人白血病 T 淋巴細(xì)胞 Jurkat, Clone E6-1 由 Schneider 建立口叙，來(lái)源于一 個(gè) 14 歲的男孩的外周血。該克隆是 Jurkat-FHCRC 細(xì)胞株的一個(gè)克屡置搿（Jurkat 的一個(gè)衍生株），經(jīng)佛波酯(phorbol esters)和外源凝集素（lectins）或抗 T3 單克 隆抗體（需要兩種物質(zhì)共同誘導(dǎo)）誘導(dǎo)后可產(chǎn)生大量 IL-2。
Jurkat細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞忙菠，是用于研究急性T細(xì)胞白血病，T細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)以及易感病毒進(jìn)入的各種趨化因子受體纺弊，特別是HIV的表達(dá)的永生化人T淋巴細(xì)胞系牛欢。它在生物學(xué)研究上具有十分廣泛的應(yīng)用，比如應(yīng)用Jurkat細(xì)胞研究核糖核酸酶P的M1-RNA淆游，探討抗MHCⅡ類分子轉(zhuǎn)錄激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制細(xì)胞表面MHCⅡ類分子的表達(dá)傍睹。
Jurkat細(xì)胞培養(yǎng)注意要點(diǎn)
??Jurkat細(xì)胞為懸浮生長(zhǎng)，理想的狀態(tài)是均勻的成團(tuán)生長(zhǎng)稽犁；
??Jurkat細(xì)胞有密度依賴性焰望，細(xì)胞密度低時(shí)，生長(zhǎng)較慢已亥，培養(yǎng)密度維持在4 ~8×10^5 /mL為宜熊赖；超過(guò)1.0 ×10^6 /mL則需要傳代。
??Jurkat細(xì)胞對(duì)機(jī)械力較敏感虑椎。正常培養(yǎng)時(shí)震鹉，應(yīng)盡量避免吹打力道過(guò)大俱笛。暴力吹打會(huì)使細(xì)胞分化和死細(xì)胞增加。
??血清質(zhì)量差異可能引起細(xì)胞狀態(tài)變化传趾，建議選用高質(zhì)量的胎牛血清迎膜。
??如生長(zhǎng)過(guò)程中觀察到細(xì)胞團(tuán)中心發(fā)黑，代表細(xì)胞團(tuán)過(guò)大浆兰，這個(gè)時(shí)候可以輕柔的吹散較大的細(xì)胞團(tuán)磕仅，但是不用強(qiáng)行吹散成單個(gè)細(xì)胞。
Jurkat細(xì)胞換液
??補(bǔ)液法：培養(yǎng)基變黃時(shí)可補(bǔ)加適量（1~2mL）新鮮培養(yǎng)基簸呈，補(bǔ)加1-2次之后榕订，用離心的方式全部換液，離心1200rpm （約250g）3分鐘蜕便。
??半換液法：以T25瓶子為例劫恒，瓶子里裝有5mL培養(yǎng)基。豎起瓶子靜置一段時(shí)間轿腺，待細(xì)胞沉底两嘴，小心吸出2.5mL的培養(yǎng)基，轉(zhuǎn)移到離心管族壳，離心1200rpm （約250g）3分鐘憔辫，檢查有沒(méi)有沉淀，以免損失細(xì)胞决侈；原瓶補(bǔ)充2.5mL新鮮培養(yǎng)基螺垢，離心管里若有細(xì)胞，則用新鮮培養(yǎng)基重懸后放回原瓶赖歌。
??如果換液后第二天培養(yǎng)基就變得很黃枉圃，同時(shí)鏡下檢查未污染，說(shuō)明細(xì)胞密度大庐冯，應(yīng)該傳代孽亲。
Jurkat細(xì)胞傳代
??搖晃培養(yǎng)瓶，把細(xì)胞搖勻展父，均分到兩個(gè)瓶子里返劲，每瓶再補(bǔ)充等量培養(yǎng)基。
??離心法：離心后計(jì)數(shù)栖茉，按照40-50萬(wàn)細(xì)胞/mL的密度接種到T25瓶里篮绿，瓶中培養(yǎng)基量以5mL為宜。不方便計(jì)數(shù)時(shí)吕漂，按1:2比例傳代亲配。
??死細(xì)胞或細(xì)胞碎片較多的情況下，建議用離心法傳代，離心轉(zhuǎn)速可適當(dāng)降低（推薦800~1000rpm或160~200g）吼虎。
Jurkat細(xì)胞凍存
??由于Jurkat是懸浮細(xì)胞犬钢，更易受到凍存影響，建議加大凍存密度思灰，大約200萬(wàn)-300萬(wàn)/mL為宜玷犹，以提高復(fù)蘇存活率。
??Jurkat細(xì)胞對(duì)凍存溫度比較敏感洒疚，建議凍存后立即轉(zhuǎn)入-80℃冰箱歹颓，長(zhǎng)期保存應(yīng)放在液氮罐中。
??經(jīng)測(cè)試油湖，Jurkat使用非程序降溫凍存液的復(fù)蘇存活率高于程序降溫凍存液晴股，推薦使用HyCyte?一步凍存液（GUCP-R201）。
Jurkat細(xì)胞復(fù)蘇
??Jurkat細(xì)胞復(fù)蘇后通常需要3-5天恢復(fù)狀態(tài)肺魁，建議復(fù)蘇后48小時(shí)內(nèi)不要進(jìn)行操作。
