骨髓檢查:血液病理學入門

患者外周血細胞計數(shù)減少江咳,而且外周血涂片檢查發(fā)現(xiàn)了一些幼稚細胞。

但病因不明钥庇。

如何進一步檢查牍鞠?

骨髓病理學檢查,是血液科醫(yī)生最常開出的檢查單评姨。


骨髓檢查都有哪幾部分組成难述?如何進行深入分析?

下面的內(nèi)容會為你照亮骨髓檢查這個 "黑匣子"吐句。


基礎知識

在病人準備胁后、鎮(zhèn)靜和手術(shù)操作之后,可獲取四種骨髓標本類型:

骨髓穿刺涂片(Bone marrow aspirate smear)

骨髓常規(guī)活檢(Bone marrow core biopsy)

骨髓血凝塊部分切片活檢 ( Bone marrow clot particle)

骨髓活檢滾片檢查(Bone marrow touch imprint)


四種不同的標本類型各有其優(yōu)勢和局限性嗦枢。它們提供的信息有所重疊攀芯,但可以對骨髓細胞形態(tài)結(jié)構(gòu)、免疫染色和細胞流式結(jié)果進行綜合分析文虏,也可以對特定結(jié)果進行分析侣诺。

骨髓穿刺涂片和骨髓常規(guī)活檢是最常進行的2種檢查類型,它們之間優(yōu)勢和劣勢比較的表格如下:

表1. 骨髓穿刺和常規(guī)活檢優(yōu)劣勢比較

骨髓穿刺:可獲得不同類型細胞的比例氧秘,如粒系年鸳、紅系、淋巴系丸相、單核系細胞的比例搔确,涂片所見巨核細胞數(shù)量等,但不包括骨髓固態(tài)部分,不能代表所有細胞膳算。

骨髓穿刺涂片檢查與骨髓常規(guī)活檢在診斷上各有側(cè)重座硕。

骨髓涂片主要用來觀察細胞形態(tài)與細胞比例,而骨髓常規(guī)活檢由于取出的材料保持了完整的骨髓組織結(jié)構(gòu)畦幢,能了解骨髓細胞的成分及原始細胞分布狀況坎吻。

而且,骨髓常規(guī)活檢能觀察骨髓組織結(jié)構(gòu)宇葱、增生程度瘦真、細胞分布、細胞浸潤黍瞧、纖維增生以及間質(zhì)改變诸尽,便于做出病理診斷,對血液系統(tǒng)疾病的診斷印颤、鑒別診斷您机、治療方案的選擇、療效評價以及預后判斷均具有重要意義年局。

另外际看,骨髓常規(guī)活檢對骨髓壞死、骨髓脂肪變矢否、骨髓纖維化等也具有重要意義仲闽。

1. 骨髓穿刺涂片(Bone marrow aspirate smear)

骨髓穿刺,是應用負壓注射器輕輕抽吸大約5毫升深紅色的半液態(tài)骨髓腔內(nèi)容物僵朗。

將穿刺液立即涂片于1至10塊預先準備好的玻璃載玻片上赖欣。然后進行染色,通常是Giemsa染色劑验庙。

骨髓穿刺涂片可以評估細胞形態(tài)(細胞外觀)顶吮、細胞譜系(通過形態(tài)和表型,判斷它們是什么血細胞譜系)粪薛,細胞分類計數(shù)(總共計數(shù)200至500個細胞)和不同譜系細胞的比例悴了。

由于骨髓穿刺物是 "液體 "樣本,不需要進行脫鈣處理违寿,可以涂在載玻片上快速染色让禀,也能用于流式細胞分析和分子水平分析。

圖1. 骨髓穿刺涂片. 圖A. 20倍放大照片陨界,可見深嗜堿性細胞以及巨核細胞(黃色圓圈內(nèi)). 圖B.? 1000倍放大照片,可見粒細胞前體(細箭頭)和紅細胞(粗箭頭)

2. 骨髓常規(guī)活檢(Bone marrow core biopsy)

骨髓常規(guī)活檢痛阻,是用一個特制的穿刺針菌瘪,取一米粒大小的骨髓組織,用作病理學檢查。其操作方法與骨髓穿刺術(shù)相同俏扩,在操作前會打麻藥糜工,全過程約需幾分鐘。

將骨髓組織放入裝有固定劑(通常是福爾馬林)的容器中录淡,送往實驗室進行處理捌木。骨髓標本固定在石蠟中并制備切片。由于需要脫鈣和固定嫉戚,骨髓常規(guī)活檢切片通常要到第二天才可以進行觀察分析刨裆。

圖2. 骨髓活檢圖片. 100倍放大照片,可以觀察到骨小梁(*)的三系造血功能彬檀,包括巨核細胞帆啃、粒細胞前體細胞和紅細胞造血島。

骨髓常規(guī)活檢對整體評估骨髓細胞窍帝、三系造血狀態(tài)和骨髓結(jié)構(gòu)非常有價值努潘。

對骨髓常規(guī)活檢切片進行免疫組化(IHC)染色(對細胞進行表型分析),以及H&E染色(對骨髓組織進行分析)坤学。

骨髓常規(guī)活檢切片可以評估骨髓的結(jié)構(gòu)疯坤、纖維化、淋巴細胞深浮、髓系細胞成熟程度压怠,以及其他潛在病理改變。骨髓常規(guī)活檢是二維切片標本略号,切片上的細胞也是二維的刑峡,不適合評估細胞發(fā)育不良(骨髓穿刺標本更適合)。

骨髓常規(guī)活檢對分析 "干抽"(指在骨髓手術(shù)中不能抽出液態(tài)骨髓)的原因非常有用玄柠。

骨髓常規(guī)活檢可以顯示骨髓纖維化突梦、凝聚性漿細胞或轉(zhuǎn)移性腫瘤,這些都是導致骨髓干抽的可能原因羽利。


3. 骨髓血凝塊部分切片活檢( Bone marrow clot particle)

骨髓液比血液更粘稠宫患,如果沒有抗凝劑,紅細胞和血小板很快會形成血凝塊这弧。

在將骨髓液標本移至含有抗凝劑的容器之前娃闲,部分骨髓液可能已經(jīng)凝固。

將這部分凝固的標本放入福爾馬林中固定匾浪,石蠟包埋和切片后皇帮,進行組織學檢查。這個過程即是骨髓血凝塊部分切片活檢蛋辈。

骨髓血凝塊部分切片也不需要進行脫鈣處理属拾,因此處理周期比較短将谊。

圖3. 骨髓血凝塊H&E染色圖片.? A. 20倍放大圖片,可見大量紅細胞渐白。B) 600倍放大圖片尊浓,可觀察到三系造血細胞。

在骨髓血凝塊切片中纯衍,可以觀察到骨髓造血微環(huán)境的情況栋齿。

當骨髓常規(guī)活檢不理想,比如襟诸,因骨髓纖維化發(fā)生干抽瓦堵,或不能提供足夠的形態(tài)學、結(jié)構(gòu)励堡、細胞構(gòu)成和造血細胞等信息時谷丸,骨髓血凝塊活檢就非常有價值。

骨髓血凝塊切片與骨髓常規(guī)活檢一樣应结,可進行免疫組化染色刨疼。

另外,作為保留骨髓微環(huán)境 "造血島嶼 "的二維切片鹅龄,骨髓血凝塊切片也可以采用骨髓常規(guī)活檢的染色分析揩慕。

骨髓成分的免疫表型分析是進一步診斷的關(guān)鍵。

骨髓活檢和血凝塊的二維固定組織標本很容易用免疫組化方法進行染色扮休,而骨髓穿刺液中的三維細胞則可以用流式細胞儀進行評估(如圖4)迎卤。

圖4. 造血細胞的表型分析方法


4. 骨髓活檢滾片檢查(Bone marrow touch imprint)

骨髓活檢滾片檢查,是在獲得骨髓常規(guī)活檢組織后玷坠,立即將骨髓組織在玻璃載玻片上 "滾片"幾次蜗搔,然后進行染色和分析。

在形態(tài)學上的發(fā)現(xiàn)上八堡,骨髓活檢滾片檢查與骨髓穿刺涂片非常相似樟凄,但前者只代表骨髓活檢組織“滾片”下來的細胞。

由于骨髓組織細胞密集兄渺,滾片后玻片上會留下許多細胞缝龄。對預制滾片進行染色和處理的流程,與骨髓活檢組織的處理過程非常相似挂谍。

骨髓活檢滾片不含有骨髓基質(zhì)叔壤,只含有骨髓細胞。

骨髓活檢滾片可以用于對骨髓細胞譜系和細胞形態(tài)進行染色和評估口叙,其結(jié)果與骨髓穿刺和骨髓常規(guī)活檢結(jié)果具有高度相關(guān)性炼绘。

與骨髓穿刺涂片類似,骨髓活檢滾片檢查處理時間短(不需要脫鈣)妄田,并可以獲得很好的細胞形態(tài)學信息俺亮。

總結(jié)

骨髓檢查可以反映疾病進展過程中骨髓的動態(tài)情況仗哨,為臨床診斷和治療計劃提供重要的參考信息。

即使嚴格按照操作程序铅辞,也難免遇到采集骨髓標本不充足,進而信息不全面的情況萨醒。

雖然會有一部分是冗余信息斟珊,四種骨髓檢測的結(jié)果對疾病診斷和評估具有互補作用和互相印證的作用。

ps:

感謝我的本科同學張萍對本文提供修改建議富纸。

張萍就職于浙江省寧波市第一醫(yī)院血液科囤踩,在造血干細胞移植方面積累了豐富的臨床經(jīng)驗。

本文主要參考美國血液學協(xié)會(ASH)網(wǎng)站文章:Demystifying the Bone Marrow Biopsy: A Hematopathology Primer晓褪。

原文鏈接:https://www.hematology.org/education/trainees/fellows/trainee-news/2021/demystifying-the-bone-marrow-biopsy-a-hematopathology-primer

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