裸鼠腫瘤模型是比較常見和常用的一種腫瘤動物模型京景，它在皮下移植瘤腫瘤模型的建立中起到重要作用窿冯。裸鼠腫瘤模型的接種一般有細(xì)胞接種和瘤塊接種兩種方式，接種取材有手術(shù)活檢標(biāo)本确徙、癌性胸腹水標(biāo)本和體外培養(yǎng)的細(xì)胞系三種 醒串。
裸鼠移植瘤模型的建立具有建立周期短、成瘤率高鄙皇、易于操作芜赌、成本低的優(yōu)點。
裸鼠移植瘤實驗常用于檢測細(xì)胞的成瘤能力/抗腫瘤藥物的抗癌作用伴逸、
實驗準(zhǔn)備：
- 0.25%的胰酶缠沈，含血清的培養(yǎng)基，PBS或者生理鹽水
- 1ml注射器错蝴，細(xì)胞計數(shù)器洲愤，酒精棉球
實驗操作步驟：
- 將計數(shù)板及蓋玻片沖洗干凈，晾干
- 常規(guī)消化細(xì)胞顷锰，離心
- 加入適量PBS重懸細(xì)胞柬赐，使之成為單細(xì)胞懸液
- 按照一定稀釋倍數(shù)西施細(xì)胞懸液
- 細(xì)胞計數(shù)
- 取5*10^6個細(xì)胞，再次離心收集細(xì)胞沉淀
- 用0.2mlPBS或者生理鹽水重懸細(xì)胞馍惹，分別放入0.5ml的EP管中躺率，封口膜封口
- 選擇4~6周齡的裸鼠，將裸鼠背部皮膚消毒
- 用1ml注射器吸取細(xì)胞懸液万矾，將其注射入裸鼠皮下
- 以后每天觀察裸鼠生存情況以及移植瘤的情況悼吱，測量腫瘤大小
11.待早腫瘤生長至直徑約1.5~2cm大小時，脫頸法處死小鼠良狈，取出腫瘤后添，稱重，測量瘤體大小并計算體積
12.統(tǒng)計學(xué)分析
注意事項
- 細(xì)胞重懸時要將細(xì)胞懸液制備成單細(xì)胞懸液
- 計數(shù)前應(yīng)將細(xì)胞徹底混勻薪丁，稀釋至合適的濃度遇西，計數(shù)一定要精準(zhǔn)
一般實驗中要將裸鼠分組馅精，應(yīng)該采取隨機(jī)分組的辦法，并且每組裸鼠的數(shù)量原則上越多越好粱檀，但是考慮到實驗成本洲敢，一般選取每組5~10只。預(yù)實驗時茄蚯，選擇3只可以做統(tǒng)計學(xué)分析即可
細(xì)胞計數(shù)后压彭，用PBS或者生理鹽水重懸細(xì)胞時，最好不要超0.2ml渗常。在接種細(xì)胞的數(shù)目上壮不，一般情況選擇5~1010^6個細(xì)胞。若是想很快就觀察到成瘤情況皱碘，可以接種多一點询一，反之，少一點
在荷瘤裸鼠動物模型建立以后癌椿，可以觀察的指標(biāo)很多健蕊，比如腫瘤體積（長寬寬0.5）**，繪制成瘤曲線
裸鼠存活時間
處理前后瘤體大小如失，重量
處理前后腫瘤的HE染色或者免疫組化染色 绊诲，根據(jù)前期的實驗設(shè)計來選擇
乳房脂肪墊移植瘤：
細(xì)胞系：
ER（+）：MCF-7（來源：乳腺腺癌），ZR-75-30（乳腺導(dǎo)管癌）褪贵，T47D（乳腺導(dǎo)管癌）掂之，ZR-75（乳腺腺癌）。
ER（-）：MDA-MB-435s（乳腺導(dǎo)管癌）脆丁，MDA-MB-435（乳腺導(dǎo)管癌）世舰，SK-BR-3 （乳腺腺癌），MDA-MB-231（乳腺腺癌）槽卫，MDA-MB-453（乳腺腺癌）跟压。
作為乳腺癌細(xì)胞移植裸鼠的選擇, 推薦：ER（+）選用MCF-7和ZR-75-30；ER（—）選用MDA-MB-435s和MDA-MB-231歼培。這幾株細(xì)胞成瘤率較高震蒋。
注意事項
①將HBC細(xì)胞植入裸鼠的乳房脂肪墊（Mammary fad pat，mfp）躲庄，又稱原位移植（相反則稱異位移植）查剖，不僅可以提高乳腺癌細(xì)胞的成瘤率而且可以增加轉(zhuǎn)移的發(fā)生率。
②促進(jìn)腫瘤細(xì)胞在裸鼠體內(nèi)形成腫瘤的方法是將癌細(xì)胞和Matrigel或成纖維細(xì)胞混合后注入裸鼠體內(nèi)噪窘。Matrigel是由層粘連蛋白笋庄、Ⅳ型膠原纖維、硫酸乙酰肝素和巢蛋白組成的混合物，在4℃為液體直砂，而在37℃則聚合形成一種凝膠菌仁。
③裸鼠的選擇
Balb/c、 nu/nu雌性裸鼠 (SPF級)静暂，4-6周齡济丘，體重18-22g，預(yù)實驗選用Balb/c小鼠洽蛀，用于mfp的解剖闪盔。
參考：
《細(xì)胞與分子生物學(xué)常用技術(shù)》
https://zhuanlan.zhihu.com/p/478791842
https://www.jingege.wang/2020/06/06/%E8%82%BF%E7%98%A4%E7%A0%94%E7%A9%B6%E5%BF%85%E7%94%A8%E6%A8%A1%E5%9E%8B%EF%BC%9A%E8%BD%AC%E7%A7%BB%E5%8A%A8%E7%89%A9%E6%A8%A1%E5%9E%8B%E7%9A%84%E6%9E%84%E5%BB%BA%EF%BC%88%E4%B8%8A%EF%BC%89%EF%BC%88/
