海能 K1100 全自動凱氏定氮儀配合石墨爐消化和酸堿滴定測定植物含氮量操作規(guī)程
申明：此教程為本人依據(jù)使用經(jīng)驗(yàn)查閱及課題組已有的2018年編寫的植物氮含量測定規(guī)程等資料編寫影兽，如有技術(shù)沖突以廠家官方為準(zhǔn)馆衔。 使用注意事項(xiàng)在使用教程中體現(xiàn)锐想，不單獨(dú)列出滞伟。
1诀诊、本實(shí)驗(yàn)室儀器配置
1.1、海能 SH220N 石墨消解儀（消解樣品）
1.2 AT-710自動酸堿滴定儀（標(biāo)定鹽酸濃度）
1.3义起、海能 K1100 全自動凱氏定氮儀
2蔽挠、操作流程（以測定藥用植物貝母中氮含量為例）
2.1樣品的消解
2.1.1 取 20 支消化管置管架上，其中16支用于樣品測定断箫，精密稱取樣品0.5g（注意：因?yàn)橄芎荛L拂酣，避免樣品粘壁，所以可以考慮把樣品連同稱量紙一起放入消化管中仲义，稱量紙中含氮N量很低婶熬，還有專門適用于消化中使用的低氮稱量紙或稱量船可以考慮），加入濃硫酸10ml（硫酸加入后溶液變黑色埃撵，樣品開始碳化）赵颅，加入硫酸銅：硫酸鉀=1:15 的混合物 6.4g；2支不加樣品暂刘，同樣加入硫酸和硫酸銅硫酸鉀的混合物作為空白對照饺谬，2支精密稱取0.1g的硫酸銨試劑（含氮量為21.2%），用于監(jiān)測儀器測定的穩(wěn)定性如何谣拣。
2.1.2 消化管上加小漏斗，便于回流森缠。
2.1.3 消化時(shí)溫度逐步上升拔鹰，150-180℃贵涵，15min瓷马；240-280℃坟奥，30min树瞭；380-410℃，90min(各個物種可能有差異爱谁，可以調(diào)整)晒喷。
2.1.4 消解完成為淡藍(lán)綠色澄清液（如還有少量黑色固體物質(zhì)說明消化沒完全，還要繼續(xù)消解）访敌，并冷卻至常溫凉敲。
2.2 測定前的試劑配制
2.1.1 混合指示劑： 分別配置1份溶解于95%乙醇的0.1%甲基紅乙醇溶液（1g/L）與5份溶解于 95%乙醇的 0.1%溴甲酚綠乙醇溶液（1g/L），臨用時(shí)才混合。注意：甲基紅難溶爷抓，可以超聲+60℃熱水浴促進(jìn)溶解势决。
2.1.2 硼酸溶液（20g/L）：精密稱取20g的硼酸，用蒸餾水溶解并定容至1000ml蓝撇，按 100:1 比例加入甲基紅—溴甲酚綠混合指示劑果复，混合均勻。
2.1.3 氫氧化鈉溶液（400g/L）：稱取 400g 氫氧化鈉渤昌，用蒸餾水溶解并定容1000ml虽抄。注意：氫氧化鈉要劇烈放熱，因此溶解氫氧化鈉時(shí)可考慮冷水浴或冰水浴独柑，待溶液完全冷卻之后（一般＞1小時(shí)）再定容至1000ml迈窟。
2.1.4 鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液[C(HCL)=0.1000mol/L] ：10ml移液管移取8.4ml 濃鹽酸（鹽酸濃度36%-38%），然后用蒸餾水定容至1000ml容量瓶中忌栅，并進(jìn)行標(biāo)定车酣。本次標(biāo)定采用了AT-710自動酸堿滴定儀：
A、儀器首先設(shè)定一個滴定方法狂秘，程序里設(shè)定滴定終點(diǎn)為pH=3.89(這個終點(diǎn)是怎么確定的呢骇径，具體就是酸堿中和的化學(xué)原理了，可以自己搜索一下者春，之前看過麥田的風(fēng)寫的關(guān)于鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定的博客還挺詳細(xì)的)。
B 先往白色大瓶中加入鹽酸溶液清女，然后purge讓整個系統(tǒng)里充滿鹽酸钱烟，具體如下
C然后再在燒杯中加入碳酸鈉溶液（最好加入剛才配置的甲基紅和溴甲酚綠的混合指示劑，可以肉眼判斷一下AT-710滴定的準(zhǔn)不準(zhǔn)嫡丙，雙重保險(xiǎn)嘛）拴袭。
碳酸鈉溶液配置參考“GBT601-2016化學(xué)試劑標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液的制備”中對鹽酸的標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備，基本原理就是1摩爾的碳酸鈉消耗2摩爾的鹽酸曙博∮悼蹋可參考我剛才說的pH確定的那篇博客，寫的非常詳細(xì)父泳。但需要注意的一點(diǎn)就是般哼，國標(biāo)中要標(biāo)定0.1mol/L的鹽酸用到的工作基準(zhǔn)試劑無水碳酸鈉的質(zhì)量是0.2g（實(shí)在沒有用優(yōu)級純代替，但別用分析純的無水碳酸鈉惠窄，純度達(dá)不到蒸眠，還有就是碳酸鈉要先高溫干燥一下）。
D杆融、回到最初始界面楞卡，是你的方法，然后就可以開始滴定（如下圖）。注意滴定中蒋腮，磁力攪拌子不要碰到溫度傳感器和pH傳感器淘捡。滴定完成后機(jī)器自動停止滴定，界面會自動顯示HCl滴定的體積池摧。然后就可以自己算一下HCl濃度是多少了焦除。
E、最后险绘，要按照purge的程序?qū)⑾到y(tǒng)中的溶液全部purge出系統(tǒng)踢京，Ph感應(yīng)頭這端用純凈水清洗后保存在3M的KCl中，即可關(guān)機(jī)宦棺。
2.3 海能全自動定氮儀的操作
2.3.1 開機(jī)前先打開冷凝水閥（左側(cè)接水管的水龍頭）,換上實(shí)驗(yàn)溶液瓣距，打開電源。注意：氫氧化鈉溶液可以放置幾天代咸，硼酸溶液建議當(dāng)天用當(dāng)天配置蹈丸，鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液第二天用建議避光冷藏保存（因?yàn)辂}酸有揮發(fā)性）。
2.3.2 堿管路溶液置換呐芥，依次點(diǎn)擊：調(diào)試一堿閥—堿泵打開逻杖，待堿管路全部置換為實(shí)驗(yàn)試劑后(大概10秒),依次點(diǎn)擊:堿泵一堿閥關(guān)閉。（注意：順序不能顛倒思瘟，否則會造成儀器壞荸百。）
2.3.3 硼酸管路溶液置換，依次點(diǎn)擊：接收杯排廢閥一排水泵一硼酸泵打開,待硼酸管路全部置換為實(shí)驗(yàn)試劑后(大概15 秒）滨攻，依次點(diǎn)擊：硼酸泵—排水泵—接收杯排廢閥關(guān)閉够话。(注意：順序不能顛倒,否則會造成儀器損壞。)
2.3.4 清洗光绕，其中“換酸清洗“最重要女嘲，每天換酸都要清洗，建議4次诞帐。
2.3.5儀器預(yù)熱 取空白試管一支,上機(jī),依次點(diǎn)擊:測試一自動測試—常規(guī)測試欣尼。輸入標(biāo)定后的標(biāo)準(zhǔn)酸濃度，空白體積設(shè)置為0,硼酸設(shè)置為15ml,稀釋水設(shè)置為10ml,堿液設(shè)置為0,蒸餾時(shí)間設(shè)置為5分鐘停蕉。點(diǎn)擊確定,開始預(yù)熱愕鼓。預(yù)熱3次,三次滴定體積之差小于0.05ml（貝母樣品測定時(shí)預(yù)熱時(shí)滴定體積分別是0.124ml、0.0760ml谷徙、0.132ml）,說明預(yù)熱完成拒啰。樣品與樣品之間不用清洗。
2.3.6空白樣的測定 將消解時(shí)設(shè)置的空白對照上機(jī),測定完慧。樣品重量設(shè)置為0,標(biāo)準(zhǔn)酸濃度設(shè)置為標(biāo)定的濃度,空白體積設(shè)置為0,硼酸設(shè)置為15ml,稀釋水設(shè)置為10ml,堿液設(shè)置為40ml,蒸餾時(shí)間設(shè)置為5min谋旦。將兩次的樣空白的滴定體積取均值作為樣品的空白體積（貝母測定時(shí)空白體積分別為0.12ml和0.115ml）剩失。
2.3.7樣品的測定 樣品重量設(shè)置為0.5xxx(你自己樣品的具體重量，注意2個硫酸銨樣的重量是0.1g),標(biāo)準(zhǔn)酸濃度設(shè)置為標(biāo)定的濃度,空白體積設(shè)置為測定出的空白體積,硼酸設(shè)置為15ml,稀釋水設(shè)置為10ml,堿液設(shè)置為40ml,蒸餾時(shí)間設(shè)置為5min册着。點(diǎn)擊確定,儀器開始自動測定拴孤。（貝母一個樣品測定時(shí)間大概7min左右，測出含氮量平均2.5%）
2.3.8儀器清洗與保養(yǎng)
2.3.8.1取干凈消化管加一半蒸餾水,上機(jī)空蒸,重復(fù)3次甲捏⊙菔欤空蒸就是：標(biāo)準(zhǔn)酸濃度設(shè)置為標(biāo)定的濃度,空白體積設(shè)置為測定出的空白體積,硼酸設(shè)置為15ml,稀釋水設(shè)置為0ml,堿液設(shè)置為0ml,蒸餾時(shí)間設(shè)置為5min。
2.3.8.2然后將所有試劑全部換為蒸餾水（滴定酸不用換) ,依次點(diǎn)擊:調(diào)試一堿閥一堿泵打開;依次點(diǎn)擊:堿泵一堿閥關(guān)閉(每次大概10秒,重復(fù)2-3次)司顿。依次點(diǎn)擊:接收杯排廢閥—排水泵一硼酸泵打開芒粹，依次點(diǎn)擊：硼酸泵—排水泵一接收杯排廢閥關(guān)閉(大概15秒,重復(fù)2-3 次) 。(注意:順序不能顛倒,否則會造成儀器損壞大溜。)
2.3.8.3關(guān)閉電源,關(guān)閉冷凝水閥,并用濕布將儀器表面污漬擦拭干凈化漆。
2.3.8.4若長時(shí)間不使用(超過1周),需用醋酸清洗,將消化管加一半醋酸（不用稀釋），空蒸 2 次钦奋，然后用蒸餾水空蒸3次,確保沒有醋酸殘留座云。
