產品特點
◎操作簡便快速,20分鐘左右可獲得理想的RNA因妇;
◎提取RNA純度高问潭,無抑制劑,1.8<A260/A280≤2.0婚被;
◎產量更高狡忙,較國內同類產品高出20%;
◎樣本范圍廣址芯,可用于新鮮灾茁、冷凍或陳舊的全血樣本。
產品介紹
BIOG專門用于血液RNA的提取純化谷炸。本試劑盒采用獨特的裂解液配方北专,可直接從新鮮、冷凍或陳舊的全血中提取高質量的基因組RNA旬陡,也可以直接提取得到血液中感染的微生物或轉移的腫瘤細胞RNA逗余, 省去了一般血液RNA提取試劑盒所需的白細胞分離步驟,操作簡便快速季惩,只需20分鐘左右即可完成血液RNA提取录粱,并且RNA提取得率較高,可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因組RNA画拾。BIOG Blood RNA Isolate Kit采用了最新的優(yōu)質離子膜啥繁,裂解液和洗脫液經過多次優(yōu)化,提取得到的RNA純度更高青抛,最大限度地去除了蛋白旗闽、色素、脂類等雜質污染蜜另,可以直接應用于Northern 雜交适室、RT-PCR、Real Time RT-PCR等举瑰。
操作步驟?(請自行準備無水乙醇捣辆、異丙醇和1.5mLRNase-free滅菌離心管):
1. 取出洗滌液,按以下操作:
a) 洗滌液A:21mL加入9mL無水乙醇此迅;42mL加入18mL無水乙醇汽畴,混勻旧巾。
b) 洗滌液B:9mL加入21mL無水乙醇;18mL加入42mL無水乙醇忍些,混勻鲁猩。
c) 配制好的洗滌液如出現(xiàn)沉淀,可在37℃溶解罢坝,搖勻后使用廓握。
2. 取1.5mLRNase-free滅菌離心管,加入200μL血液樣本嘁酿,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液隙券,振蕩混勻,65℃水浴10 分鐘痹仙。
3. 加入150μL異丙醇(總體積的25%)是尔,混合均勻殉了,如有半透明懸浮物开仰,不影響RNA的提取與后續(xù)實驗。
4. 將吸附柱放入收集管內薪铜,將上述溶液轉入吸附柱內众弓,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內廢液隔箍;
5. 將吸附柱放回收集管內谓娃,加500μL 洗滌液A至吸附柱內,12,000 rpm 離心1 分鐘蜒滩,棄收集管內廢液滨达。
6. 將吸附柱放回收集管內,加500μL 洗滌液B至吸附柱內俯艰,12,000 rpm 離心1 分鐘捡遍,棄收集管內廢液。
7. 按每份樣本40μL 取洗脫液(如10份提取樣本竹握,即取400μL 洗脫液)画株,放置于滅菌1.5mL離心管,65℃預熱啦辐。
8. 將吸附柱放回收集管內谓传,12,000 rpm 離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液芹关。
9. 取出吸附柱续挟,放入新的1.5mL RNase-free滅菌離心管內,在吸附柱中心加入40 μL預熱洗脫液侥衬,靜置2分鐘庸推,12,000 rpm 離心1分鐘常侦,收集RNA溶液。提取的RNA即可用于下一步實驗或-70℃保存贬媒。
BIOG注意事項:
1.裂解液聋亡、洗滌液含有刺激性化學物質际乘,操作過程請做好防護措施坡倔,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻脖含。如不慎沾染皮膚或眼睛罪塔,請立即用清水或生理鹽水沖洗关拒,必要時請就醫(yī)。
2.如血液量不足200μL,請用0.85% 生理鹽水補至200μL归露;如血液量超出200μL剧包,請使用BIOG中量血液RNA提取試劑盒或BIOG血液富集RNA提取試劑盒一铅。
3. 如果提取的血液為鳥類馅闽、禽類的血液福也,因有核紅細胞較多现喳,提取血液量應適當減少嗦篱,研究者應先進行優(yōu)化實驗,選擇合適用量灸促。
4.為防RNA酶污染诫欠,實驗過程中最好戴一次性干凈手套、口罩浴栽,使用處理過的無RNA酶的容器和無RNA酶的超純水荒叼。
5.提取的RNA如暫不使用,應-70℃保存典鸡,可適當加入RNA保護因子(貨號:51090被廓,一般40μLRNA溶液加入2μL)。