1個(gè)載體連3個(gè)片段，都是用pcr方式擴(kuò)增垂寥，能擴(kuò)出正確條帶督禽，回收后還對(duì)載體DpnI酶切處理了脆霎，加入seamless混合酶50℃反應(yīng)半小時(shí)到50分鐘左右，轉(zhuǎn)化涂板能長(zhǎng)滿板狈惫，可就是用驗(yàn)證引物菌P驗(yàn)證沒(méi)一個(gè)有條帶的睛蛛，思來(lái)想去查了很多就是不知道問(wèn)題出在哪里了。請(qǐng)求各路大神幫忙解答一下胧谈，謝謝了忆肾！
Gibson無(wú)縫克隆總是失敗
?著作權(quán)歸作者所有,轉(zhuǎn)載或內(nèi)容合作請(qǐng)聯(lián)系作者
- 文/潘曉璐 我一進(jìn)店門，熙熙樓的掌柜王于貴愁眉苦臉地迎上來(lái)褒繁，“玉大人亦鳞，你說(shuō)我怎么就攤上這事“艋担” “怎么了蚜迅？”我有些...
- 文/不壞的土叔 我叫張陵，是天一觀的道長(zhǎng)俊抵。 經(jīng)常有香客問(wèn)我谁不，道長(zhǎng)，這世上最難降的妖魔是什么徽诲？ 我笑而不...
- 正文 為了忘掉前任刹帕，我火速辦了婚禮，結(jié)果婚禮上谎替，老公的妹妹穿的比我還像新娘偷溺。我一直安慰自己，他們只是感情好钱贯，可當(dāng)我...
- 文/花漫 我一把揭開白布挫掏。 她就那樣靜靜地躺著，像睡著了一般秩命。 火紅的嫁衣襯著肌膚如雪尉共。 梳的紋絲不亂的頭發(fā)上褒傅，一...
- 那天，我揣著相機(jī)與錄音袄友，去河邊找鬼殿托。 笑死，一個(gè)胖子當(dāng)著我的面吹牛剧蚣，可吹牛的內(nèi)容都是我干的支竹。 我是一名探鬼主播，決...
- 文/蒼蘭香墨 我猛地睜開眼鸠按，長(zhǎng)吁一口氣：“原來(lái)是場(chǎng)噩夢(mèng)啊……” “哼礼搁！你這毒婦竟也來(lái)了？” 一聲冷哼從身側(cè)響起目尖，我...
- 序言：老撾萬(wàn)榮一對(duì)情侶失蹤馒吴，失蹤者是張志新（化名）和其女友劉穎，沒(méi)想到半個(gè)月后卑雁，有當(dāng)?shù)厝嗽跇淞掷锇l(fā)現(xiàn)了一具尸體募书，經(jīng)...
- 正文 獨(dú)居荒郊野嶺守林人離奇死亡绪囱，尸身上長(zhǎng)有42處帶血的膿包…… 初始之章·張勛 以下內(nèi)容為張勛視角 年9月15日...
- 正文 我和宋清朗相戀三年测蹲，在試婚紗的時(shí)候發(fā)現(xiàn)自己被綠了。 大學(xué)時(shí)的朋友給我發(fā)了我未婚夫和他白月光在一起吃飯的照片鬼吵。...
- 正文 年R本政府宣布涣脚，位于F島的核電站示辈，受9級(jí)特大地震影響，放射性物質(zhì)發(fā)生泄漏遣蚀。R本人自食惡果不足惜矾麻，卻給世界環(huán)境...
- 文/蒙蒙 一肌访、第九天 我趴在偏房一處隱蔽的房頂上張望主巍。 院中可真熱鬧，春花似錦则拷、人聲如沸玖喘。這莊子的主人今日做“春日...
- 文/蒼蘭香墨 我抬頭看了看天上的太陽(yáng)累奈。三九已至贬派，卻和暖如春急但，著一層夾襖步出監(jiān)牢的瞬間，已是汗流浹背赠群。 一陣腳步聲響...
- 正文 我出身青樓突委，卻偏偏與公主長(zhǎng)得像，于是被迫代替她去往敵國(guó)和親冬三。 傳聞我的和親對(duì)象是個(gè)殘疾皇子匀油，可洞房花燭夜當(dāng)晚...
推薦閱讀更多精彩內(nèi)容
- 最近開始了分子生物學(xué)中質(zhì)粒設(shè)計(jì)和構(gòu)建實(shí)驗(yàn)，其中設(shè)計(jì)到無(wú)縫連接克隆勾笆，正好借著這個(gè)機(jī)會(huì)溫故和知新敌蚜，一只小菜鳥的學(xué)習(xí)...
- 上一部分中介紹了最最基礎(chǔ)的PCR反應(yīng)和傳統(tǒng)分子克隆，包括內(nèi)切酶窝爪，連接酶弛车，外切酶，PCR擴(kuò)增蒲每，轉(zhuǎn)化等等是之后所有分子...
- 轉(zhuǎn)載纷跛，自己備份用，侵刪 腦科學(xué)世界[https://www.zhihu.com/people/cai-guo-ho...
- 史晏榕, 孫宇輝 摘要: DNA克隆和組裝技術(shù)是重要的分子生物學(xué)工具望蜡。近年來(lái)唤崭，隨著合成生物學(xué)的飛速發(fā)展，對(duì)大片段D...
