仍然還是那句話控汉，如果想要快速學(xué)習(xí)一門新的技術(shù)，了解知識(shí)背景钟病，看中文文章更好萧恕，如果有碩博士畢業(yè)論文那則是最佳。
說到基因編輯技術(shù)肠阱，我一開始只知道
（A）CRISPR/Cas9 http://www.reibang.com/p/b9d2a7203e6c
在經(jīng)過一系列掙扎之后票唆，好不容易看懂了CRISPR/Cas9的原理，冷不丁冒出來一個(gè)（B）Cre/LoxP條件性敲除系統(tǒng)http://www.reibang.com/p/ccae8b289cab屹徘，到今天走趋，發(fā)現(xiàn)還有一個(gè)（C）FLP/FRT重組系統(tǒng)。
果然學(xué)習(xí)就跟人生一樣噪伊，并不是我猜中了開頭簿煌，沒料到結(jié)尾，其實(shí)是開頭也沒猜對(duì)鉴吹，過程更加意外姨伟，結(jié)尾至今還沒看到。
1. 背景
參考資料
https://zhuanlan.zhihu.com/p/29141696
http://c.biomart.cn/bioraylab/node/314
先復(fù)習(xí)一下CRISPR中的知識(shí)點(diǎn)豆励。
DNA雙鏈斷裂后夺荒，主要通過易錯(cuò)性的非同源末端連接（Non -homologous end joining, NHEJ）以及高保真性的同源重組（homologous recombination HR）進(jìn)行修復(fù)，最終會(huì)造成基因敲入（knock in）良蒸、敲除（knock out）技扼、缺失（deletion）及基因修飾（gene modification）這幾種類型。
同源重組（百度百科）：是指發(fā)生在非[姐妹染色單體（sister chromatin) 之間或同一染色體上含有同源序列的DNA分子之間或分子之內(nèi)的重新組合嫩痰』此ぃ看圖好了
非同源末端連接：是一種修復(fù)雙股DNA斷裂的方法。之所以是非同源性始赎，是因?yàn)閿嗔训膬啥问潜恢苯咏由虾统龋鞘褂昧艘粋€(gè)同源的模板。與之對(duì)比的同源性重組則需要一個(gè)同源序列來引導(dǎo)修復(fù)造垛∧д校“非同源性末端接合”這個(gè)詞是由Moore和Haber于1996年首創(chuàng)。
位點(diǎn)特異性重組：既然叫點(diǎn)五辽，則是小范圍內(nèi)的重組办斑。
2. 什么是FLP/FRT
位點(diǎn)特異性重組（site-specific recombination）技術(shù)是近 20 年來發(fā)展起來的一項(xiàng)重要的分子生物學(xué)技術(shù)，該系統(tǒng)主要是通過借助能夠識(shí)別特異性位點(diǎn)的重組酶（site-specific recombinase杆逗，SSR）乡翅，在基因組上對(duì)外源 DNA 進(jìn)行操作，可以實(shí)現(xiàn)基因的置換罪郊、倒置和刪除等蠕蚜。FLP/FRT 系統(tǒng)就屬于位點(diǎn)特異性重組系統(tǒng)的一種。
FLP是一個(gè)重組酶（flippase悔橄，F(xiàn)lp）靶累，類似于Cre，它識(shí)別的位點(diǎn)是FRT癣疟，當(dāng)FRT在同一條DNA上且方向相同時(shí)挣柬，則兩FRT位點(diǎn)之間的基因則被刪除；FRT方向相反睛挚，則基因被倒轉(zhuǎn)邪蛔。
FRT：short flippase recognition target (FRT)
參考文獻(xiàn)：
肖雪賓. FLP 重組酶表達(dá)載體的構(gòu)建及其在 FLP/FRT 系統(tǒng)中的應(yīng)用[D]. 吉林大學(xué), 2012.
