背景：
1）多基因表達(dá)載體構(gòu)建已經(jīng)成為多基因轉(zhuǎn)化策略的關(guān)鍵技術(shù)。將多個(gè)基因構(gòu)建在同一載體上，構(gòu)建融合基因表達(dá)載體轉(zhuǎn)化植物節(jié)省人力物力，提高效率，減少多次轉(zhuǎn)化后代分離和重組問題儒搭。用連接肽構(gòu)建融合基因轉(zhuǎn)化可以是多個(gè)基因的表達(dá)同步切表達(dá)水平相當(dāng)，對(duì)基因可控性高芙贫。與連鎖基因轉(zhuǎn)化相比搂鲫，減少啟動(dòng)子數(shù)量，降低基因沉默幾率屹培，為復(fù)合性狀轉(zhuǎn)基因植物獲得提供新思路默穴。常用包括2A序列，LP4序列褪秀，IRES序列蓄诽，NIa序列。
2A：在植物中常用的2A序列是 來源于口蹄疫病毒的一段多肽(de Felipe et al. 2006; Ryan et al. 1991)媒吗。?實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：當(dāng)2A上游蛋白沒有信號(hào)肽時(shí)仑氛，下游帶有信號(hào) 肽的蛋白可以正確的定位；當(dāng)2A上游蛋白含有共翻譯的信號(hào)肽時(shí)，下游不帶信號(hào)肽的蛋白 及帶有翻譯后信號(hào)肽的蛋白定位在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)锯岖，帶有共翻譯信號(hào)肽的蛋白定位在線粒體中(de ?Felipe 2004)介袜。
LP4是來源于鳳仙花(Impatiens balsamina L.)種子中表達(dá)的一段多肽。鳳仙花種子LP4是由十六個(gè)氨基酸組成的一段多肽（SNAADEVATPEDVEPG）出吹，該多肽的剪切發(fā)生在翻譯水平遇伞，由內(nèi)源的蛋白酶識(shí)別并剪切。剪切位點(diǎn)在植物體內(nèi)捶牢，留下較少的位點(diǎn)鸠珠，對(duì)成熟肽影響小。
LP4/2A序列即LP4與2A的雜合序列秋麸，即將LP4的前九個(gè)氨基酸和2A融合起來作為連接肽渐排。對(duì)成熟肽的功能影響小，踢出2A留下的多余的氨基酸序列灸蟆。
2）PIM（phosphomannose isomerase）自然界廣泛存在驯耻，植物界大多無編碼基因，作為正向篩選體系炒考，表型是生長(zhǎng)抑制和不抑制可缚。
結(jié)果：
1）植物表達(dá)載體構(gòu)建：前三個(gè)看不同連接肽的剪切效率；第三第四看基因前后位置對(duì)連接肽剪切效率影響
2）連接肽的剪切效率各不相同票腰，LP4/2A的剪切效率最強(qiáng)城看，在80%-100%之間女气。2A的剪切效率在50%-60%之間杏慰， LP4的剪切效率最低，在20%-30%之間
3）轉(zhuǎn)基因玉米的構(gòu)建
4）商業(yè)化的2Am1和2Am2
總結(jié)：中文果然還是yyds炼鞠，簡(jiǎn)單明了缘滥，兩篇文獻(xiàn)就略懂一個(gè)東西；需要加把勁把復(fù)雜的搞懂谒主。
