁搭。7F）赶诊。 -
為 BC 構(gòu)建基于 iCAF 的監(jiān)管網(wǎng)絡(luò)
使用CellphoneDB2笼平，我們研究了我們目前工作中確定的細(xì)胞類(lèi)型之間的細(xì)胞間相互作用網(wǎng)絡(luò)。值得注意的是甫何，iCAF 與其他細(xì)胞類(lèi)型的相互作用最多出吹，并且它們與 EC 的相互作用特別強(qiáng)烈（圖 D）≌尬梗考慮到 GO 分析和 GSEA 的結(jié)果以及我們數(shù)據(jù)中的表達(dá)豐度捶牢，我們收集了有關(guān)交互對(duì)的數(shù)據(jù)，包括生長(zhǎng)因子巍耗、CCL 和 CXCL 家族（補(bǔ)充圖 D）秋麸。9A）。
圖 6：BC TME 中的細(xì)胞間通訊網(wǎng)絡(luò)炬太。
iCAF 表達(dá)更高水平的 CXCL12灸蟆，其受體包括 DPP4、CXCR3亲族、CXCR4 和 ACKR3 （CXCR7）炒考。由于 CXCR4 和 CXCR3 在免疫細(xì)胞上廣泛表達(dá)，因此 iCAFs 分泌 CXCL12 是導(dǎo)致 BC 免疫浸潤(rùn)狀態(tài)的原因霎迫。iCAFs 分泌的 CCL2 和 CXCL1 可以與 ACKR1 相互作用斋枢，后者在 ECs 表面高度表達(dá)。這些細(xì)胞因子之前曾報(bào)道與 BC21,22 的轉(zhuǎn)移有關(guān)知给，我們將它們的起源確定為 iCAFs（圖6b瓤帚， d）。
iCAFs 產(chǎn)生 VEGF涩赢，包括 VEGFA 和 VEGFB戈次，它們與 ECs 上的 VEGF 受體 （FLT1 、 KDR 筒扒、 MET 和 FLT4） 結(jié)合以促進(jìn)血管生成怯邪。此外，F(xiàn)GFR1 在 iCAFs 和 ECs 上表達(dá)花墩，而 FGFR3 在腫瘤細(xì)胞上表達(dá)悬秉。這些受體可以與 FGF 結(jié)合，包括源自 iCAFs 的 FGF2 和 FGF7观游，并顯示出促增殖作用搂捧。IGF1R 是 IGF1 的一種受體驮俗，在腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞上表達(dá)懂缕，這表明 iCAF 也可能是導(dǎo)致對(duì)順鉑耐藥的因素23。值得注意的是王凑，腫瘤細(xì)胞表達(dá)高水平的 VEGFA搪柑，它具有最強(qiáng)的促血管生成能力聋丝。此外，高級(jí)別腫瘤細(xì)胞高度表達(dá) IGF2工碾，與 iCAFs 上的 IGF2R 相互作用弱睦，并促進(jìn)腫瘤進(jìn)展24 （圖 D）。6c渊额， e）况木。總之旬迹，我們的結(jié)果預(yù)測(cè)iCAFs 可以促進(jìn)腫瘤細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞的增殖火惊，并有可能能夠?qū)⒚庖呒?xì)胞募集到腫瘤階段。
