產(chǎn)品特點
◎操作簡便快速柑潦,20分鐘左右可獲得理想的RNA淑蔚;
◎提取RNA純度高,無抑制劑勘究,1.8<A260/A280≤2.0矮湘;
◎產(chǎn)量更高,較國內(nèi)同類產(chǎn)品高出20%口糕;
◎樣本范圍廣缅阳,可用于新鮮、冷凍或陳舊的全血樣本景描。
產(chǎn)品介紹
BIOG專門用于血液RNA的提取純化十办。本試劑盒采用獨特的裂解液配方,可直接從新鮮超棺、冷凍或陳舊的全血中提取高質(zhì)量的基因組RNA向族,也可以直接提取得到血液中感染的微生物或轉(zhuǎn)移的腫瘤細胞RNA, 省去了一般血液RNA提取試劑盒所需的白細胞分離步驟棠绘,操作簡便快速件相,只需20分鐘左右即可完成血液RNA提取,并且RNA提取得率較高氧苍,可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因組RNA夜矗。BIOG Blood RNA Isolate Kit采用了最新的優(yōu)質(zhì)離子膜,裂解液和洗脫液經(jīng)過多次優(yōu)化候引,提取得到的RNA純度更高侯养,最大限度地去除了蛋白、色素澄干、脂類等雜質(zhì)污染逛揩,可以直接應用于Northern 雜交、RT-PCR麸俘、Real Time RT-PCR等辩稽。
操作步驟?(請自行準備無水乙醇、異丙醇和1.5mLRNase-free滅菌離心管):
1. 取出洗滌液从媚,按以下操作:
a) 洗滌液A:21mL加入9mL無水乙醇逞泄;42mL加入18mL無水乙醇,混勻拜效。
b) 洗滌液B:9mL加入21mL無水乙醇喷众;18mL加入42mL無水乙醇,混勻紧憾。
c) 配制好的洗滌液如出現(xiàn)沉淀到千,可在37℃溶解,搖勻后使用赴穗。
2. 取1.5mLRNase-free滅菌離心管憔四,加入200μL血液樣本膀息,再加入200μL 裂解液及40μL 消化液,振蕩混勻了赵,65℃水浴10 分鐘潜支。
3. 加入150μL異丙醇(總體積的25%),混合均勻柿汛,如有半透明懸浮物冗酿,不影響RNA的提取與后續(xù)實驗。
4. 將吸附柱放入收集管內(nèi)络断,將上述溶液轉(zhuǎn)入吸附柱內(nèi)已烤,12,000 rpm 離心1 分鐘,棄收集管內(nèi)廢液妓羊;
5. 將吸附柱放回收集管內(nèi)胯究,加500μL 洗滌液A至吸附柱內(nèi),12,000 rpm 離心1 分鐘躁绸,棄收集管內(nèi)廢液裕循。
6. 將吸附柱放回收集管內(nèi),加500μL 洗滌液B至吸附柱內(nèi)净刮,12,000 rpm 離心1 分鐘剥哑,棄收集管內(nèi)廢液。
7. 按每份樣本40μL 取洗脫液(如10份提取樣本淹父,即取400μL 洗脫液)株婴,放置于滅菌1.5mL離心管,65℃預熱暑认。
8. 將吸附柱放回收集管內(nèi)困介,12,000 rpm 離心2 分鐘,離去殘留的洗滌液蘸际。
9. 取出吸附柱座哩,放入新的1.5mL RNase-free滅菌離心管內(nèi),在吸附柱中心加入40 μL預熱洗脫液粮彤,靜置2分鐘根穷,12,000 rpm 離心1分鐘,收集RNA溶液导坟。提取的RNA即可用于下一步實驗或-70℃保存屿良。
BIOG注意事項:
1.裂解液、洗滌液含有刺激性化學物質(zhì)惫周,操作過程請做好防護措施尘惧,避免直接接觸皮膚,防止吸入口鼻闯两。如不慎沾染皮膚或眼睛褥伴,請立即用清水或生理鹽水沖洗,必要時請就醫(yī)漾狼。
2.如血液量不足200μL重慢,請用0.85% 生理鹽水補至200μL;如血液量超出200μL逊躁,請使用BIOG中量血液RNA提取試劑盒或BIOG血液富集RNA提取試劑盒似踱。
3. 如果提取的血液為鳥類、禽類的血液稽煤,因有核紅細胞較多核芽,提取血液量應適當減少,研究者應先進行優(yōu)化實驗酵熙,選擇合適用量轧简。
4.為防RNA酶污染,實驗過程中最好戴一次性干凈手套匾二、口罩哮独,使用處理過的無RNA酶的容器和無RNA酶的超純水。
5.提取的RNA如暫不使用察藐,應-70℃保存皮璧,可適當加入RNA保護因子(貨號:51090,一般40μLRNA溶液加入2μL)分飞。