一、主題:批量下載所有illunima官方試劑盒的測序標(biāo)簽index序列
步驟:
二莹捡、登錄illunima官網(wǎng)巍耗,下載Illumina Experiment Manager軟件
軟件介紹網(wǎng)址:https://support.illumina.com/sequencing/sequencing_software/experiment_manager.html
下載軟件:可以運(yùn)行與win7栈虚,win10上灯节。
Latest Updates:
Illumina Experiment Manager v1.14 10/02/2017
Illumina Experiment Manager Software Guide 09/30/2017
該軟件最后更新時間為,2017年10月09號
該軟件操作說明說最后更新時間為口柳,2017年09月30
軟件功能介紹:
Illumina Experiment Manager是用于測序上機(jī)時苹粟,實驗員設(shè)置樣品拆分的samplesheet表格,并設(shè)置測序時分析的插件跃闹,分析參數(shù)嵌削。
設(shè)置完成后,將將samplesheet表格拷貝illunima測序儀器的對應(yīng)存放文件夾望艺。
建庫試劑盒的測序標(biāo)簽index是用于區(qū)分各文庫苛秕,在同一條lane上,不同文庫的兩端index確保不同找默。在測序接頭上的8-12bp的標(biāo)簽艇劫,illunima官方的規(guī)格一般為8bp,單端i5 * i7 = 8 * 12 =96 個組合惩激。且不同試劑盒的index標(biāo)簽不相同店煞。
如果一個run的文庫數(shù)量比較少,默認(rèn)按建庫試劑盒上推薦的組合上機(jī)风钻,確保在同一個測序位置的ATCG各堿基比例平衡顷蟀,否則報錯。
如果一個run的文庫數(shù)量比較多骡技,可以按照標(biāo)簽的順序鸣个,先用i7再用i5的排序組合,進(jìn)行使用布朦。
由于標(biāo)簽只存在建庫試劑盒的操作說明書上囤萤,pdf復(fù)制時容易格式錯誤。而填寫Illumina Experiment Manager只能導(dǎo)出samplesheet選擇的index標(biāo)簽是趴,不能批量導(dǎo)出試劑盒的所有標(biāo)簽涛舍。
導(dǎo)致
1,標(biāo)簽的管理唆途、填寫做盅、檢查十分不方便缤削。
2窘哈,無法檢測外來文庫是否與現(xiàn)有文庫標(biāo)簽重復(fù)(客戶送文庫前吹榴,請在送樣單上,提供該文庫的標(biāo)簽信息滚婉,接頭信息图筹,試劑盒信息)
批量導(dǎo)出illunima標(biāo)簽的方法
setp01:將Illumina Experiment Manager.exe右鍵解壓成文件夾(不需要安裝)
setp02:進(jìn)入Illumina Experiment Manager\SamplePrepKits目錄,列出了當(dāng)前在市場的所有的Illunima標(biāo)簽試劑盒
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|-- Nextera\ Mate\ Pair.txt
|-- Nextera\ Rapid\ Capture\ Enrichment.txt
|-- Nextera.txt
|-- Nextera\ XT.txt
|-- Nextera\ XT\ v2\ Set\ A.txt
|-- Nextera\ XT\ v2\ Set\ B.txt
|-- Nextera\ XT\ v2\ Set\ C.txt
|-- Nextera\ XT\ v2\ Set\ D.txt
|-- Nextera\ XT\ v2.txt
|-- Small\ RNA.txt
|-- SureCell\ WTA\ 3\ Prime.txt
|-- Targeted\ RNA\ Expression.txt
|-- TruSeq\ Amplicon.txt
|-- TruSeq\ Bovine.txt
|-- TruSeqDna.txt
|-- TruSeq\ Exome\ 8x3.txt
|-- TruSeq\ Exome\ 8x6.txt
|-- TruSeq\ Exome\ 8x9.txt
|-- TruSeq\ Exome\ Kit\ 8x12.txt
|-- TruSeq\ HT.txt
|-- TruSeq\ LT.txt
|-- TruSeq\ Methyl\ Capture\ EPIC.txt
|-- TruSeq\ Rapid\ Exome.txt
|-- TruSeqStrandedMrna.txt
|-- TruSeq\ Synthetic\ Long-Read\ DNA.txt
|-- TruSight\ Enrichment.txt
|-- TruSight\ Tumor\ -\ 15\ Genes.txt
`-- TruSight\ Tumor.txt
step03:根據(jù)使用的試劑盒名稱找到對應(yīng)的文件让腹,并使用前远剩,確保是否與該試劑盒建庫說明書上的標(biāo)簽序列是否一致。
如TruSight Tumor.txt試劑盒
[I7]
A701 ATCACGAC
A702 ACAGTGGT
A703 CAGATCCA
A704 ACAAACGG
A705 ACCCAGCA
A706 AACCCCTC
A707 CCCAACCT
A708 CACCACAC
A709 GAAACCCA
A710 TGTGACCA
A711 AGGGTCAA
A712 AGGAGTGG
[I5]
A501 TGAACCTT
A502 TGCTAAGT
A503 TGTTCTCT
A504 TAAGACAC
A505 CTAATCGA
A506 CTAGAACA
A507 TAAGTTCC
A508 TAGACCTA
step04:將序列放在excel表格中進(jìn)行編輯使用