任何一個(gè)抗體藥物的開發(fā)和生產(chǎn)都是從細(xì)胞株開始的焕参，細(xì)胞建庫(kù)是細(xì)胞株管理的關(guān)鍵一環(huán)，其應(yīng)在符合中國(guó)現(xiàn)行《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》的條件下制備油额。目前叠纷，世界上較權(quán)威的細(xì)胞庫(kù)機(jī)構(gòu)或者研究院都采用三級(jí)細(xì)胞庫(kù)管理模式，即：原始細(xì)胞庫(kù)（PCB）潦嘶，主細(xì)胞庫(kù)（MCB）涩嚣，工作細(xì)胞庫(kù)（WCB）。在某些特殊情況下掂僵，也可采用細(xì)胞種子和主細(xì)胞庫(kù)二級(jí)管理航厚，但需要得到國(guó)務(wù)院藥品監(jiān)督部門的批準(zhǔn)。三級(jí)細(xì)胞庫(kù)的建立可為生物制品的生產(chǎn)提供檢定合格锰蓬、質(zhì)量相同幔睬、能持續(xù)穩(wěn)定傳代的細(xì)胞，灌裝設(shè)備AbioFill V100可通過(guò)自動(dòng)化操作芹扭，輕松實(shí)現(xiàn)大批量細(xì)胞灌裝麻顶。
上期給大家分享了AbioFill V100可完美用于MSC細(xì)胞的自動(dòng)化灌裝【細(xì)胞灌裝】AbioFill V100助力MSC細(xì)胞自動(dòng)化灌裝，今天給大家從用戶角度分享AbioFill V100如何自動(dòng)化灌裝CHO細(xì)胞舱卡，助力細(xì)胞株建庫(kù)辅肾，并多維度評(píng)估設(shè)備灌裝CHO細(xì)胞后的體積、密度轮锥、活率等參數(shù)與手動(dòng)灌裝相比的優(yōu)勢(shì)矫钓。
CHO細(xì)胞灌裝實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
01實(shí)驗(yàn)材料：
細(xì)胞：CHO細(xì)胞
凍存液：培養(yǎng)基+DMSO
凍存管：Corning 430659（2ml,Ex）
程序凍存盒等
02儀器設(shè)備：
灌裝系統(tǒng)：AbioFill V100細(xì)胞灌裝系統(tǒng)
03實(shí)驗(yàn)過(guò)程
（1）參數(shù)設(shè)置
灌注模式：開蓋-灌注-封蓋
灌注流速：350μL/s
灌注體積：1000μL
（2）安裝一次性灌裝管
采用CPC快接頭將一次性灌裝管與裝有樣品的搖瓶進(jìn)行對(duì)接，避免操作過(guò)程中細(xì)胞樣品被污染舍杜。
（3）凍存管編號(hào)并安裝
為后續(xù)分析所取樣品具有代表性份汗，對(duì)凍存管進(jìn)行編號(hào)，共灌注120支蝴簇，選取每板A1杯活、D6孔進(jìn)行測(cè)試。
（4）灌裝
04結(jié)果分析
本實(shí)驗(yàn)采用手動(dòng)灌裝細(xì)胞為對(duì)照熬词，在灌注前對(duì)細(xì)胞樣品進(jìn)行計(jì)數(shù)旁钧，了解其活率密度，在灌注結(jié)束后每板選取A1互拾、D6孔（共10支樣品）進(jìn)行活率歪今、密度以及體積測(cè)試⊙湛螅活率及密度測(cè)試為了評(píng)估設(shè)備對(duì)細(xì)胞樣品是否存在損傷寄猩，而體積測(cè)試是為了評(píng)估設(shè)備的灌注精準(zhǔn)度。灌注后的樣品按照常規(guī)方式進(jìn)行凍存骑疆，一周后田篇，將樣品進(jìn)行復(fù)蘇替废，復(fù)蘇后進(jìn)行活率密度計(jì)數(shù)（數(shù)據(jù)未展示），并在復(fù)蘇后第三天再進(jìn)行活率密度測(cè)試并計(jì)算倍增時(shí)間（DT）泊柬，評(píng)估設(shè)備是否影響細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)椎镣。
手動(dòng)與設(shè)備法灌注前后及復(fù)蘇D3細(xì)胞密度、活率兽赁、體積與DT對(duì)比表
手動(dòng)與設(shè)備法灌注前后及復(fù)蘇D3細(xì)胞密度與活率對(duì)比圖
從結(jié)果可以看出灌注前后：AUTO(設(shè)備灌裝)和Manual(手動(dòng)灌裝)組內(nèi)無(wú)差異状答，組間相比AUTO組細(xì)胞密度、灌裝體積的CV值比Manual組低刀崖；兩組細(xì)胞活率CV值差異較小惊科。在復(fù)蘇D3：AUTO和Manual組間相比，AUTO組密度的CV值比Manual組低10.9%亮钦；活率CV值比Manual組低4.5%馆截；從DT上看AUTO組和Manual組無(wú)明顯差異，證實(shí)灌裝過(guò)程對(duì)細(xì)胞無(wú)損傷或悲，不會(huì)改變細(xì)胞增殖規(guī)律孙咪，灌裝過(guò)程均無(wú)染菌、總體上結(jié)果表現(xiàn)良好巡语。本次測(cè)試表明灌注前后翎蹈、凍存復(fù)蘇后AUTO表現(xiàn)均優(yōu)于手動(dòng)組。
當(dāng)然男公，AbioFill V100除了可進(jìn)行高產(chǎn)荤堪、穩(wěn)定的三級(jí)細(xì)胞株建庫(kù)的灌裝，還能應(yīng)用于以下場(chǎng)景：
三級(jí)菌株庫(kù)與cGMP級(jí)別的質(zhì)粒庫(kù)/病毒載體庫(kù)的灌裝
質(zhì)粒是細(xì)胞枢赔、基因和疫苗治療的重要工具澄阳，建立穩(wěn)定的三級(jí)菌株庫(kù)對(duì)于質(zhì)粒的生產(chǎn)至關(guān)重要。在基因與細(xì)胞治療領(lǐng)域踏拜，目前大都采用瞬轉(zhuǎn)技術(shù)碎赢，需要大量的GMP級(jí)別的質(zhì)粒；在治療性藥物速梗、疫苗等研究中肮塞，質(zhì)粒可以作為終產(chǎn)品注入人體內(nèi)姻锁，進(jìn)行目標(biāo)基因的表達(dá)枕赵。AbioFill V100可以實(shí)現(xiàn)三級(jí)菌株庫(kù)和質(zhì)粒庫(kù)高效的無(wú)菌灌裝。
生物制劑的凍存管灌裝位隶，如細(xì)胞因子拷窜、病毒液等
生物制劑因具有生物活性所以在保存中有嚴(yán)格的溫度要求，因此灌裝環(huán)節(jié)尤為重要。制劑通常采用體積較小篮昧、與使用劑量匹配的凍存容器赋荆，如不同規(guī)格的凍存管等。
