HEK293細胞系载弄,最全總結
簡介:
293細胞的衍生細胞可分為數(shù)種,比如293T細胞撵颊,293A細胞宇攻,293E細胞,293FT細胞等等倡勇。有網友總結說逞刷,293A是用來包腺病毒的,293T是用來包慢病毒的妻熊】淝常總體而言,293細胞容易轉染扔役,是實驗室最常用的表達興趣基因的細胞株帆喇。
HEK293:最原始的HEK293細胞來源于一個夭折的人類胚胎腎細胞(1973年)。HEK293細胞是原代人胚腎細胞轉染5型腺病毒DNA(Ad5 DNA)而得到的永生化細胞厅目,表達穩(wěn)轉的Ad5 DNA的基因番枚,不易貼壁法严,表達E1A蛋白损敷。
293T: 293T細胞由HEK293細胞衍生而來,是SV40 large T抗原穩(wěn)轉得到的細胞株深啤,貼壁不牢拗馒。293T細胞還表達E1A蛋白,SV40 large T抗原溯街,含有SV40復制起始點與啟動子區(qū)的質劣展穑可以復制。293T細胞容易轉染呈昔,用磷酸鈣挥等、PEI或脂質體轉染,效率均可達90%以上堤尾。除用于基因表達及蛋白生產外肝劲,還用于慢病毒、逆轉錄病毒及腺病毒的包裝。
293T/17細胞是293T細胞中共轉染pBND和pZAP質粒而獲得的具有G418耐受的細胞系辞槐。該細胞系仍保留高轉染效率的特點掷漱。
293T/17SF細胞是在293T細胞中轉入EBV基因形成的轉化細胞系,該細胞系主要用于瞬時轉染及蛋白表達榄檬,類似于293E細胞的作用卜范。
293H細胞是293細胞馴化后得到的、能夠在無血清培養(yǎng)體系下快速生長鹿榜、具有高轉染效率及高效蛋白表達性能的細胞系海雪。該細胞系貼附牢固,主要用于噬菌斑檢測等犬缨。
293A (adherent)細胞是293細胞的衍生株喳魏,傾向于形成單層細胞(monolayer)。在進行病毒滴度測定的空斑試驗(plaque assay)時怀薛,293A細胞是均勻的單層刺彩,沒有細胞重疊和間隙。
293E細胞是293-H細胞中插入EBNA-1基因的細胞系枝恋,該基因能夠穩(wěn)定表達EBV病毒的EBNA1蛋白创倔,含有EBV復制起點(oriP)的重組表達質粒。
293-6E細胞是在293-H細胞中插入截短過后的EBNA-1基因的細胞系焚碌,其能夠在無血清培養(yǎng)基中高表達生產蛋白及病毒載體畦攘。293-6E細胞為懸浮狀態(tài),主要用于蛋白表達十电。
293F細胞是一類能夠在無血清中高表達蛋白的野生型293細胞系(F是Fast-growth的首字母)知押。
293FT細胞是在293F細胞系中插入pCMV-SPORT6-TAg.Neo質粒的轉化細胞系,能夠快速增殖鹃骂,易轉染台盯,其能夠用于慢病毒載體的生產。293FT細胞能制造高滴度慢病毒畏线。
293FTM細胞來源于Flp-InTMT-RETM293細胞静盅,該細胞系中穩(wěn)定轉染了ecotropic receptor質粒及MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap)報告質粒。該細胞系主要用于蛋白互作的篩選寝殴。
293S(suspension)細胞是被馴化成能夠懸浮培養(yǎng)且能夠耐受低鈣離子培養(yǎng)條件的293細胞系蒿叠。
293SG是293S細胞用甲基磺酸乙酯誘變處理,蓖麻毒素選擇后再轉染pcDNA6/TR質粒得到耐受蓖麻毒素的細胞系蚣常。該細胞系為懸浮培養(yǎng)市咽,缺少N-乙酰氨基葡萄糖基轉移酶 (N-acetyl-glucosaminyl transferase I, GnTI)活性,可促進蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修飾抵蚊。該細胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表達施绎。此外曼验,該細胞系中具有四環(huán)素表達抑制基因,可用于四環(huán)素誘導的蛋白表達研究粘姜。
293SGGD細胞系是在293SG轉染pcDNA3.1-zeo-STendoT質粒的細胞系鬓照,其主要用于糖基化工程研究中。
根據(jù)各自的用途歸納下來孤紧,293細胞主要的細胞系可分為293T細胞-瞬時轉染豺裆,蛋白表達,293H/A細胞-噬菌斑或空斑實驗号显、293E細胞-重組蛋白的生產臭猜、293F細胞-慢病毒的生產和293S細胞-糖基化蛋白的表達。
參考文獻: Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.
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