內(nèi)切酶和外切酶
核酸內(nèi)切酶是一類能從DNA分子中間水解磷酸二酯鍵暖混,從而切斷雙鏈DNA的核酸水解酶。核酸外切酶是一類能從多核苷酸鏈的一段開始按序催化水解3,5-磷酸二酯鍵翁授,降解核苷酸的酶拣播。切點(diǎn)要求不同核酸內(nèi)切酶的切點(diǎn)大多很嚴(yán)格,要求專一的核苷酸順序收擦,即識(shí)別序列贮配。而核酸外切酶的切點(diǎn)要求比較低。
內(nèi)切酶——限制性內(nèi)切酶
同一DNA用不同的限制酶進(jìn)行切割塞赂,從而獲得各種限制酶的切割位點(diǎn)泪勒,由此建立的位點(diǎn)圖譜有助于我們對(duì)DNA結(jié)構(gòu)進(jìn)行分析。是病原變異宴猾、毒株鑒別圆存、分型及了解基因結(jié)構(gòu)和進(jìn)行流行病學(xué)研究的有效方法。
外切酶Exonuclease?
外切酶可以區(qū)別出分子鏈的3‘或5‘開始剪切仇哆,對(duì)單鏈DNA或雙鏈DNA具有特異作用的酶沦辙。可利用這些酶水解方式的差異來分析核酸結(jié)構(gòu)讹剔。
例如:核酸外切酶I應(yīng)用:
從PCR混合物中去除引物
從核酸混合物中去除含有3油讯;羥基末端的單鏈DNA.
檢測(cè)含有3‘羥基末端的單鏈DNA的存在