首先座每,我們需要知道的是冷凝水影響菌種的生長嗎讥巡?答案是肯定的撇簿,如果母種培養(yǎng)基帶有比較多的冷凝水惋砂,那么都不會太好鞠绰。怎么可以避免這種情況困檩?如何才能做得更好祠挫?
其原因可能有以下三種:
1. 培養(yǎng)基較熱時就密封蓋板,導(dǎo)致水蒸氣在蓋板上凝結(jié)悼沿。制好的瓊脂培養(yǎng)基上面有水滴等舔,主要是在擱制斜面過程中,室內(nèi)溫度與管子溫度之間的溫差太大而造成的糟趾,特別在冬天更易產(chǎn)生慌植。斜面在擱制過程中,試管外壁降溫快义郑,而里面的瓊脂降溫慢蝶柿,就是凝固了的瓊脂還是比室溫高。管內(nèi)的熱空氣碰到冷壁就會產(chǎn)生大量的冷凝水非驮,附在凝固的瓊脂上交汤,如果是少量水,放在加溫的培養(yǎng)室(箱)內(nèi)1-2天就會消失劫笙,如水分太多芙扎,只能另制新的解決方法。在倒制培養(yǎng)基平板時邀摆,將倒制的平板迅速的摞在一起纵顾;如果條件允許,可以在最上面的培養(yǎng)皿內(nèi)倒上半培養(yǎng)皿的熱水栋盹,靜置至平板培養(yǎng)基凝固施逾。除了極個別平板以外(如果最上面放置半培養(yǎng)皿的熱水,則所有的培養(yǎng)皿平板都不會出現(xiàn)水蒸氣附著在皿蓋上的情況)例获,所有的平板蓋上面都沒有水蒸氣產(chǎn)生汉额,非常利于后續(xù)試驗(yàn)的進(jìn)行,大大提高了實(shí)驗(yàn)效率榨汤。
2. 組培室內(nèi)溫度偏高蠕搜,導(dǎo)致培養(yǎng)基中水分蒸發(fā)∈蘸荆可以適當(dāng)降低房間溫度妓灌。
3.?瓊脂平板表面或內(nèi)部有微生物生長轨蛤,呼吸作用等代謝產(chǎn)生水分,并且使得培養(yǎng)基內(nèi)部溫度升高虫埂,水分蒸發(fā)祥山,凝結(jié)在平板上。針對該原因掉伏,可優(yōu)化生產(chǎn)工藝,及改進(jìn)型的培養(yǎng)基配方,附加干燥劑,在密封的包裝內(nèi)部形成水汽的動態(tài)平衡,很好地避免冷凝水的形成缝呕。(其本上因?yàn)樵?原因的使用的皿需要進(jìn)行CAPA調(diào)查了。)?
針對有水滴現(xiàn)象斧散,可以通過下述操作供常,盡可能地避免不利影響:
一、特別要注意消毒滅菌后的操作鸡捐,待壓力自動降到“0”后栈暇,先打開通氣閥,把剩余的壓力減壓后闯参,再打開壓力鍋蓋瞻鹏,但不拿走,在鍋上移開一道縫隙鹿寨,讓鍋內(nèi)的熱氣涌出新博,讓棉塞和試管內(nèi)的水蒸氣先蒸發(fā)一部分。此時的試管溫度在100℃左右脚草,不能馬上拿出赫悄,約半小時后或1小時左右,此時的棉塞已烘干馏慨、試管溫度已下降到60-70℃埂淮,再拿出試管擱至斜面,而且試管要擱在小棉墊上写隶,上面再蓋小棉被(夏天可鋪蓋報(bào)紙等)或者放在加溫的培養(yǎng)室(箱)內(nèi)擱更理想倔撞。
二、母種培養(yǎng)基滅菌完畢慕趴,取出擺放斜面后痪蝇,可用多層厚厚的干凈紗布等將剛擺好的試管培養(yǎng)基蓋好,一是可以防止在冷卻過程中有灰塵降落在試管培養(yǎng)基表面冕房,影響以后的無菌操作躏啰;二是可以防止在冷卻過程中,玻璃試管內(nèi)外溫差過大耙册,盡量降低冷凝水的形成给僵。實(shí)際上,這一方法還不能完全杜絕冷凝水的形成详拙;
三帝际、如用硅膠塞封試管口蔓同,可提前一周將母種培養(yǎng)基做好。如果用棉塞封口胡本,時間可適當(dāng)縮短牌柄,這樣經(jīng)過一周左右的靜置畸悬,母種培養(yǎng)基管壁和斜面上的冷凝水可基本蒸發(fā)掉侧甫,在使用時就會非常方便。這一點(diǎn)可能有很多人反對蹋宦,因?yàn)楹芏嘟炭茣险f披粟,母種培養(yǎng)基要現(xiàn)做現(xiàn)用,或盡快使用冷冗,否則容易被雜菌污染守屉,其實(shí)沒有那么嚴(yán)重,只要母種培養(yǎng)基滅菌徹底蒿辙,放置時間再長也沒有什么問題拇泛,這一點(diǎn)大可放心。不過在放置時要注意環(huán)境衛(wèi)生思灌,培養(yǎng)基試管口要稍微抬起放置俺叭,不能放在灰塵很多的地方,試管口可以用牛皮紙包好泰偿,特別是棉塞封口的培養(yǎng)基不能密封保存熄守,防止棉塞滋生雜菌,這一點(diǎn)很重要耗跛。
如果實(shí)在要急用培養(yǎng)基裕照,帶冷凝水接種也可以,有可能在菌絲生長時會受到冷凝水的影響调塌,生長暫時可能表現(xiàn)不良晋南,不過沒有問題,隨著水份的蒸發(fā)和菌絲的快速生長羔砾,慢慢就會表現(xiàn)正常负间。這里提幾個細(xì)節(jié),如果帶水接種蜒茄,在母種培養(yǎng)階段唉擂,母種培養(yǎng)基的口部要稍微抬起,防止冷凝水流到管口檀葛,打濕棉塞或硅膠塞玩祟,這個會對菌種的質(zhì)量產(chǎn)生不良影響;如果冷凝水太多屿聋,可在接種時倒掉空扎,這時要注意無菌操作藏鹊,不能讓冷凝水回流,倒完后转锈,繼續(xù)保持傾斜姿勢盘寡,在酒精燈火焰附近將管口灼燒后,才能開始接種操作撮慨,嚴(yán)防管口帶菌竿痰,隨水回流進(jìn)入管內(nèi),造成不必要的污染砌溺;也可將管口先灼燒滅菌后影涉,再將水倒掉。