可以對比一下BIOG的操作:1.請自行準備:無水乙醇、15mL離心管浩考。
2.取出洗滌液,按以下操作:
a) 洗滌液A:31.5mL加入13.5mL無水乙醇被盈;63mL加入27mL無水乙醇。
b) 洗滌液B:13.5mL加入31.5mL無水乙醇只怎;27mL加入63mL無水乙醇。
c) 配制好的洗滌液如出現沉淀尝盼,可在37℃溶解吞滞,搖勻后使用盾沫。
3.取15mL離心管裁赠,加入1500μL樣本赴精,30μLDNA Carrier混合均勻佩捞,加入1500μL 裂解液及150μL 消化液蕾哟,振蕩混勻一忱,56℃水浴10 分鐘。
4.加入6000μL無水乙醇帘营,輕輕顛倒混勻票渠,如有半透明懸浮物芬迄,不影響DNA的提取與后續(xù)實驗问顷。
5.將吸附柱放入收集管內,將4590μL上述溶液轉入吸附柱內杜窄,靜置2 分鐘,5,000 rpm 離心2分鐘塞耕,棄收集管內廢液;
6.將吸附柱放回收集管內嘴瓤,將剩余4590μL溶液轉移至吸附柱內,重復步驟5纱注。
7.將吸附柱放回收集管內,加3750μL 洗滌液A至吸附柱內狞贱,5,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內廢液瞎嬉。
8.將吸附柱放回收集管內,加3750μL 洗滌液B至吸附柱內厚柳,5,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內廢液别垮。
9.將吸附柱放回收集管內便监,5,000 rpm 離心2 分鐘碳想,離去殘留的洗滌液烧董。
10.取出吸附柱,放入新的15 mL離心管內胧奔,加入250-400μL 洗脫液逊移,靜置3 分鐘龙填,5,000 rpm離心3 分鐘拐叉,收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存扇商。如需濃縮核酸,則可繼續(xù)進行后續(xù)步驟钳吟。
11.于洗脫液中加入800ul無水乙醇廷粒,輕輕顛倒混勻红且,5,000 rpm 離心5分鐘,棄上清暇番。
12.開蓋室溫放置5min嗤放,待乙醇揮發(fā)后壁酬,加入30-50ul洗脫液溶解核酸次酌。提取的DNA即可用于下一步實驗或-20℃保存舆乔。
FastDNA SPIN Kit for Soil中文說明書簡介 FastDNA SPIN Kit for Soil的目的是從土壤樣品中提供基因組DNA供PCR使用岳服,在不到30min內,快速DNA提取方法排除使用有害的有機溶劑吊宋,如苯酚...