International Journal of Biological Macromolecules:DAP-seq助力揭示轉錄因子在草地貪夜蛾Bt抗性中重要作用

2024年4月6日辐宾,武漢生物工程學院生命科學與技術學院劉磊磊課題組在International Journal of Biological Macromolecules(中科院一區(qū),影響因子8.2)期刊在線發(fā)表了“Contributionof the transcription factor SfGATAe to Bt Cry toxin resistance in?Spodoptera?frugiperda through reduction of ABCC2 expression”的研究論文。該團隊利用DAP-seq等技術闡明了轉錄因子SfGATAe對毒素受體基因SfABCC2表達的調控機制,并全面闡釋了這種轉錄調控機制對草地貪夜蛾Bt抗性產生的重要影響他匪。這項研究為探索SfGATAe在抗性機制中的作用湃累,并為開發(fā)以SfGATAe為靶點的生物農藥奠定了重要理論基礎栅干。

ABCC2轉運蛋白屬于多次跨膜蛋白,其不同情況的突變能引起機體對Bt毒素不同程度的抗性宏榕,SfABCC2轉運蛋白介導的草地貪夜蛾對Bt毒素抗性研究具有重要的意義拓诸。而鱗翅目昆蟲中特異性毒素受體的轉錄水平調控與昆蟲Bt抗性關系知之甚少,GATA轉錄因子屬于鋅指蛋白家族麻昼,包含位于NH2末端區(qū)域的轉錄激活域奠支、兩個高度保守的鋅指區(qū)域、一個核定位信號序列和一個未知功能的COOH 末端域抚芦,GATAe 通過調節(jié)中腸組織特異性基因的表達倍谜,參與中腸干細胞的發(fā)育和分化迈螟。

圖1 草地貪夜蛾卵巢細胞系中的亞細胞定位分析

該研究團隊運用了DAP-seq技術,以高通量尔崔、高分辨率的鑒定了SfGATAe的直接轉錄結合位點答毫。該研究共識別出了19,740個結合峰,其中1,507個位點位于啟動區(qū)季春。該研究通過構建一系列截短載體洗搂,并利用雙熒光素報告系統(tǒng)評估了每個構建對報告基因的驅動能力,并成功鑒定了調控元件的關鍵區(qū)域载弄。通過酵母單雜交實驗蚕脏、DNA pull down和定點突變等實驗,確定了轉錄因子SfGATAe在ABCC2靶基因中的核心控制位點侦锯。

圖2 SfGATAe 與ABCC2受體啟動子結合關鍵區(qū)域鑒定
圖3 SfGATAe結合啟動子區(qū)的DNA基序鑒定

轉錄因子SfGATAe在草地貪夜蛾時空表達分析表明驼鞭,SfGATAe的在中腸表達水平都顯著高于非中腸器官,中腸中SfGATAe的增強表達可能表明其參與調節(jié)昆蟲代謝或解毒過程尺碰,尤其在調控Cry1Ac毒素受體ABCC2方面的重要作用挣棕。

圖4 SfGATAe在草地貪夜蛾不同發(fā)育階段和各部位時空表達模式

SfGATAe表達水平降低導致SfABCC2受體表達減少,進而導致幼蟲對Cry1Ac毒素的敏感性降低亲桥。SfGATAe與SfABCC2基因啟動子內的關鍵結合位點的結合調節(jié)了SfABCC2蛋白的表達洛心。SfGATAe在腸道內表現(xiàn)出高水平表達,敲降SfGATAe表達题篷,幼蟲體內SfABCC2的表達降低词身。該研究加強了對鱗翅目害蟲中ABCC2的后轉錄調控的理解,為進一步探索SfGATAe在調控Cry1Ac和其他殺蟲劑抗性機制中的功能奠定基礎番枚。

圖5 抑制SfGATAe表達量減少ABCC2表達水平導致草地貪夜蛾對Bt抗性



原文鏈接:https://doi.org/10.1016/j.ijbiomac.2024.131459

?著作權歸作者所有,轉載或內容合作請聯(lián)系作者
  • 序言:七十年代末法严,一起剝皮案震驚了整個濱河市,隨后出現(xiàn)的幾起案子葫笼,更是在濱河造成了極大的恐慌深啤,老刑警劉巖,帶你破解...
    沈念sama閱讀 206,126評論 6 481
  • 序言:濱河連續(xù)發(fā)生了三起死亡事件路星,死亡現(xiàn)場離奇詭異溯街,居然都是意外死亡,警方通過查閱死者的電腦和手機洋丐,發(fā)現(xiàn)死者居然都...
    沈念sama閱讀 88,254評論 2 382
  • 文/潘曉璐 我一進店門呈昔,熙熙樓的掌柜王于貴愁眉苦臉地迎上來,“玉大人友绝,你說我怎么就攤上這事堤尾。” “怎么了九榔?”我有些...
    開封第一講書人閱讀 152,445評論 0 341
  • 文/不壞的土叔 我叫張陵哀峻,是天一觀的道長涡相。 經常有香客問我,道長剩蟀,這世上最難降的妖魔是什么催蝗? 我笑而不...
    開封第一講書人閱讀 55,185評論 1 278
  • 正文 為了忘掉前任,我火速辦了婚禮育特,結果婚禮上丙号,老公的妹妹穿的比我還像新娘。我一直安慰自己缰冤,他們只是感情好犬缨,可當我...
    茶點故事閱讀 64,178評論 5 371
  • 文/花漫 我一把揭開白布。 她就那樣靜靜地躺著棉浸,像睡著了一般怀薛。 火紅的嫁衣襯著肌膚如雪。 梳的紋絲不亂的頭發(fā)上迷郑,一...
    開封第一講書人閱讀 48,970評論 1 284
  • 那天枝恋,我揣著相機與錄音,去河邊找鬼嗡害。 笑死焚碌,一個胖子當著我的面吹牛,可吹牛的內容都是我干的霸妹。 我是一名探鬼主播十电,決...
    沈念sama閱讀 38,276評論 3 399
  • 文/蒼蘭香墨 我猛地睜開眼,長吁一口氣:“原來是場噩夢啊……” “哼叹螟!你這毒婦竟也來了鹃骂?” 一聲冷哼從身側響起,我...
    開封第一講書人閱讀 36,927評論 0 259
  • 序言:老撾萬榮一對情侶失蹤首妖,失蹤者是張志新(化名)和其女友劉穎偎漫,沒想到半個月后爷恳,有當?shù)厝嗽跇淞掷锇l(fā)現(xiàn)了一具尸體有缆,經...
    沈念sama閱讀 43,400評論 1 300
  • 正文 獨居荒郊野嶺守林人離奇死亡,尸身上長有42處帶血的膿包…… 初始之章·張勛 以下內容為張勛視角 年9月15日...
    茶點故事閱讀 35,883評論 2 323
  • 正文 我和宋清朗相戀三年温亲,在試婚紗的時候發(fā)現(xiàn)自己被綠了棚壁。 大學時的朋友給我發(fā)了我未婚夫和他白月光在一起吃飯的照片。...
    茶點故事閱讀 37,997評論 1 333
  • 序言:一個原本活蹦亂跳的男人離奇死亡栈虚,死狀恐怖袖外,靈堂內的尸體忽然破棺而出,到底是詐尸還是另有隱情魂务,我是刑警寧澤曼验,帶...
    沈念sama閱讀 33,646評論 4 322
  • 正文 年R本政府宣布泌射,位于F島的核電站,受9級特大地震影響鬓照,放射性物質發(fā)生泄漏熔酷。R本人自食惡果不足惜,卻給世界環(huán)境...
    茶點故事閱讀 39,213評論 3 307
  • 文/蒙蒙 一豺裆、第九天 我趴在偏房一處隱蔽的房頂上張望拒秘。 院中可真熱鬧,春花似錦臭猜、人聲如沸躺酒。這莊子的主人今日做“春日...
    開封第一講書人閱讀 30,204評論 0 19
  • 文/蒼蘭香墨 我抬頭看了看天上的太陽羹应。三九已至,卻和暖如春次屠,著一層夾襖步出監(jiān)牢的瞬間量愧,已是汗流浹背。 一陣腳步聲響...
    開封第一講書人閱讀 31,423評論 1 260
  • 我被黑心中介騙來泰國打工帅矗, 沒想到剛下飛機就差點兒被人妖公主榨干…… 1. 我叫王不留偎肃,地道東北人。 一個月前我還...
    沈念sama閱讀 45,423評論 2 352
  • 正文 我出身青樓浑此,卻偏偏與公主長得像累颂,于是被迫代替她去往敵國和親。 傳聞我的和親對象是個殘疾皇子凛俱,可洞房花燭夜當晚...
    茶點故事閱讀 42,722評論 2 345

推薦閱讀更多精彩內容